1、 志贺氏菌快速测试片1、原理及适用范围适用于食品及原料中志贺氏菌的检测。执行标准：（GB/T4789.38-2008)2、使用方法 2.1、样品处理：取样品25mL（g）放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液（或生理盐水）的取样罐或均质杯内，制成 1:10的样品匀液，必要时用1mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液调节样品匀液pH至6.67.2。用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL，注入含有9mL稀释液的试管内，振摇后成为1:100的样品 匀液，以此类推，做出1:1000等稀释度的样品匀液，每次换一支吸管。2.2、接种：一般食品选23个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如饮用纯水
2、和矿泉水等）可直 接吸取原液进行检测。将测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层 膜缓慢盖下，静置10s左右使培养基凝固，每个稀释度接种两片。同时做一片空白阴性对照。2.3、培养：将测试片叠在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。一般食品培养温度为361，培养1524h 3、结果判读培养后，志贺氏菌 显白色-粉红色/清晰的菌落，沙门氏菌黄色菌落，产气肠杆菌显绿色4、 计数原则及报告方式4.1、选择菌落数在15CFU150CFU 之间的纸片进行计数。4.2、若两个稀释度的菌落数均在15CFU15
3、0CFU之间，则取其平均菌落数乘以稀释倍数，即为每毫升（或每克）样品中菌落数。4.3、如果所有稀释度的测试片上的菌落数都小于15CFU，则计数稀释度最低的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之；如果所有稀释度的测试片上均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之。4.4、如果所有稀释度的菌落数都大于150CFU，计数最高稀释度的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。计数菌落数大于150CFU的测试片时，也可计数一个 或两个具有代表性的方格内的菌落数，换算成单个方格内的菌落数后乘以20（滤纸区面积为20cm2），即为测试片上估算的菌落数。报告单位以 CFU/mL（或CFU/g）表示。5、表面
4、取样方法加1mL灭菌磷酸缓冲液（或生理盐水）在测试片上，至少静置10S，使培养基凝固；提起上层膜，使中央滤纸部分贴到待测物表面，用手在外侧轻压；然后将上盖膜合上，置培养箱内培养。6、附加说明 6.1、磷酸缓冲液稀释液的配制与灭菌：贮存液：称取34.0g的磷酸二氢钾溶于500mL蒸馏水中，用大约175mL的1mol/L氢氧化钠溶液调节 pH至7.2，用蒸馏水稀释至1000mL后贮存于冰箱。稀释液：取贮存液1.25mL，用蒸馏水稀释至1000mL，分装于适宜容器中，121高压灭 菌15分钟，或者放入消毒碗柜中消毒。 6.2、生理盐水的配制与灭菌：取8.5g分析纯氯化钠（NaCl）溶解到1000mL蒸馏水或纯净水中，先煮开后进行分装，取9mL加入到10mL洁净试管中，盖上硅橡胶塞或棉纱塞，放入红外线消毒柜中消毒。 7、保存条件本产品需存放在410冰箱中，保质期为一年，铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好，放到冰箱中，一个月内用完。在高湿度的环境中可能出现冷凝水，最好在拆封前将整包回温至室温。
