1、 大鼠 P糖蛋白 (P-gp)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围： 96T 15pg/ml-400pg/ml 使用目的： 本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中 P 糖蛋白 (P-gp)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 P 糖蛋白 (P-gp)水平。用纯化的大鼠 P 糖蛋白(P-gp)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 P 糖蛋白 (P-gp)， 再与 HRP 标记的 P 糖蛋白 (P-gp)抗体结合，形成抗体 -抗原 -酶标抗体复合物，经过彻底洗涤 后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化
2、成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 P 糖蛋白 (P-gp)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（ OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠 P 糖蛋白 (P-gp)浓度。 试剂盒组成 1 30 倍浓缩洗涤液 20ml 1 瓶 7 终止液 6ml 1 瓶 2 酶标试剂 6ml 1 瓶 8 标准品（ 800pg/ml） 0.5ml 1 瓶 3 酶标包被板 12 孔 8 条 9 标准品稀释液 1.5ml 1 瓶 4 样品稀释液 6ml 1 瓶 10 说明书 1 份 5 显色剂 A 液 6ml 1 瓶 11 封板膜 2 张 6 显色剂 B 液 6ml 1/瓶 1
3、2 密封袋 1 个 标本要求 1标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验，可将标本放于 -20保存，但应避免反复冻融 2不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（ HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 400pg/ml 5 号标准品 150 l 的原倍标准品加入 150 l 标准品稀释液 200pg/ml 4 号标准品 150 l 的 5 号标准品加入 150 l 标准品稀释液 100pg/ml 3 号标准品 150 l 的 4 号标准品加入 150
4、 l 标准品稀释液 50pg/ml 2 号标准品 150 l 的 3 号标准品加入 150 l 标准品稀释液 25pg/ml 1 号标准品 150 l 的 2 号标准品加入 150 l 标准品稀释液 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确 加样 50 l，待测样品孔中先加样品稀释液 40 l，然后再加待测样品 10 l（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置 37温育 30 分钟。 4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀
5、释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50 l，空白孔除外。 7. 温育：操作同 3。 8. 洗涤：操作同 5。 9. 显色：每孔先加入显色剂 A50 l，再加入显色剂 B50 l，轻轻震荡混匀， 37避光显色 15 分钟 . 10. 终止：每孔加终止液 50 l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零， 450nm 波长依序测量各孔的吸光度（ OD 值）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。 操作程序总结： 计算 以标准物的浓度为横坐标， OD 值为纵坐标
6、，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标 准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓 度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 注意事项 1试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4 请每次测定的同时做标准曲线
7、，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值 大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液 稀释一定倍数（ n 倍）后再测定，计 算时请最后乘以总稀释倍数（ n 5）。 5 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6底物请避光保存。 7严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准 . 8所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1试剂盒保存：； 2-8。 2有效期： 6 个月大鼠 I型原胶原 N端前肽（ PINP）酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围： 96T 0.6 g/L -1
8、6 g/L 使用 目的： 本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中 I 型原胶原 N 端前肽（ PINP）含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 I 型原胶原 N 端前肽（ PINP）水平。用纯 化的大鼠 I 型原胶原 N 端前肽（ PINP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微 孔中依次加入 I 型原胶原 N 端前肽（ PINP），再与 HRP 标记的 I 型原胶原 N 端前肽（ PINP） 抗体结合，形成抗体 -抗原 -酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下 转化成最终的黄色。颜色的深浅
9、和样品中的I 型原胶原 N 端前肽（ PINP）呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（ OD 值），通 过标准曲线计算样品中大鼠 I 型原胶原 N 端前肽（ PINP）浓度。 试剂盒组成 1 30 倍浓缩洗涤液 20ml 1 瓶 7 终止液 6ml 1 瓶 2 酶标试剂 6ml 1 瓶 8 标准品（ 32 g/L） 0.5ml 1 瓶 3 酶标包被板 12 孔 8 条 9 标准品稀释液 1.5ml 1 瓶 4 样品稀释液 6ml 1 瓶 10 说明书 1 份 5 显色剂 A 液 6ml 1 瓶 11 封板膜 2 张 6 显色剂 B 液 6ml 1/瓶 12 密封袋 1 个 标本要
