1、外源硒对盐胁迫下玉米的影响1 引 言土壤盐碱化对土壤肥力和植物生长具有不利的影响。据统计，世界上盐碱化土壤约占可耕地面积的 10%，中国就有 3 亿多亩盐荒地和 1 亿多亩盐碱化土壤，约占可耕地面积的 25%1。由于土壤盐化造成土壤板结和土壤肥力下降，因此不利于农作物吸收养分，阻碍作物的生长。为了更好的利用盐碱地资源既提高盐胁迫下作物的产量，近几年来，添加外源物质浸种减轻盐害已成为作物抗盐研究中的重要举措。玉米在我国粮食安全中起着极其重要的作用，是重要的饲料作物，又是食品、化工、燃料、医药等行业的重要原料。因此其重要性备受瞩目。我国是玉米生产第二大国，常年播种面积 2500 万 hm2 左右，
2、约占世界总面积的 17.2% ，玉米种植面积和总产量仅次于美国 2。玉米也是我国的三大作物之一，其在三大作物中总产量最高，种植面积最大，单产仅次于水稻的最重要作物。但是，玉米的耐盐能力较低，其极限盐度为 1.7 dsm-1（l dsm-1 = 10 mM NaCl）每超过极限盐度 l dsm-1，产量降低 12%3。玉米高产稳产关系到国家粮食安全，因此，在我国土壤盐渍化快速形成的紧迫形势下，探索提高玉米耐盐性的技术措施及机理，对于更好地治理和利用盐渍化土地，保障玉米产量具有重要的现实意义。关于硒对植物生长发育、抗逆境胁迫等的生理作用，国内外不少学者近年来已在多种作物上进行过研究 4。硒是环境中
3、一种重要的生命元素，为动植物必需的营养元素，是动植物和人体谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的组成成分 5。适当浓度的硒不仅可以促进植物生长发育、提高作物产量及清除活性氧、具有抗辐射作用，而且可有效改善作物品质增强植物抗逆性及抵抗盐分胁迫。据彭克勤 6等研究指出，适量施硒可促进早稻分蘖初期的早生快发，并提高叶片的光合速率和叶绿素含量。付爱飞 7等研究指出，施硒可以显著降低和缓解盐胁迫对对番茄植株的伤害。罗盛国 8等研究指出，实习可以显著提高大豆中谷胱甘肽过氧化物酶的活性，并能提高大豆产量。近年来，许多报道关于硒浸种可以促进水稻、白菜和番茄种子萌发 9-11。但硒浸种对盐胁迫下的玉米萌发及幼苗生
4、长的影响未见系统的报道（研究甚少）。为此，本研究选用的玉米品种为农大 108，探讨外源施加不同浓度的亚硒酸钠（Na 2SeO3）浸种对盐胁迫下玉米萌发和采用水培法硒对盐胁迫下玉米幼苗生长特性、光合作用以及离子从介质到植株体的转运等的影响，以期阐明硒缓解玉米盐胁迫的作用机理，为提高玉米耐盐性提供技术参考。外源硒对盐胁迫下玉米的影响2 材料和方法2.1 试验设计2.1.1 浸种选取饱满一致的供试玉米种子，用 10%的次氯酸钠消毒玉米 10 min，然后用自来水冲洗 3 次，蒸馏水洗 2 次，用吸水纸吸干种子表面附着水分，分别置于垫有一层 12 cm 滤纸的 14 cm 的玻璃培养皿中，每皿 150
5、 粒玉米种子分别添加如下溶液：（1）（空白对照）1/2 Hoagland；（2）（胁迫对照）1/2 Hoagland+100 mmolL -1 NaCl；（3）1/2 Hoagland+100 mmolL -1 NaCl+Se1；（4）1/2 Hoagland+100 mmolL -1 NaCl+Se2；（5）1/2 Hoagland+100 mmolL -1 NaCl+Se3；（6）1/2 Hoagland+100 mmolL -1 NaCl+Se4；（7）1/2 Hoagland+100 mmolL -1 NaCl+Se5；每皿加入 20 mL 溶液，然后浸种 24 h 在 25 黑暗条件
