1、分枝杆菌属,（一）分枝杆菌属的主要特点及分类分枝杆菌属（Mycobacterium）是一类直或微弯曲、有分枝生长趋势的杆菌。本属细菌的主要特点是：细胞壁脂质含量高，主要是分枝菌酸；具有抗酸性，革兰染色不易着色；专性需氧，营养要求特殊，大多数生长缓慢，个别菌种尚不能人工培养；不产生内、外毒素及侵袭性酶类，所致疾病常呈慢性，并伴有肉芽肿。,分枝杆菌属(Mycobacterium),一类细长，略带弯曲，呈分枝状生长细菌抗酸染色阳性抗酸染色方法：涂片固定， 浓石炭酸复红染色，盐酸酒精脱色，美兰复染革兰染色阳性，无芽胞、无荚膜营养要求较高，常用罗琴培养基生长缓慢，28周后方可见菌落G+C mol%为62
2、%70%,第16章 分枝杆菌属,（一）分枝杆菌属的主要特点及分类分枝杆菌属在分类学上归属放线菌目、分枝杆菌科。可分为结核分枝杆菌复合群、非结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌三类。非结核分枝杆菌根据生长速度和产色素等又分为光产色菌、暗产色菌、不产色菌和迅速生长菌4群。,分枝杆菌属分类,典型结核分枝杆菌 (M.tuberculosis complex)：1.人型结核分枝杆菌 (M.tuberculosis)2.牛型结核分枝杆菌 (M.bovis)3.非洲分枝杆菌 (M.africanum) 4.田鼠分枝杆菌 (M.microti)非典型分枝杆菌：1.光产色菌I (M.kansaii M.maarinum)
3、堪萨斯分枝杆菌，海分枝杆菌2.暗产色菌II (M.scrofulaceum M.gordonae)瘰疬，戈登分枝杆菌3.不产色菌III (M.aviun/intracellulare complex)鸟胞内分枝杆菌4.速生菌IV (M.fortuitum M.smegmatis)龟分枝杆菌，齿垢分枝杆菌,其他1.副结核分枝杆菌2.麻风杆菌3.鼠麻风杆菌,（二）结核分枝杆菌结核分枝杆菌复合群包括结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌。前三种对人类有致病性，其中结核分枝杆菌感染最常见，占90%左右。.,（二）结核分枝杆菌1. 细菌特性（1）形态染色特点: 菌体细长略带弯曲，无鞭毛，无
4、芽胞， 某些菌株有荚膜。革兰染色不易着色， 抗酸染色阳性。,结核分枝杆菌抗酸染色,（二）结核分枝杆菌（2）培养特性:专性需氧，最适生长温度37，最适pH 6.56.8。营养要求高，常用罗-琴（Lowenstein-Jensen，L-J）固体培养基培养，生长缓慢，一般24周可见干燥、粗糙、呈颗粒状或菜花状、乳白色或淡黄色不透明菌落。在液体培养基中细菌生长较为迅速，形成表面菌膜，有毒力的菌株在液体培养基中呈束状生长。,结核分枝杆菌菌落特点（L-J培养基）,结核分枝杆菌菌落特点（L-J培养基）,（二）结核分枝杆菌（3）生化反应不活泼，不发酵糖类。 利用热触酶试验可区别结核分枝杆菌复合 群与非结核分枝
5、杆菌，前者阴性，后者大 多阳性；利用烟酸试验及硝酸盐还原试验 可区别结核分枝杆菌（均呈阳性）与牛分 枝杆菌（均为阴性）。,结核分枝杆菌(IV),生化反应:糖类发酵(-) 耐热触酶(-) Tween水解(-)耐热磷酸酶(-)，为结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌鉴定试验,（二）结核分枝杆菌（4）结核分枝杆菌的抵抗力可归纳为“三耐 四敏”。即：耐干燥、耐酸碱、耐孔雀绿（1:13 000），对湿热、70%乙醇、紫外线及 常用抗结核药敏感（但长期用药易产生耐药 性）。（5）结核分枝杆菌易发生毒力变异、耐药性 变异及L型变异。,（二）结核分枝杆菌2. 临床意义结核分枝杆菌是结核病的病原体，可侵犯全身各器官，但
