1、骨髓细胞学检测,温州医科大学检验医学院温州医科大学附属一医医学检验中心,林晓梅,上 课 内 容（P266-279）,骨髓细胞学检测的临床应用骨髓细胞学检测血细胞的生成、发育规律及形态特点血细胞化学染色细胞免疫分型细胞遗传学分析,一、骨髓细胞学检测的临床应用,临床作用 适应症 禁忌症,1、骨检的临床作用,疾病诊断 肯定性诊断 符合性诊断 怀疑性诊断 排除性诊断 形态学描述 稀释骨髓象 观察疗效 缓解 改善 退步 复发,2、骨检的适应证,不明原因外周血细胞计数或和分类异常不明原因的发烧、肝、脾、淋巴结肿大黄疸、骨痛、骨质破坏、蛋白尿、肾功能异常、血沉明显增加等,2、骨检的适应证,血液病的定期复查和
2、疗效观察了解骨髓造血功能其它检查 ： 骨髓活检 细胞免疫学分型 染色体核型检查 分析病原学检查 造血祖细胞培养,3、骨检的禁忌证,严重出血的疾病禁用 晚期妊娠的孕妇慎用,骨髓片的选择低倍镜检查油镜检查骨髓象的分析与报告,二、骨髓细胞学检测的方法和内容,1）涂片（肉眼观察）,1、骨髓片的选择,厚薄均匀头体尾分明两边留有空隙尾呈锯齿状头部要留有约2cm的空间,2）取材抽吸骨髓液时有特殊的疼痛感抽出的骨髓液中有黄色小粒（骨髓小粒）显微镜下有骨髓特有的细胞： 幼红、幼粒、巨核细胞、浆细胞等骨髓杆/分叶、有核细胞数大于外周血,1、骨髓片的选择,3）染色 细胞核、质颜色分明，颗粒清楚，没有染料沉渣,1、骨
3、髓片的选择,1）确定取材、涂片和染色是否满意2）估计骨髓有核细胞增生程度3）巨核细胞计数4）观察有无异常细胞,2、低倍镜下检查,骨髓有核细胞增生程度,增 生 极 度 活 跃,增 生 明 显 活 跃,增 生 活 跃,增 生 减 低,增 生 极 度 减 低,有核细胞分类计数：200 500个细胞，按细胞的不同系列和不同发育阶段分别计数，计算各阶段细胞所占百分比。观察细胞形态：分类计数同时观察细胞形态是否正常，有无异常细胞、寄生虫等。,3、油镜检查,1）病人的基本信息2）骨髓的取材、涂片、染色情况3）骨髓增生程度、粒红比值和骨髓各期细 胞结果4）骨髓象特征的描述5）血象特征6）细胞化学染色特征,4、
4、骨髓象的分析和报告,血细胞的生成 血细胞的发育规律 各系血细胞的形态特点,三、血细胞的生成、发育规律及形态特点,造血干细胞 祖细胞原始细胞 幼稚细胞 成熟细胞,1.血 细 胞 的 生 成,早幼C 中幼C 晚幼C,骨髓：是人体最大器官之一，主要生理是进行造血活动，骨髓细胞主要是发育过程中的血细胞。,血细胞生长发育图,胞体大小 大 小胞核 大小 大 小 核仁 有 无 染色质 细致 粗 核膜 不明显 明显 核形 圆形 椭圆形 肾形 杆状 分叶,2.血 细 胞 的 发 育 规 律,胞浆 量 少 多 嗜碱性 强 弱、消失 颗粒 无 有 (非特异性 特异性)核浆比例 大 小,2.血 细 胞 的 发 育 规
5、 律,粒 细 胞 系 列原粒 早幼粒 中幼粒 晚幼粒 杆状核粒 分叶核粒,原始细胞形态学共同特点,胞浆嗜碱性胞浆常无颗粒核染色质细致核仁有、清楚高核浆比,红细胞系列 粒细胞系列 淋巴细胞系列 浆细胞系列 单核细胞系列 巨核细胞系列,3.血细胞的正常形态学特征,正常细胞形态,正常细胞形态,红细胞系列,胞体、胞核圆形 胞浆有明显的变化规律 胞浆中无颗粒,粒细胞系列,胞体圆形颗粒和胞核有明显的变化规律,淋巴细胞系列,胞体、胞核小 胞浆量少,浆细胞系列,胞核圆形、偏位胞浆丰富、深兰色、 核旁淡染区、泡沫浆,单核细胞系列,胞体、胞核较大且不规则胞浆较丰富、灰兰色胞核染色质疏松,巨核细胞系列,胞体、胞核巨
6、大且不规则胞浆量、颗粒极丰富,是一种以细胞形态学为基础，结合运用化学反应的原理，对血细胞内的各种化学物质，作定性、定位、半定量分析的方法,四、血 细 胞 化 学 染 色,血细胞化学染色的定义,辅助疾病的诊断和细胞系列的判断不同细胞系列，其所含的化学物质各有不同血细胞在病理情况下，其化学物质成分及含 量会发生改变,血细胞化学染色的作用,四、血 细 胞 化 学 染 色,过氧化物酶染色（POX）中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）酯酶染色铁染色,四、血 细 胞 化 学 染 色,血细胞化学染色的方法,粒细胞及部分的单核细胞质内的颗粒含有过氧化酶，此染色用于急性白血病类型的鉴别诊断(急粒和急淋) 急粒强阳
7、性 急单阴性、弱阳性 急淋阴性,1.过氧化物酶（POX）染色,NAP主要存在于成熟阶段的中性粒细胞 报告形式为阳性率及积分增加：细菌性感染、类白血病反应、再障、 急淋、淋巴瘤减少：慢粒、阵发性睡眠性血红蛋白尿、 急粒、恶组,2.中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色,辅助鉴别急性白血病细胞类型（急粒和急单）氯化醋酸AS-D萘酚酯酶（AS-D NCE）:特异性酯酶（SE） 急粒呈阳性（M3强阳性）-醋酸萘酚酯酶（-NAE）：非特异性酯酶(NSE) 急单呈阳性或强阳性，加NaF抑制 急粒呈阴性或弱阳性，加NaF不抑制 急淋呈阴性,3. 酯 酶 染 色,M5,骨髓铁分为细胞外铁、内铁减少：缺铁性贫血增加：铁粒幼红细胞性贫血,4. 铁 染 色,骨髓外铁染色,骨髓内铁染色,急性白血病常见细胞化学染色,急淋 急粒 急单POX - + - + NAP SE - + - +NSE - - + + +NSE+NaF - - + +,总 结,掌握：血细胞的生成发育规律、常用血细胞化学染色在不同血液系统疾病中的鉴别诊断意义熟悉：骨髓穿刺的适应证和禁忌证、骨髓增生程度、骨髓象的分析与报告了解：骨髓细胞学检测的临床应用、血细胞的生成和形态学特征,Thank You for Your Attention,