6、下。2.1.2 发芽试验浸种后，挑选露白一致的玉米种子，置于垫有一层 12 cm 滤纸的 14 cm 的玻璃培养皿中，每皿 40 粒玉米种子，并加入 100 mmolL-1 NaCl 溶液上述浸种中共 7 个处理，每个处理 3 次重复。统计发芽势和发芽率，于第 3d 计算发芽势。2.1.3 幼苗生长试验将孔育苗盒及基质珍珠岩清洗干净，并将珍珠岩装到育苗盒中至平整。做好标记与发芽试验浓度相对应，每个浓度 3 个重复。在玉米发芽第 4 d，从培养皿中选取发芽较好且长势一致的玉米种入到相应的育苗盒中加水至育苗盒的 3/4 出，放入到光照培养箱中，玉米幼苗在育苗盒中生长第 2 d 时加入 100 mm
7、olL-1 NaCl 的 1/2 Hoagland 盐溶液，要从育苗盒上部淋入（保证每部分都有盐溶液）。每隔一天将育苗盒冲洗一次并加入新鲜的处理液。玉米幼苗在育苗盒长至 20 d 时测株高和叶长，叶绿素含量，鲜重，净光合速率。外源硒对盐胁迫下玉米的影响2.2 萌发及幼苗各指标测定2.2.1 萌发指标测定每天定时统计萌发玉米种子数，第 3 d 计算发芽势，第 7 d 统计发芽率。用以下公式统计不同处理的种子发芽势和发芽率。发芽势（Gv）=3 d 内发芽的种子数 /供试的所有种子数*100%发芽率（Gr）=7 d 内正常情况下发芽的种子数/ 供试的所有种子数*100%2.2.2 幼苗生长指标测定（
8、1）株高和叶长：幼苗长至 20 d 时在上午 8:00-9:00 用直尺测量一次株高和叶长，每个处理测 4 组数据。（2）叶绿素含量（3）净光和速率（4）鲜重：小心从育苗盒中取出完整植株，用自来水冲洗掉珍珠岩和灰尘，在用去离子水冲洗幼苗 3 次，并用吸水纸吸干植株表面附着水分称重即为鲜重。2.3 数据处理与分析采用 Excel 2003 进行数据处理和图表绘制，并采用 SPSS19.0 软件进行方差分析（one-way ANOVA)，以 Duncan 新复极差法对不同处理结果进行显著性检验。3 结果和分析3.1 盐胁迫下外源硒对玉米种子发芽势和发芽率的影响玉米种子在盐胁迫下能否正常发芽是决定其
9、能否在盐碱化土壤中生长的前提。100 mmolL-1 NaCl 单独处理时，玉米种子的发芽势、发芽率均明显低于对照（CK) ，和（CK）相比，玉米的发芽势、发芽率分别降低了 85.71%、48.13%。在 NaCl 胁迫下，添加外源硒浸种可提高玉米的发芽势和发芽率，且不同处理间存在差异。其中以 1.0、10.0 mgL-1 Se 处理效果最好，和 NaCl 单独处理相比， 1.0 mgL-1 Se 处理下玉米的发芽势、发芽率分别提高了 81.82%、30.40%；10.0 mgL -1 Se 处理下玉米的发芽势、发芽率分别提高了 81.82%、31.33%外源硒对盐胁迫下玉米的影响3.2 盐胁
10、迫下外源硒对玉米幼苗生长的影响100 mmolL-1 NaCl 胁迫下，玉米种子的株高显著降低，叶长显著减小。和 CK 相比，玉米的株高降低了 31.53%，叶长减小了 33.80%。在 NaCl 胁迫下，添加外源硒可增加株高和叶长，且不同浓度间存在差异。其中，以 1.0 mgL-1 Se 处理效果最好，和 NaCl 单独处理相比，1.0 mgL -1 Se 处理下玉米的株高、叶长分别增加了 25.64%、29.31%100 mmolL-1 NaCl 胁迫下，玉米幼苗叶绿素含量显著降低。和 CK 相比，玉米幼苗的叶绿素含量显著降低了 21.12%。在 NaCl 胁迫下，添加外源硒可增加玉米幼苗