6、以通过呼吸道引起肺结核为最多见。,结核分枝杆菌(VI),临床意义: 引起结核病，随社区人群生活状况不同发病率有所差异，全球约有1/3人感染，有人类死亡之首和白色瘟疫之称 本菌抵抗力强，可存活68月，随着漂浮于空气中的微滴核被吸入呼吸道，植入肺泡发育繁殖导致结核发生,继发性肺结核,脊柱结核,结核分枝杆菌(VII)细菌可经血、淋巴，在骨、关节、肾、脑膜等处引起相应的结核病,（二）结核分枝杆菌2. 临床意义（1）致病物质 结核分枝杆菌不产生内毒素和外毒素，也无侵袭性酶。其致病性可能与细菌在机体细胞内大量繁殖引起的炎症，菌体成分和代谢物质的毒性以及机体对菌体成分产生的免疫损伤有关。其毒性物质主要与荚膜
7、、脂质和蛋白质有关。脂质的成分及含量与结核分枝杆菌的毒力密切相关。,结核分枝杆菌的致病物质,细胞壁脂质和脂蛋白1.磷脂：单核细胞增生，结核结节形成，干酪样坏死2.分枝菌酸：抗酸性3.索状因子：破坏线粒体膜4.蜡质D：IV型变态反应5.硫酸脑苷脂：抑制吞噬细胞,无内外毒素，无侵袭性酶类，无表面结构物质，细胞壁成分是只要致病物质,结核结节的形成,是单核细胞参与的炎性肉芽肿反应，是细胞免疫和IV型变态反应平衡的结果细菌的脂质抵抗吞噬，巨噬细胞被破坏，形成原发感染。36周后，细胞变形，IV型变态反应产生磷脂刺激巨噬细胞转化为上皮样细胞融合成多核巨细胞。抑制蛋白酶对组织溶解，产生干酪样坏死,（二）结核分
8、枝杆菌2. 临床意义（1）致病物质主要包括：索状因子（cord factor）：存在于有毒力的结核分枝杆菌细胞壁中，能损伤细胞线粒体膜、抑制粒细胞游走和引起慢性肉芽肿；磷脂：能促进单核细胞增生，与结核结节的形成有关；,（二）结核分枝杆菌2. 临床意义（1）致病物质硫酸脑苷酯也是有毒株细胞壁的成分，能抑制溶酶体同吞噬体的结合，使细菌在吞噬细胞内长期存活；蜡质D：具有佐剂作用。蛋白质与蜡质D结合后能使机体发生超敏反应，引起组织坏死和全身中毒症状。,（二）结核分枝杆菌2. 临床意义（2）致病特点 感染途径多，主要经呼吸道感染，偶尔可消化道及破损伤皮肤等感染；引起多种组织器官的结核病，以肺结核最多见；
9、感染率高，发病率低。,（二）结核分枝杆菌2. 临床意义（3）免疫性 结核分枝杆菌是胞内感染菌，其免疫是以细胞免疫为主的传染性免疫，又称有菌免疫。机体对结核分枝杆菌的免疫性与迟发型超敏反应同时并存。此现象可用郭霍现象（Koch phenomenon）加以说明。,Koch现象和IV型变态反应,有毒结核分枝杆菌被初次接种豚鼠1014天，局部产生小节，形成肿块坏死溃疡侵入附近淋巴结淋巴血流全身播散，经久不愈动物死亡在812周之前先动物接种减毒小量结核分枝杆菌，再次接种结核分枝杆菌后局部反应提早出现，23天内红肿硬结溃疡痊愈。,结核菌素试验和卡介苗结核病是病原体和宿主相互作用，由细胞免疫介导的免疫病理反
10、应和组织损伤的结果,流行病学调查使用5TU的OT和PPD，若1TU呈强阳性，提示有活动性的结核,（二）结核分枝杆菌2. 临床意义（4）结核菌素试验（tuberculin test）是利用机体感染结核分枝杆菌后，抗结核免疫与迟发型超敏反应同时并存的原理，应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否产生迟发性变态反应的一种试验。,结核菌素试验,（二）结核分枝杆菌2. 临床意义（4）结核菌素试验（tuberculin test）可用于：选择BCG接种对象及测定接种效果；作为婴幼儿结核病诊断的参考；在未接种BCG的人群中作结核分枝杆菌感染的流行病学调查；测定肿瘤病人的细胞免疫功能。,（二）结核