10、求 1标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验，可将标本放于 -20保存，但应避免反复冻融 2不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（ HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 16 g/L 5 号标准品 150 l 的原倍标准品加入 150 l 标准品稀释液 8 g/L 4 号标准品 150 l 的 5 号标准品加入 150 l 标准品稀释液 4 g/L 3 号标准品 150 l 的 4 号标准品加入 150 l 标准品稀释液 2 g/L 2 号标准
11、品 150 l 的 3 号标准品加入 150 l 标准品稀释液 1 g/L 1 号标准品 150 l 的 2 号标准品加入 150 l 标准品稀释液 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50 l，待测样品孔中先加样品稀释液40 l，然后再加待测样品 10 l（样 品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置 37温育 30 分钟。 4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干
12、，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50 l，空白孔除外。 7. 温育：操作同 3。 8. 洗涤：操作同 5。 9. 显色：每孔先加入显色剂 A50 l，再加入显色剂 B50 l，轻轻震荡混匀， 37避光显色 10 分钟 . 10. 终止：每孔加终止液 50 l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零， 450nm 波长依序测量各孔的吸光度（ OD 值）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。 操作程序总结： 计算 以标准物的浓度为横坐标， OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD 值由标准曲
13、线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标 准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数， 即为样品的实际浓度。 注意事项 1试剂盒从冷藏环境中取出应 在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD
14、值大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（ n 倍）后再测定，计 算时请最后乘以总稀释倍数（ n 5）。 5 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6底物请避光保存。 7严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准 . 8所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1试剂盒保存：； 2-8。 2有效期： 6 个月 _ 大鼠 B细胞淋巴瘤因子 2(Bcl-2)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围： 96T 6 g/L -200 g/L 使用目的： 本试剂盒用于测定大鼠血清、血
15、浆及相关液体样本中 B 细胞淋巴瘤因子 2(Bcl-2)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 B 细胞淋巴瘤因子 2(Bcl-2)水平。用纯化 的大鼠 B 细胞淋巴瘤因子 2(Bcl-2)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中 依次加入 B 细胞淋巴瘤因子 2(Bcl-2)，再与 HRP 标记的 B 细胞淋巴瘤因子 2(Bcl-2)抗体 结合，形成抗体 -抗原 -酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 B 细 胞淋巴瘤因子 2(Bcl-2)呈正 相关。用酶
16、标仪在 450nm 波长下测定吸光度（ OD 值），通过标 准曲线计算样品中大鼠 B 细胞淋巴瘤因子 2(Bcl-2)浓度。 试剂盒组成 1 30 倍浓缩洗涤液 20ml 1 瓶 7 终止液 6ml 1 瓶 2 酶标试剂 6ml 1 瓶 8 标准品（ 400 g/L） 0.5ml 1 瓶 3 酶标包被板 12 孔 8 条 9 标准品稀释液 1.5ml 1 瓶 4 样品稀释液 6ml 1 瓶 10 说明书 1 份 5 显色剂 A 液 6ml 1 瓶 11 封板膜 2 张 6 显色剂 B 液 6ml 1/瓶 12 密封袋 1 个 标本要求 1标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快
17、进行实验。若不能 马上进行试验，可将标本放于 -20保存，但应避免反复冻融 2不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（ HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 200 g/L 5 号标准品 150 l 的原倍标准品加入 150 l 标准品稀释液 100 g/L 4 号标准品 150 l 的 5 号标准品加入 150 l 标准品稀释液 50 g/L 3 号标准品 150 l 的 4 号标准品加入 150 l 标准品稀释液 25 g/L 2 号标准品 150 l 的 3 号标准品加入 150 l 标
18、准品稀释液 12.5 g/L 1 号标准品 150 l 的 2 号标准品加入 150 l 标准品稀释液 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50 l，待测样品孔中先加样品稀释液40 l，然后再加待测样品 10 l（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不 触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置 37温育 30 分钟。 4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重
