1、排石合剂质量标准研究本文编者: 代写论文 网址: http:/ 清热消炎、凉血止血等功效,用于治疗泌尿系统结石、尿路感染、血尿等疾病,疗效很好。 为了制定控制内在质量的标准,我们根据处方中药物的性质,对其中所含的黄酮类、皂苷类 成分及 金钱草、怀牛膝等药物分别做了鉴别试验,并进行了总黄酮的含量测定,从而为质量标准的 制定提供了依据。1 仪器与试药UV-210PC 型紫外分光光度计(日本岛津);紫外光灯(上海顾村电器厂);硅胶G板(青岛海洋 化工厂);聚酰胺薄膜(台州市路桥四青生化材料厂);芦丁、齐墩果酸对照品(中国药品生物 制品检定所);排石合剂及药材原料由我院制剂室提供。2 鉴别试验2.1
2、皂苷类成分2.1.1 取本品适量,置于具塞试管中,密塞,强力振摇,产生大量泡沫并且在20 min内 不明显减少。2.1.2 取本品10 mL于具塞试管中,加无水乙醚10 mL提取2 次,合并乙醚层,减压蒸干 ,加少许冰醋酸溶解,转移至试管中,沿管壁缓缓加入硫酸适量,可见冰醋酸层为红色,中 间有红褐色环,硫酸层有黄绿色荧光。2.2 黄酮类成分:取本品15 mL于具塞试管中,用甲醇约10 mL提取,离心,取上清液于分 液漏斗中,用适量乙酸乙酯萃取2 次,合并乙酸乙酯层,减压蒸干,用无水乙醇约5 mL溶解 ,取2 mL,加镁粉少许、盐酸数滴,可见有大量气泡产生,溶液渐变红色,微热,溶液呈透 明的红棕
3、色。2.3 金钱草的TLC1:取本品10 mL,用乙酸乙酯10 mL提取2 次,合并乙酸乙酯 层 ,减压浓缩至3 mL作为供试品溶液。取金钱草5 g,加100 mL水煎煮,煎煮液减压浓缩,加 乙酸乙酯适量提取2 次,合并乙酸乙酯层,减压浓缩至3 mL作为阳性对照品溶液,同时制备 不含金钱草的阴性对照液。吸取上述溶液各5 霯,分别点于聚酰胺薄膜上 ,以水-乙醇- 乙酰丙酮(421)展开后,喷以2% AlCl3乙醇液显色后,于110 烘5 min,于紫外光灯 下观察。2.4 怀牛膝的TLC2:取本品20 mL,用乙醚(25,20,20 mL)提取3 次,水层 再 用乙酸乙酯(15,10,10 mL
4、)提取3 次,水层再用水饱和的正丁醇(15,10 mL)提取2 次,合 并正丁醇层,减压蒸干,残渣加乙醇10 mL溶解,加盐酸1 mL,加热回流1 h,浓缩至约5 mL , 加水10 mL,用石油醚(60 90 )20 mL振摇提取,蒸干,残渣加乙醇1 mL溶解,作为供 试品溶液。另取齐墩果酸对照品加无水乙醇配成每毫升含1 mg的溶液作为对照品溶液。同时 制备怀牛膝的阳性对照液和不含怀牛膝的阴性对照液。分别吸取对照溶液、供试品 溶液适量点于同一硅胶G板上,以氯仿-甲醇(401)为展开剂展开后,喷以5%磷钼酸试液显 色后于105 烘5 min,除阴性对照液外其它试液均可见在同一位置上显蓝色斑点。
5、3 总黄酮的含量测定3.1 测定波长的选择:精密称取芦丁对照品5 mg于25 mL容量瓶中,用甲醇稀释到刻度(20 0 靏/mL)。精密吸取对照品溶液4 mL于25 mL容量瓶中,加水至6 mL,加5%的NaNO2溶液1 mL,摇匀,放置6 min;加10%的AlCl3溶液1 mL,摇匀,放置6 min;再加5%的NaOH溶液1 0 mL,最后用水稀释至刻度,摇匀,放置15 min后于波长350600 nm间扫描,可见在510 n m处有最大吸收。3.2 标准曲线的制备:精密吸取对照品溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0 mL于2 5 mL容量瓶中,各加水至6 mL,以下
6、按3.1项下自“加 5%的NaNO2溶液1 mL” 起处理 , 以第一份为空白,在510 nm处测定吸光度A。得回归曲线为C=0.081 55A+2.37810-3(r=0.999 6)。3.3 样品加样回收率试验:精密吸取已知含量的样品溶液适量于 10 mL容量瓶中,精密加 入对 照品溶液,用甲醇稀释到刻度,涡旋混匀,转移至离心管中离心,精吸上清液5 mL于25 mL 容量瓶中,加水至6 mL,以下按3.1项下自“加 5%的NaNO2溶液1 mL” 起处理,测定 其 吸光度,由回归方程求出总黄酮的含量,计算回收率,结果低、中、高三个浓度的加样回收 率分别为100.392.88,102.360
7、.99,101.170.36(n=3)。3.4 样品含量测定:精密吸取经一定稀释的本品适量置10 mL容量瓶中,用甲醇稀释到刻 度,涡旋混匀,转移至离心管中离心,精吸上清液4 mL于25 mL容量瓶中,加水至6 mL,以 下按3.1项下自“加5% 的NaNO2溶液1 mL” 起处理,测定其吸光度,由回归方程求出 总黄酮的含量(相当于含芦丁的量)。4 讨论4.1 排石合剂中成分复杂,干扰因素多。本实验做过排石合剂、金钱草水煎液及 除去金钱草外的其他几味中药水煎液经甲醇提取后,同上所述进行一系列的显色反应后的扫 描曲线,发现前两者的扫描曲线相似,而后者在相应位置上却没有吸收峰,所以用本法的含 量基本可以反映君药金钱草的质量。4.2 本实验参考中华人民共和国药典,采用比色法测定处方中总黄酮的含量,经显色稳定 性考察发现溶液的吸光度在1560 min内基本保持不变,因此建议测定应在该时间段内完成。医学论文 http:/ 4006-587-789 QQ: 4006587789