1、合格的标本是检验准确的保证,检验结果的分析前质控（影响占51-69%）检检验结果的分析中质控（23-35%）验结果的分析后质控（24-40%）,检验结果分析前的影响因素,医生的医嘱护士对患者的口述和嘱咐患者的配合和依从度标本的运送及保存（护士和护工的责任心，收集标本人员的素质，运送的条件和设施）检验人员的标本核对及分离处理处理,临床标本的类型,血液标本(不得在输液一侧的胳膊上采血）体液标本微生物标本医院感染微生物检测标本,血液标本一,血常规（末梢血细胞形态）1. EDTA-K2抗凝剂2. 1-1.5ml,立即混匀血沉1. 枸橼酸钠抗凝剂（1:4）2.准确采集到2ml，立即混匀，3.细长管采血要
2、求很严，误差上下不得超过1-2mm,（为海拔1500米管，适合海拔100-1500米高原）4.空腹,血液标本二,血凝标本 枸橼酸钠抗凝剂（1:9）准确采集到3ml刻度,立即混匀，不得有凝块血球压积0.20或0.50者采集标本时需要用校正公式：采血量=抗凝剂量/(0.00185*（1-HCT）*100), 例如，用3ml抗凝管，抗凝剂量为0.3ml,当患者的血球压积HCT为0.18时，原来的采血量2.7ml，则变为2.0ml.当患者的血球压积HCT为0.52时，原来的采血量2.7ml，则变为3.4ml。,血液标本三,生化标本,(大生化用一管血即可，经常有人采好几管血，浪费人力物力，增加患者痛苦，
3、沟通不到位。）促凝管采集3-5ml,急诊标本用干化学做，条码和价格不同 血脂标本要求空腹12小时，且保证三天内的清淡饮食,血液标本四,血气标本肝素抗凝剂1-1.5ml，严格要求采集动脉血,立即混匀。不得有凝块。化验申请单上需要注明患者当时的体温,血色素，吸氧状况,血液标本五,心脏标志物（绿色帽盖）肝素锂抗凝剂，cTnI，BNP，D-Dimer采集1.5-3 ml，立即混匀，不得有凝块。立即送检，二小时内出结果价格较贵（如BNP280元），标本要求及时性最强，抢救意义最大（心衰和心梗的鉴别诊断）。,血液标本六、血源感染的两种检测,一、血液细菌培养1.严格无菌技术操作。2.成人8-10 ml,立即
4、送检，切记将瓶盖盖好。 3.儿童2-5 ml,立即送检，切记将瓶盖盖好。 4.使用抗生素前采集。5.发热初期，寒战时最佳。二、细菌内毒素1.专用的无热源试管，专用的体液处理剂1号。2.抽取1ml1号处理剂到无热源管中，再抽取1ml患者的血液，立即混匀，送检微生物实验室。,血液标本七,肿瘤标志物，性激素，传染病四项1.用生化管，采集3-5ml，立即混匀。 2.性激素的采集最佳时间上午十时。分子生物学检测PCR，血清蛋白电泳，TKM11.用生化管，采集3-5ml,立即混匀。2.必须单独采集，以避免污染标本,血液标本八,美国进口BD肝素锂专用抗凝管（绿帽，轻，塑料制）结核感染T细胞干扰素，TB-IG
5、RA,760元/人份每周二上午采集，5ml，立即混匀，不得有凝块每周三下午出报告对活动性结核的诊断意义很大,血液标本九-外送化验标本,我院外送化验项目34个（节假日不收）同型半胱氨酸-小个绿帽肝素抗凝，4ml,（短管）促肾上腺皮质激素 ，HLA-B27(人类白细胞分化抗原B27) -血常规(紫色）管,2ml；尿17-羟皮质醇，尿17-酮皮质醇，尿游离皮质醇，尿香草苦杏仁酸，24h尿沉渣，要总量其他-血液生化管,外送检验项目明细,降钙素（CT) VB12 叶酸 皮质醇(COR) 醛固酮 骨钙素(OST) 促甲状腺受体抗体（TRAB)生长激素(GH) 总IgE巨细胞病毒 EB病毒25-羟基维生素D