11、的叶绿素含量，且不同浓度间存在差异。其中，以 1.0、5.0 mgL -1 Se 处理效果最好，和 NaCl 单独处理相比，1.0 mgL -1 Se 处理下玉米幼苗的叶绿素含量增加了 21.91%；5.0 mgL -1 Se 处理下玉米幼苗的叶绿素含量增加了 21.51%100 mmolL-1 NaCl 胁迫下，玉米幼苗的净光合速率显著降低。和 CK 相比，玉米幼苗的净光合速率降低了 40.12%。在 NaCl 胁迫下，添加外源硒可提高玉米幼苗的净光合速率，且不同浓度间存在差异。其中以 1.0、5.0 mg L-1 Se 处理效果最好，和 NaCl 单独处理相比，1.0 mgL -1 Se
12、处理下玉米幼苗的净光合速率增加了 49.85%；1.0 mgL -1 Se 处理下玉米幼苗的净光合速率增加了 42.45%100 mmolL-1 NaCl 盐胁迫显著降低了玉米幼苗地下部分、地上部分及整株幼苗的鲜重，和 CK 相比，玉米幼苗玉米幼苗地下部分、地上部分及整株幼苗的鲜重分别降低17.12%、38.85%和 32.35%。在 NaCl 胁迫下，添加外源硒可提高玉米幼苗地下部分、地上部分及整株幼苗的鲜重，且不同浓度间存在差异。其中以 1.0 mgL-1 Se 处理效果最好，和 NaCl 单独处理相比，1.0 mgL -1 Se 处理下，玉米幼苗的地下部分、地上部分及整株幼苗的鲜重分别增
13、加了 13.04%、54.72%和 39.44%4 讨论种子萌发期是植物个体发育的重要阶段，直接影响植物的生长发育和产量。宗会等 12 指出，植物在萌发及幼苗期耐盐性最差，其它发育阶段对盐胁迫相对不敏感。土壤盐渍化现象日益严重, 玉米种子经常受到盐胁迫逆境而影响其正常萌发及后期的生长发育 13。盐胁迫对植物的伤害主要体现在种子萌发及幼苗生长时受到抑制，最终导致生物量积累的下降 14。本研究结果显示，100 mmolL -1 NaCl 单独处理时，玉米种子的发芽势、发芽外源硒对盐胁迫下玉米的影响率较 CK1 分别降低了 85.71%、48.13%，株高、叶长分别降低了了 31.53%、33.80
14、%，叶绿素含量降低了 21.12%，净光合速率降低了 40.12%，玉米幼苗地上部分、地下部分及整株幼苗分别降低了 7.12%、38.85%和 32.35%。说明 100 mmolL-1 NaCl 显著抑制了玉米种子的萌发及玉米幼苗的生长。种子是植物为躲避恶劣环境以进行种群延续的一种重要机制 15，种子萌发是植物生活史中的关键过渡阶段（从种子到幼苗） 16-17。种子发芽率、发芽势均可以反映出种子萌发的优劣。通常情况下，种子的发芽率与其生活力是一致的，因此在生产和实验中一般将种子的发芽率作为鉴定种子发芽能力的一个重要指标；该研究表明，在盐胁迫的情况下，玉米种子的发芽势、发芽率明显下降，添加外源
15、硒对盐胁迫有一定的缓解作用，本次实验结果与之前众多学者的研究结论相一致 9-11。本次研究可知，100 mmol L-1 NaCl抑制了玉米的发芽势和发芽率；添加不同浓度的外源硒有效缓解了盐胁迫下玉米的发芽势和发芽率。株高、叶长和鲜重等变化是反映玉米幼苗生长的重要指标，本实验结果表明盐胁迫显著抑制了玉米的株高、叶长和鲜重。盐胁迫作用下，具有高生物活性的微量元素 Se 使得玉米幼苗体内一系列生理生化指标的变化，增强了植株对盐胁迫的抗性，表现在玉米幼苗株高和叶长的增加以及地上部、地下部总生物量的增加。杨晓慧 18等研究表明，在生菜生长的不同生育期，硒对盐胁迫下植株鲜重和茎粗的缓解效果在前期和中期较
