1、1宫颈阴道分泌液中、铜、钙、锌含量与胎膜早破关系的研究【摘要】 目的 研究胎膜早破（PROM）孕妇宫颈阴道分泌液中基质金属蛋白酶?9（MMP-9） 、微量元素（铜、钙、锌）的含量与 PROM 的关系。方法 选择临产前足月剖宫产分娩的胎膜早破者 50 例（PROM 组）和正常未破膜者 50 例（对照组） ，分别用双抗体夹心 ELISA 法和溶出电极法测定血浆、阴道分泌液中 MMP-9、铜、钙、锌的含量。结果 PROM 组血浆与阴道分泌液中 MMP-9 水平分别为 3187.742107.60 g/L、301.61182.42 g/L 均明显高于对照组（1163.021131.41 g/L，177
2、.11106.90 g/L） ，差异有显著性（P0.01） ；PROM 组阴道分泌液中铜、钙、锌的含量分别为 2.041.82 g/L、40.2418.21 g/L、0.320.22 g/L，均明显低于对照组（3.662.10 g/L、49.3012.78 g/L、0.690.41 g/L） ，差异有显著性（P0.01） 。结论 胎膜早破孕妇阴道分泌液中 MMP-9 含量明显升高，而铜、钙、锌含量明显降低，对胎膜早破的早期诊断有一定帮助。 【关键词】胎膜早破；基质金属蛋白酶；微量元素? 文章编号：1003-1383(2008)01-0005-03 中图分类号：R714.433 文献标识码：A
3、Study on the Relationship Between MMP-9 and 2Microelements?of Vaginal fluid in Premature Rupture of Membranes SU Dan, CHEN Xiuzhen? (Maternity and Childcare Hospitals of Beihai,Beihai Guangxi 536000,China)? 【Abstract】 Objective To study the content of matrix metalloproteinase?9(MMP-9) and its microe
4、lements（Cu、Ca、Zn） of vaginal fluid in premature rupture of membranes (PROM). Methods 50 pregnant women with PROM at term (PROM Group) and 50 normal pregnant women with intact membranes at term (Control Group) were enrolled. The level of MMP-9 and microelements in vaginal fluid and plasma were determ
5、ined by enzyme link immunosorbent assay (ELISA) and electrode respectively.Results The MMP-9 level ofplasma and vaginal fluid in PROM group was 3187.742107.60 g/L and 301.61182.42 g/L respectively, which was significantly higher than Control group (1163.021131.41 g/L, 177.11106.90 g/L,（P0.01).The mi
6、croelements（Cu、Ca、Zn）level of vaginal fluid in PROM group was 2.041.82 g/L, 40.2418.21 g/L,0.320.22 g/L respectively, which was significantly lower than Control group （3.662.10 g/L, 49.3012.78 g/L, 0.690.41 g/L,（P0.01）. 3Conclusion The content of MMP-9 in vaginal fluid ofPROM members increase obviou
7、sly, while the contents of microelements（Cu、Ca、Zn）decrease obviously ,which is helpful to theclinical diagnose ofPROMin early days. ?Key words】 Premature rupture of membranes；Matrix metalloproteinase；Microelements? 胎膜早破(PROM)是指临产前的胎膜破裂，其发生率国外 515，国内 2.7171 ，是威胁母儿健康的一种妊娠中、晚期并发症，目前其病因尚未完全明了，因此缺乏可靠的预防措
8、施。近年来研究表明外周静脉血清中 MMP-9 及铜、钙、锌等微量元素在胎膜早破的发生中起着重要作用。本研究通过检测 PROM 孕妇血浆和阴道分泌液中 MMP-9 水平及铜、钙、锌三种微量元素的含量，探讨 PROM 的原因和发病机制，为防治胎膜早破的发生寻找一条新的途径。 资料和方法 1.资料来源 随机选取 2005 年 3 月至 12 月在本院分娩的足月初产胎膜早破孕妇 50 例，孕周 38.41.7 周，平均年龄 27.72.6 岁。选取同期住院因社会因素行剖宫产的正常妊娠妇女 50 例为对照组，孕周39.11.3 周，平均年龄 27.52.8 岁。以上两组病例均为初产妇，单胎头位，无产兆，