6、(25-OH-VD)遗传代谢病检测-干血滤纸片,血液标本十,血液流变学标本的采集绿帽管-肝素锂抗凝管 5ml，同时必须采集血沉管2ml,（黑帽管细长型（1500米海拔管）,微量元素测定,用毛细采血管采集末梢血60ul。 每周四做，周五出报告 七种微量元素：钙，铜，锌，镁，铁，铬，铅（后俩种为重金属）。,体液标本的采集注意事项,体液种类繁多，包括尿液，胸腹水，脑脊液，精液，前列腺液，穿刺液等，化验的项目也很多。标本的采集和运送对于结果的准确性影响很大。,体液标本一,尿液标本1.尿常规，采集10ml清洁尿，不得混入精液或阴道分泌物，粪便等尿细菌培养，1.用无菌尿杯采集，清晨中段尿，未使用抗生素前2
7、.尿查抗酸杆菌，收集12小时尿液于清洁容器中，将沉淀采集到无菌尿杯中送检尿查24小时蛋白定量，采集24小时尿液于清洁容器中，准确量取尿液总量，二日将采集的尿液混匀，取5-10送检，并在申请单上标明尿液总量。夏季需要用防腐剂（二甲苯），从化验室领取。,体液标本二,脑脊液分四瓶（第一瓶送检细菌室做微生物检验，第二瓶送检临检做形态和计数，第三瓶送检生化室做ADA,葡萄糖和蛋白分析，第四瓶送检病理科查脱落细胞）立即送检，一小时内出结果，久置后，脑脊液中的溶菌酶会将细菌破坏，影响微生物检验结果。,其他体液标本,胸腹水标本1.无菌采集2.标本送检与脑脊液相同精液标本1.要求禁欲一周，按摩采集到玻璃容器中，
8、立即送检，2.要观察总量和液化时间前列腺标本1.按摩采集到无菌容器中，常规送二楼，2.细菌培养或涂片查菌送微生物室,粪便标本,采集新鲜粪便1-2克左右微生物标本要求采集有粘液或带血部分送检，未使用抗生素前最佳做便潜血化验时，前一天不要吃菠菜等含铁量高的绿色蔬菜。做便查轮状病毒时建议同时做细菌培养,检 验 与 临 床 沟 通 非 常 重 要,临床案例1.第四节：偷梁换柱 神经内科CSF2.第十四节：送检的ADA标本合格吗？(敞开放置一天后检测）3.第四十四节：摇一摇脑脊液标本，化脓性脑膜炎诊断不宜错！4.儿童不是成人的缩影5.奇怪的低血糖，其实患者血糖水平高着呢（35-210mg/dl)6.肠道
9、感染患者的血小板到哪里去了？（胃肠型系统性红斑狼疮）7.妊娠妇女为何尿妊娠试验阴性8.谁弄错了我的小便？,检 验 与 临 床 沟 通 非 常 重 要,临床案例1.第四节：偷梁换柱 神经内科CSF2.第十四节：送检的ADA标本合格吗？(敞开放置一天后检测）3.第四十四节：摇一摇脑脊液标本，化脓性脑膜炎诊断不宜错！4.儿童不是成人的缩影5.奇怪的低血糖，其实患者血糖水平高着呢（35-210mg/dl)6.肠道感染患者的血小板到哪里去了？（胃肠型系统性红斑狼疮）7.妊娠妇女为何尿妊娠试验阴性8.谁弄错了我的小便？,微生物标本的采集注意事项,正确的微生物学检验始自正确的标本采取。微生物学检验的标准化首
10、先应从标本采取与处理的规范化开始。正确的采取、处理与运送细菌培养标本是临床细菌检验成功的关键。,血液细菌培养,1.采血时机: 应在用抗菌素治疗前，最好在有寒战发生（患者发冷发热前半小时）采血为宜。错误观点：发热高峰采集。生长曲线说明,0,30,60,时间 (min),体温,血培养,细菌浓度,血中细菌浓度与患者体温曲线图,2.采血次数与间隔,(1)急性感染患者: 从两臂分别采2份血样。(2)感染性心内膜炎患者: 24h内采血3次, 每次间隔不少于30分钟。(3)发热原因不明患者: 2448h后可再采血2次,间隔不少于60分钟。,采血部位和采血量,多次采血时, 应在不同部位进行。 不要从血管插管内