16、好，说明盐胁迫下施硒对生菜前期和后期植株鲜重和茎粗的影响较大。本实验表明，盐胁迫下施加外源硒显著增加了玉米的株高、叶长和地上、地下的生物量，这与前人的相应研究的结果一致。在光合作用的反应过程中，叶绿素是主要色素，在一定的条件下适宜含量的叶绿素与光合作用密切相关。而且植物中叶绿素含量的多少可以影响叶绿体的光能利用率。光合作用的强弱在一定程度上取决于植物体中叶绿素含量的高低，同时与植物生长和生理状况密切相关。而盐分对植物色素及其蛋白复合体的合成和代谢的抑制作用是造成植物缺绿和叶片发黄的原因。由此得知，衡量盐胁迫程度高低的重要指标之一是叶绿素含量19-20。此次研究表明，盐胁迫明显影响了玉米幼苗中叶
17、绿素的含量，而施加外源硒浸种不但可以抑制叶绿素含量的减少，而且可以维持叶片含有较高的叶绿素含量，从而对维持盐胁迫下玉米较高的光合效率有一定促进作用。在盐胁迫情况下，玉米幼苗的的净光合速率比较低，光合速率的降低原因可能由以下几方面来显示：（1）细胞膜脱水降低对 CO2 的渗透性；（ 2）盐分含量变化引起玉米外源硒对盐胁迫下玉米的影响叶片黄化及玉米衰老叶片的增多；（3）气孔主动关闭所造成的 CO2 供应量降低；（4）盐的毒害。添加外源硒之后，玉米幼苗光合速率的降低在一定程度上得到有效缓解，并维持在一定的较高水平。研究盐分含量多少影响光合作用的机制可以帮助我们寻找植物生长条件下最适的盐含量，以期提高
18、其产量。目前当盐胁迫时，光合作用速率降低，导致抑制玉米生长和影响其产量降低的作用机理研究不够深入，我们应该加强这些方面的研究，以便能够更好地指导玉米大田生产，从而提高其产量和品质，更好的服务于社会。前人研究表明低浓度盐胁迫对植物种子萌发和幼苗生长有促进作用，高浓度则有抑制作用 21。但本实验添加外源硒的浓度并没有表现出高浓度对玉米萌发和玉米幼苗生长的抑制作用，主要原因可能是：外源硒的添加是在浸种时期，最高 Se 浓度为 50 mgL-1，后期萌发、幼苗生长试验时的淋洗及水培法培养玉米幼苗生长，都在不同程度的稀释硒的浓度。5 结论在盐胁迫下，玉米萌发和幼苗生长受到抑制，而施加外源硒浸种使玉米的耐
19、盐性有所增加。在添加不同浓度的外源硒后，与胁迫对照相比，玉米的发芽势、发芽率均显著增加；玉米幼苗株高和叶长均有所增加，幼苗的地上、地下和整株鲜重增加，幼苗的叶绿素含量增加，幼苗的净光合速率的抑制得到明显的缓解，因此施加外源硒对盐胁迫下玉米萌发和幼苗的生长具有显著缓解效应。在该实验浓度范围内，外源硒的最佳施加浓度为 1.0 mgL-1 Se，结果进一步证实了硒在缓解作物盐胁迫上的积极作用。（1）100 mmolL -1 NaCl 胁迫抑制了玉米种子的萌发和幼苗的生长。降低了幼苗地上、地下生物量。（2）通过不同浓度的外源硒浸种，可有效缓解 NaCl 胁迫对玉米种子萌发、玉米幼苗的生长及干物质的积累
20、，主要表现在玉米发芽势、发芽率、鲜重、叶绿素含量和将光合速率的显著增加。（3）综合萌发试验、幼苗生长实验，1.0 mgL -1 Se 处理对 100 mmolL-1 NaCl 盐胁迫下玉米萌发和幼苗生长的缓解作用效果最好。参考文献1 Epstein E. Nugent J, O Gonner M (eds). Better Corps for FoodM. Pitman.London, 1993: 61.外源硒对盐胁迫下玉米的影响2 杜锦, 张烈, 韩芸, 等. 玉米耐盐性研究现状与趋势J. 杂粮作物, 2009, 29(6): 379-382.3 赵可夫. 植物抗盐生理M. 北京: 中国科学
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