9、无宫颈扩张，无内、外科合并症。同时两组的孕周、年4龄比较差异均无显著性意义（P0.05） 。? 2.胎膜早破诊断标准2 临床表现：孕妇自觉阴道有较多液体排出；阴道分泌液的二硝基苯基偶氮萘酚二磺酸钠试纸试验，检测pH7；取阴道穹隆液池内的液体置玻璃片，干燥后显微镜下观察有羊水结晶。上述试验均为阳性，其诊断胎膜早破的准确率为 93.1。? 3.标本采集 阴道分泌液的采集：所有孕妇外阴常规消毒，窥器扩张阴道，用 2 ml 无菌蒸馏水冲洗阴道，再用注射器抽取阴道穹隆液池 3 ml 冲洗液，常温下离心 10 min，置20C 待测。血浆标本的采集：所有孕妇均产前抽取静脉? 4.血浆、阴道分泌液中 MMP
10、-9 水平及铜、钙、锌含量的测定 MMP-9测定采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验（ELISA） ，试剂盒为深圳晶美公司提供的美国原装进口 ELISA 试剂盒。实验操作按试剂盒说明书进行。试剂盒灵敏度0.157 ng/ml，批内变异系数3%，批间变异系数7%。铜、钙、锌含量的测定采用溶出电极法测定微量元素含量，所用溶出电极仪由山东电讯器厂生产，型号为 MCP?3T，按操作规程对样本进行测定。? 5.统计学方法 计量资料用-?s? 硎荆?采用 SPSS11.0 软件包进行两组间均数?t? 煅椤? 结果 1.两组血浆、阴道分泌液 MMP-9 水平检测 结果显示 PROM 组血浆及5阴道分泌液中 MMP
11、-9 含量明显高于对照组（P0.01） 。见表 1。? 2.两组血浆、阴道分泌液铜、钙、锌含量检测 结果显示，PROM 组铜、钙、锌明显降低，与对照组比，有显著性差异（P0.01） 。见表 2。 讨论 1.MMP-9 的特性及临床应用 MMP-9 是结构中含有锌的蛋白水解酶，主要降解明胶、IV、V、VII、X 型胶原等，是降 解胎膜中 ECM（细胞外基质）的主要酶类，以无活性的酶原形式分泌。主要来源羊膜上皮细胞、滋养层细胞、平滑绒毛膜、蜕膜细胞及中性粒细胞等3 。一般情况下 MMP-9 在体内受到严格的控制，当 MMP-9/TIMP?1（金属蛋白酶组织抑制剂?1）失衡，MMP-9 的含量升高，
12、活性增加，促使胎膜细胞外基质的过程降解，胎膜结构紊乱，从而使胎膜抵抗力、张力下降，最终导致胎膜早破。 人的胎膜是由羊膜、绒毛膜和蜕膜组成，而胶原是其细胞外基质的主要成分。有研究显示4 ，胎膜破裂与胎膜组织中胶原被分解，使其弹性和物理强度下降有关。在妇女的体内，正常情况下就存在一定量的MMP-95 。在妊娠妇女的羊水中从孕中期至孕末期 MMP-9 一直处于相对稳定的较低水平。 本研究表明，在胎膜早破孕妇血浆及宫颈阴道分泌液中的 MMP-9 水平明显高于对照组，且差异有显著意义（P0.01） 。血浆中 MMP-9 水平6与国内外的报道相一致。宫颈阴道分泌液中 MMP-9 水平国内外未见报道。我们应
13、用宫颈阴道分泌液成分，避免母血中炎性细胞释放 MMP-9 对实验结果的影响6 ，且无创性，可多次重复应用。胎膜完整性的保持依赖宫腔内压与胎膜强度的平衡。由于细胞外基质各成分的比例决定着胎膜的伸展性和强度，因此从研究结果中可以得出 MMP-9 的增加促进了胶原的分解，使胎膜的脆性增加，从而增加了胎膜破裂的机会。宫颈阴道分泌液中 MMPs 可能来源于子宫下段和宫颈，其含量与宫颈扩张程度有关7 。当宫颈阴道分泌液中 MMP-9 以 240 g/L 为分界时，其预测胎膜早破的敏感度为 78，特异度为 90%，阳性预测值为 95%，阴性预测值为67%，假阴性率为 23%，假阳性率为 7%8 。MMP-9
14、 在宫颈阴道分泌液中预测胎膜早破有较高的特异度。? 2.微量元素在胎膜早破中的作用 胎膜中纤维母细胞层决定了羊膜的弹性、脆性。铜是人体必需的微量元素，以铜蓝蛋白的形式存在，同时赖氨酸酰氧化酶的金属转化酶，可催化弹性蛋白中的赖氨酸残基和胶原中的肽基?怖蛋彼岵谢?的形成9 。铜低时该酶的活性受到影响，从而胶原纤维及弹性蛋白合成障碍，绒毛羊膜变薄，弹性和韧性降低，易发生胎膜破裂。 胎儿在发育过程中不断地从母体中吸收所需锌，致使母体锌水平降低，而缺锌后能干扰母体多种含锌酶的代谢。本组资料表明，胎膜早破孕妇血浆及宫颈阴道分泌液中的锌水平明显低于对照组，两组之间具有显著性差异（P0.01） 。锌离子是孕期
15、胎儿发育不可缺少的另一微量元素,随着孕周的增加,需锌量也增加。已知体内有多种酶与锌有关,它参与7核酸,蛋白质代谢及纤维细胞增殖和胶原纤维合成。缺锌或含量不足导致了胶原纤维合成困难,使胎膜变脆,变薄而易发生胎膜早破。因此,缺锌也可能是胎膜早破的另一因素。? 总之，PROM 的发生与许多外源和内源性因素相关，确切原因未明，研究结果不尽相同，研究推测 MMP-9 在感染引起 PROM 中起着关键作用。胎膜结构及羊水中 MMPs 活性的异常升高、MMPs?TIMPs 失衡、微量元素含量改变等多种因素是诱发 PROM 的共同环节。 参考文献 1曾晓玲，周从容.MMPs/TIMPs 与胎膜早破关系的研究J
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