1、1,Working Safety with Bloodborne Pathogens in the Laboratory實驗室血液感染性病原之安全防護,林瑞燕中央研究院學術事務組biosafegate.sinica.edu.tw http:/www.sinica.edu.tw/biosafe,2,目的,降低實驗室工作感染血液感染性病原的危險To minimize the risk for an occupationally acquired infection at the Academic Sinica.,3,簡介,操作人類血液、細胞、組織會面臨特殊的危險。最明顯的例子為人體血液或體液可能帶
2、有B型肝炎病毒或AIDS病毒若您需要操作這些實驗材料，施打B型肝炎疫苗是非常重要的加入中研院的人體細胞組織實驗操作安全防護計畫為避免因意外而感染，請注意以下之內容及遵守安全操作程序,4,內容,職業感染血液感染性病原防護計畫緊急處理程序警示標誌安全防護操作,5,職業性血液感染性病原,Hepatitis BHepatitis CHIV其它應注意材料：Human Tumor Cells Primary Cell Lines,6,其它潛在感染物(OPIM),OPIM(Other Potentially Infectious Materials)：人體體液：精液、陰道分泌物、腦脊液、關節液、胸膜液、心包
3、膜液、腹水、唾液、任何污染到血液或體液的液體未固定處理的人體組織或器官HIV：包括細胞、組織培養、器官培養等含有HIV或HBV之培養液或其它溶液來自感染HIV或HBV之實驗動物的血液、器官或其它組織,7,實驗室內血液傳染性病原之傳播,皮膚傷害：被污染之尖銳物(針頭、刀片)所傷動物咬傷設備傷害濺灑：感染物傾倒感染物滴落離心超音波打碎、震盪混勻,8,可能污染血液感染性病原之設備：,冷凍切片機(Cryostats) 顯微注射器(Microinjectors) 動物籠(Animal Caging) 細胞離心機(Cyrocentrifuges)流速細胞分析儀(Flowcytometers)切片機(Mic
4、rotomes)組織均質器(Glass Tissue Homogenizers)細胞收集器(Cell Harvesters),9,相關規定(衛生署),藥品非臨床試驗優良操作規範(衛生署) 藥品非臨床試驗安全性規範(衛生署)人體細胞組織優良操作規範(衛生署研擬中)基因治療人體試驗申請與操作規範(衛生署)http:/www.sinica.edu.tw/biosafe/3-4.html,10,中研院安全防護計畫,11,中央研究院人體細胞組織實驗操作安全防護資料調查表（研擬中）,凡研究需利用具活性之人體組織(包含血液、器官、組織、細胞株或其他體液等)為實驗材料者，必須填寫此表格，由實驗室負責人同意後，
5、送中央研究院生物實驗安全委員會存檔備查http:/www.sinica.edu.tw/biosafe/5.html,12,HIV、Hepatitis B & C,傳播方式：血液或可能感染之體液病毒培養液、病毒感染之組織及濃縮之病毒,13,人類免疫缺乏病毒 (HIV),原發性感染症狀：感染後約2-6星期疲倦似感冒症狀體重減輕淋巴腺腫大隱形期：感染愛滋病毒後到出現臨床症狀的期間，一般是5-10年，無特殊病徵,14,台灣地區感染人類免疫缺乏病毒者依職業別統計表民國73年91年(衛生署疾病管制局資料),15,職業風險：HIV,感染愛滋病毒後，是否發病成為AIDS病毒量多寡 感染者的免疫力病毒種類有無接
6、受抗病毒藥物治療伺機性感染的預防與治療,16,HIV 感染,意外發生一小時內處理需盡速提出報告目前仍無疫苗保護醫療諮詢藥物治療：衛生署自1997年4月開始免費提供藥物，每位感染者及患者都可以在指定醫院取得這些藥物http:/203.65.72.83/ch/das/ShowPublication.ASP?RecNo=921,17,B & C型肝炎病毒感染症狀,初期症狀似感冒症狀食慾降低腹部不適噁心、嘔吐肌肉疼痛二期症狀黃疸,18,B型肝炎病毒(HBV)感染,長期影響：帶原者：15% - 20% 受感染者慢性肝炎肝硬化肝癌,19,型肝炎預防注射,1984年陸續針對孕婦HBsAg檢驗呈現陽性反應的新
7、生兒施打B型肝炎疫苗1986年開始推行全國性新生兒型肝炎預防注射目前國小一年級的帶原者比例已從未推行疫苗接種之前的10.5%降到1.7%,20,B型肝炎疫苗,使用血液/OPIM為實驗材料者應接受B型肝炎疫苗接種三劑B型肝炎疫苗接種：第一劑第二劑(第一劑一個月後)第三劑(第一劑六個月後),21,是否應接受B型肝炎疫苗接種,若從未檢查過B型肝炎病毒抗原及抗體，則需抽血檢查若為陽性，則曾感染B型肝炎病毒(HBV)若為陰性，則給予B型肝炎疫苗接種,22,疫苗接種之效果檢測,接種後，採血檢查疫苗接種效果約有10%沒有抗體反應。其原因可能為：40歲體重抽煙免疫缺陷,23,感染B型肝炎病毒(HBV),目前尚