11、采血成年人采血量为10ml, 新生儿与婴幼儿为12ml。,抗凝剂,0.0250.05%聚茴香脑磺酸钠(sodium polyanethol sulfonate, SPS) 。SPS具有抗凝抗吞噬抗补体及拮抗某些抗某些抗生素的作用。,二. 胸腹水及脑脊液标本,1.采集: 以无菌手续穿刺抽取。2.运送: 用带盖的无菌容器送检。（直接注入血培养瓶）3.脓性标本应考虑同时做厌氧培养.,三. 尿液标本,1.标本采集: 应在用药前或停药3-5天后留取标本, 并使尿液在膀胱内停留68h以上,起床后第一次尿阳性率较高.,尿液标本采集法,(1)清洁排尿法: 冲洗尿道口后用无菌容器留取中段 尿送检。(专人负责,不
12、能让病人自己留取)(2)膀胱穿刺法: 此法是收集尿液的最好方法, 尤其对 厌氧菌检查。(3)肾盂尿采集法: 应请泌尿科医生采取, 左右侧的标本 要标记明确。(4)留置导管取尿法: 应穿刺导尿管壁抽取尿液。,四. 痰标本,标本留取质量的好坏直接影响到对下呼吸道病原学的诊断, 导致抗菌治疗失败,以及造成耐药菌的出现不合格的标本是“垃圾标本”!,1.标本采集,应在用药前或停药1天后留取标本。对较粘稠的标本, 可加入等量10g/L的胰蛋白酶,或其他液化剂，将痰块消化后再接种。,痰标本的获取方法,(1)自然咳痰:要求患者留痰前用清水漱口3次, 用力咳出。首先用灭菌生理盐水将痰液洗3次，然后将痰块打碎，制
13、成悬液后再接种(2) 气管穿刺法: 适用于昏迷患者。(3) 纤维支气管镜抽取法: 适用于纤维支气管镜 检查或治疗的患者。(4) 胃液抽取法: 适用于婴幼儿患者。,2.痰标本的质量控制,痰标本留取后应先涂片, 进行革兰染色镜检合格后再接种。镜检分类: 13类为不合格标本, 不做培养。45类为合格标本。镜检不合格标本, 应通知临床重新留取标本。,痰标本显微镜检查的分类,_ 分类 细胞数/低倍视野 . 白细胞 扁平上皮细胞_ 5 25 25 1025 3 25 25 2 1025 25 1 25_,五. 生殖道标本,1.男性患者:(1)尿道标本: 清洗龟头后,用碘伏等消毒后,挤出 分泌物或以专用细拭
14、子插入尿道口12mm旋转，采取分泌物送检。(2)前列腺标本: 应由医师按摩前列腺,以无菌手 续自尿道口采取前列腺液送检。,标本采集,男性 尿道炎患者，先以无菌生理盐水清洗尿道口，采集尿道脓性分泌物。 前列腺炎患者则从直肠侧对前列腺进行按摩，待分泌物排出后采集,(2)女性,尿道炎患者，先以无菌生理盐水清洗尿道口，从阴道后壁由后向前压迫尿道，使分泌物排出，然后用无菌拭子或接种环采集；对于宫颈炎患者，先无菌生理盐水清洗宫颈口和阴道壁，再用阴道窥镜压迫子宫阴道部，使分泌物排出，然后用无菌拭子或接种环采集标本；合并肠炎的患者可在直肠镜下，用无菌绵拭子采集直肠窝粘膜的粘液进行送检。,2.女性患者: (1)
15、成年患者: 应在扩阴器的支持下,以无菌棉拭 子取分泌物送检。(2)未成年患者: 不应使用扩阴器, 应以无菌拭子 在阴道口处采取分泌物送检。,其他标本,眼分泌物、血液、关节液等以无菌操作方式采集。,六. 厌氧菌检查,厌氧菌是人体许多部位（如皮肤、口咽部、肠道和泌尿生殖道）正常菌群中的一部分，因此下列材料无需做厌氧培养：（1）咽、鼻、尿道或直肠拭子。（2）咳出的痰，通过支气管镜取的分泌物，排出或导出的尿、粪及胃内容物。,1.正确的选择标本,为排除或尽量减少正常菌群中厌氧菌的污染，用注射器抽取标本比用拭子更好，特别适用于下列临床情况：（1）从未开放的脓肿抽取脓液。（2）通过胸腔穿刺抽出的胸腔液。（3