19、复 5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50 l，空白孔除外。 7. 温育：操作同 3。 8. 洗涤：操作同 5。 9. 显色：每孔先加入显色剂 A50 l，再加入显色剂 B50 l，轻轻震荡混匀， 37避光显色 10 分钟 . 10. 终止：每孔加终止液 50 l，终止反应（此时蓝色立转黄色） 。 11. 测定：以空白空调零， 450nm 波长依序测量各孔的吸光度（ OD 值）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。 操作程序总结： 计算 以标准物的浓度为横坐标， OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物
20、的浓度与 OD 值计算出标 准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数， 即为样品的实际浓度。 注意事项 1试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如 未用完，板条应装入密封袋中保存。 2浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样
21、品稀释液稀释一定倍数（ n 倍）后再测定，计 算时请最后乘以总稀释倍数（ n 5）。 5 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6底物请避光保 存。 7严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准 . 8所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1试剂盒保存：； 2-8。 2有效期： 6 个月 _ 大鼠 Bcl-2相关 X蛋白 (BAX)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围： 96T 1 g/L -40 g/L 使用目的： 本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中 Bcl-2 相关 X 蛋
22、白 (BAX)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标 本中大鼠 Bcl-2 相关 X 蛋白 (BAX)水平。用纯化的大 鼠 Bcl-2 相关 X 蛋白 (BAX)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 Bcl-2 相关 X 蛋白 (BAX)，再与 HRP 标记的 Bcl-2 相关 X 蛋白 (BAX)抗体结合，形成抗体-抗原 -酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成 蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的 Bcl-2 相关 X 蛋白 (BAX) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度
23、（ OD 值），通过 标准曲线计算样品中大鼠 Bcl-2 相关 X 蛋白 (BAX)浓度。 试剂盒组成 1 30 倍浓缩洗涤液 20ml 1 瓶 7 终止液 6ml 1 瓶 2 酶标试剂 6ml 1 瓶 8 标准品（ 64 g/L） 0.5ml 1 瓶 3 酶标包被板 12 孔 8 条 9 标准品稀释液 1.5ml 1 瓶 4 样品稀释液 6ml 1 瓶 10 说明书 1 份 5 显色剂 A 液 6ml 1 瓶 11 封板膜 2 张 6 显色剂 B 液 6ml 1/瓶 12 密封袋 1 个 标本要求 1标本采集后尽早进行提取，提取按相关 文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验，可
24、将标本放于 -20保存，但应避免反复冻融 2不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（ HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 32 g/L 5 号标准品 150 l 的原倍标准品加入 150 l 标准品稀释液 16 g/L 4 号标准品 150 l 的 5 号标准品加入 150 l 标准品稀释液 8 g/L 3 号标准品 150 l 的 4 号标准品加入 150 l 标准品稀释液 4 g/L 2 号标准品 150 l 的 3 号标准品加入 150 l 标准品稀释液 2 g/L 1 号标准品 15
25、0 l 的 2 号标准品加入 150 l 标准品稀释液 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50 l，待测样品孔中先加样品稀释液40 l，然后再加待测样品 10 l（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置 37温育 30 分钟。 4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂
26、50 l，空白孔除外。 7. 温育：操作同 3。 8. 洗涤：操作同 5。 9. 显色：每孔先加入显色剂 A50 l，再加入显色剂 B50 l，轻轻震荡混匀， 37避光显色 10 分钟 . 10. 终止：每孔加终止液 50 l，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零， 450nm 波长依序测量各孔的吸光度（ OD 值 ）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。 操作程序总结： 计算 以标准物的浓度为横坐标， OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，
27、将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 注意事项 1试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加 温助溶，洗涤时不影响结果。 3各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（ n 倍）后再测定，计 算时请最后乘以总稀释倍数（ n 5）。 5 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6底物请避光保存。 7严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准 . 8所有样 品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1试剂盒保存：； 2-8。 2有效期： 6 个月