8、無根治法 a-干擾素注射治療口服藥Lamivudine(3TC),24,C型肝炎病毒(HCV)感染,1988-1989確認C型肝炎病毒(HCV)主要造成慢性肝病許多病例為輸血感染,25,C型肝炎病毒(HCV)感染之治療,目前尚無疫苗目前尚無根治法以a-干擾素及口服Ribavirin合併治療,26,職業風險：HIV、HBV & HCV,一級風險：皮膚損傷二級風險：濺灑污染,27,皮膚損傷之感染風險,HBV6%-30%HCV3%-10%HIV0.32%-若較深之穿刺或較高效價之病毒則感染風險更高,28,血液感染性病原污染之緊急處置,步驟一：污染之皮膚及傷口需以優碘擦洗十五分鐘，而後以大量的水沖洗污
9、染之眼睛或黏膜需以生理鹽水沖洗十五分鐘步驟二：立刻通知實驗室負責人,29,步驟三：通報醫療中心：本院醫務室27899437必須在感染一小時內處理若需緊急運送到醫院，請打119若醫療中心已下班，且感染源包含HIV，請撥打119，立即送醫。,血液感染性病原污染之緊急處置,30,避免感染,人員及技術,安全防護裝備,實驗室硬體設計,31,生物安全防護等級(P/BL),P1 (BL1)：低風險P2 (BL2)：中等風險P3 (BL3)：高風險P4 (BL4)：極高風險,32,警示標誌,可向本院學術事務組索取(27899374, biosafegate.sinica.edu.tw ),33,張貼於操作血液
10、/OPIM之實驗區域張貼於儲存血液/OPIM之冰箱。標示於儲存或運送血液/OPIM之容器。標示於放置血液/OPIM廢棄物之容器。,警示標誌,可向本院學術事務組索取(27899374, biosafegate.sinica.edu.tw ),34,安全防護操作,生物安全操作櫃使用尖銳物品運送生物體個人防護裝備污染除污廢棄物處理,35,生物安全操作櫃(Biological Safety Cabinets; BSC),36,使用針頭針筒,除非必要，避免使用針筒、針頭及其他尖銳器具。當必須使用這些器具時，要小心操作以免意外刺傷或割傷不用雙手套回針筒蓋盡可能使用有安全設計之針頭針筒使用過的針頭及拋棄式切
11、割器具必須棄置於有蓋、防漏、防破之容器中。使用過的針頭不可重複使用、彎曲或折斷,37,38,39,安全注射器,Self-sheathed protected position,Retracted protected position,Attached to syringe needle,40,使用防漏之雙層容器使用之容器必須防漏，可滅菌處理，可鎖蓋容器上標示：內容物、實驗者姓名、實驗室名稱及日期標示：BIOHAZARD不可使用私人車輛運送不可使用大眾交通工具運送私自運送需自負責任,運送感染性病原,41,個人防護裝備,手套臉部保護：若可能發生濺灑意外時需戴上臉部保護裝備不宜穿著短褲、露趾鞋實驗衣
12、,42,個人防護裝備-手套,操作感染物時，必須戴手套若手套污染，脫去污染手套、洗手、換上新手套脫去手套後必須洗手若手上有傷口，戴上手套前先將傷口包紮好選擇合適大小、功能之手套,43,個人保護裝備-實驗衣,P2(BL2)級以上實驗室必須穿著實驗衣穿著時記得扣上鈕扣注意污染離開實驗室前脫下實驗衣,44,污染除污,每個人都必須負責對所使用的設備除污，維持無污染狀態,45,消毒、殺菌,當污染發生時，至少消毒殺菌15-30分鐘適用之消毒殺菌劑Chlorine Compounds such as Sodium Hypochlorite (家用漂白水)Wescodyne (iodine with deter
13、gent)Alcohol(70-85% Ethyl or Isopropyl),46,Sodium Hypochlorite Disinfection,家用漂白水每日配製以水十倍稀釋,47,少量血液污染之除污,使用適當之個人防護裝備以吸收材料覆蓋污染物自污染外圍向內側加上消毒劑反應15-30分鐘清除污染(血液必須完全擦乾淨)以新的消毒劑消毒污染區將污染廢棄物以生物感染性廢棄物處理,48,實驗室發生嚴重污染,緊急電話：119,49,生物感染性廢棄物之處理方式,放置於專用垃圾袋及容器內清除3/4滿時即該清除依各實驗室之標準程序進行垃圾清除包裝標示(BIOHAZARD)不可用力擠壓,50,減少感染性
14、廢棄物,垃圾分類化學消毒、殺菌滅菌依各所之標準程序進行垃圾清除,51,實驗室工作者之責任,參加訓練課程仔細考量是否應施打B型肝炎疫苗安全之實驗操作若有感染發生，立即通報,52,請牢記,自己必須負責自己在實驗室的安全。The Ultimate Responsibility for Your Safety in the Laboratory Lies With You!,53,參考資料,Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories, NIH, 1999Working Safety with HIV and Other Bloodborne Pathogens, NIH, 2002行政院衛生署http:/www.doh.gov.tw/ 衛生署疾病管制局http:/203.65.72.83/ch/,