16、）从耻骨联合上方做膀胱穿刺吸出或从肾造口管收集的尿。（4）气管切开吸取的肺分泌物。,（5）穿刺抽出的腹腔液。（6）通过腰椎穿刺抽出的脑脊液。（7）窦道标本可插入小导管用注射器吸出，注射器和针头内的气体应全部排出，将其内容物直接注入一个已排出气的无菌试管内。也可自窦道损伤部位取材做活组织检查。如果必须使用拭子，应尽快接种于适宜的培养基中。,2. 正确地运送厌氧菌标本：,临床标本一旦离开人体部位，在进入厌氧环境前，必须防止大气中氧的毒性作用。应及时将取材的拭子、塑料导管内的少量液体、吸入注射器的标本装入厌氧生物袋或管，在运送过程中要保持厌氧状态。培养基内不应含有肝素，因它会抑制细菌生长。,七. 脑
17、膜炎奈瑟菌的检查,根据病期不同，采集的标本也有所不同。菌血症期病人可采取血液；出现出血点或瘀斑者，可挑取瘀斑渗出液；如出现脑脊髓膜刺激症状者，必要时可抽取脑脊液；上呼吸道感染期的疑似病人和带菌者，可取鼻咽腔分泌物进行检查。因该菌易自溶，故应立即送检，最好在床边接种,医院感染的微生物检测,院内感染的卫生学检测由细菌室负责 消毒：杀灭物体上的致病性微生物。灭菌：将物体上的所有微生物全部杀死。,医院消毒卫生标准,医院消毒卫生标准GB159521995国家技术监督1995/12/15批准1996/07/01实施,院内感染监测采样办法（空气）,采样人员：由各病区兼职护士采样，培养基由检验科细菌室 负责提
18、供采样时间：选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样采样高度：与地面垂直80-150cm布点方法：室内面积30m2，设一条对角线上取三点，即中心一点，两端各距墙1m处各取一点。室内面积30m2，设东、西、南、北、中五点，四侧距墙各一米。采样方法：用7cm2直径普通营养琼脂平板在采样点暴露15min后送检培养(注意平皿盖打开后向下放在干净的台面上)。,物体表面采样及检查方法,采样时间:选择消毒处理后4小时内进行采样。采样面积100cm2,取全部表面；被采表面100cm2,取100cm2。采样方法：用55cm2的标准灭菌规格板,放置被检物体表面,用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支,在规格板内横竖
19、往返各涂抹5次,并随之转动棉拭子,连续采样1-4个规格板面积,将棉拭子放入装有5ml采样液的试管中送检.门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样(注：手抓住橡皮塞采样）,医务人员手采样及检查方法:,采样时间:接触病人,从事医疗活动前进行采样.采样量及方法:被检人五指并拢,将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次(一只手涂擦面积30cm2),随之转动采样棉拭子,将棉拭子放入装有5ml采样液的试管内送检(注,手抓住橡皮塞采样）。,使用中消毒液及无菌器械保存液采样方法,采样时间:采取更换前使用中消毒剂与无菌器械保存液.采样量及方法:在无菌条件下,用无菌吸管吸取0.5ml被检消毒液,加入4.5ml消毒液中和剂混匀,碘酒.过氧乙酸.含氯消毒液(84或金星)加入含有0.1%硫代硫酸钠中和液中,酒精70%和其它含有表面活性剂的消毒液加入含有吐温80的中和液中.,
