1、人白介素 6 操作 实验操作方法1.标 准品的稀 释 :本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。8 ng/L 5 号标准品 150l 的原倍标准品加入 150l标准品稀释液4 ng/L 4 号标准品 150l 的 5 号标准品加入 150l标准品稀释液2 ng/L 3 号标准品 150l 的 4 号标准品加入 150l标准品稀释液1 ng/L 2 号标准品 150l 的 3 号标准品加入 150l标准品稀释液0.5 ng/L 1 号标准品 150l 的 2 号标准品加入 150l标准品稀释液2.加 样:分 别设 空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2、、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50l,待测样品孔中先加 样品稀释液 40l,然后再加待测样品 10l(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标 板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置 37温育 30 分钟。 4.配液:将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20 倍稀释后备用5.洗 涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。6.加 酶:每孔加入酶标试剂 50l,空白孔除外。 7.温育:操作同 3。8.洗 涤:操作同 5。9.显 色:每孔先加入显色剂 A50l,再加入显色剂 B50l,轻轻震荡混匀,37避光显色 15 分钟.10.终止:每孔加终止液 50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度( OD 值)。 测定应在加终止液后15 分钟 以内进行。