11、分枝杆菌3. 微生物学检验（1）检验程序,（二）结核分枝杆菌3. 微生物学检验（2）标本采集 根据感染部位的不同分别采 取痰液、支气管灌洗液、胸腹水、脑脊液、 尿、粪便、分泌物及组织等。痰液应由肺深 部咳出，最好为清晨第一口痰；尿液可收集 清晨一次全部尿液或24h尿沉淀。,（二）结核分枝杆菌3. 微生物学检验（3）检验方法1）显微镜检查 标本直接涂片或集菌后涂片作抗酸染色或金胺“O”荧光染色。若找到抗酸阳性菌即可初步报告 “找到抗酸菌”或“未找到抗酸菌”，而不能报告“找到结核分枝杆菌”。金胺“O”染色镜检敏感性高，常用于筛选，阳性者再用抗酸染色法核查。,视野 细菌数 结果300 0 ()300
12、 12 ()100 12 (计数)100 39 (+)10 39 (+)1 19 (+)1 9 (+),结核分枝杆菌金胺“O”染色,结核分枝杆菌痰标本抗酸染色（Ziehl-Neelsen）,结核分枝杆菌尿标本抗酸染色（Ziehl-Neelsen）,（二）结核分枝杆菌3. 微生物学检验（3）检验方法2）分离培养 标本经酸、碱或其他适当的方法作前处理，以达到杀死或减少杂菌和液化痰标本的目的，然后接种罗-琴培养基或米氏7H10和7H11培养基，置37，5%10%CO2培养。连续培养8周无细菌生长可判为阴性。,（二）结核分枝杆菌3. 微生物学检验（3）检验方法2）分离培养 如在7d内有细菌生长可排除结
13、核分枝杆菌；如果出现生长缓慢（2周以上）、干燥、粗糙呈颗粒状、乳白色或淡黄色菌落，涂片染色为抗酸阳性，则多数为结核分枝杆菌，进一步作鉴定试验与其他抗酸菌进行鉴别。,（二）结核分枝杆菌3. 微生物学检验（3）检验方法3）鉴定 分枝杆菌的鉴定首先依据抗酸染 色、生长速度、色素产生和菌落特征作出 初步鉴定，再进一步作生化试验进行菌种鉴 定。有条件的实验室可采用Bactec分枝杆菌 快速培养系统、色谱分析技术及分子生物学 技术进行快速鉴定或直接对标本进行快速诊断。,（二）结核分枝杆菌3. 微生物学检验（3）检验方法（4）耐药性检测 结核分枝杆菌易发生耐药性，因此对由病人体内分离的结核分枝杆菌均应当做药
14、物敏感试验，以指导临床合理用药和耐药性监测。联合用药可以减少耐药性的产生。,（三）非结核分枝杆菌非结核分枝杆菌简称MOTT（mycobacterioses other than tuberculosis），是指除结核分枝杆菌复合群和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。主要特点有：大多为环境中的腐生菌，部分可作为条件致病菌，引起人或动物致病；生长温度不如结核分枝杆菌严格；对酸碱比较敏感；对常用抗结核药较耐受。,（三）非结核分枝杆菌根据菌落色素与生长速度将非结核分枝杆菌分为光产色菌（Runyon 群）、暗产色菌（Runyon 群）、不产色菌（Runyon 群）和迅速生长菌（Runyon群）。,临床常见非结
15、核分枝杆菌,温度对分枝杆菌生长的影响,光对分枝杆菌生长的影响,堪萨斯分枝杆菌抗酸染色,堪萨斯分枝杆菌菌落特征（L-J培养基）,海分枝杆菌引起的“游泳池肉芽肿”,戈登分枝杆菌菌落特征,蟾分枝杆菌抗酸染色,鸟-胞内分枝杆菌抗酸染色,鸟-胞内分枝杆菌菌落特征,耻垢分枝杆菌尿标本抗酸染色,偶发分枝杆菌菌落特征,（四）麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌（M. 1eprae），是麻风的病原菌。又称Hansen杆菌。1. 细菌特性 麻风分枝杆菌的形态及染色性与结核分枝杆菌相似，但较结核分枝杆菌短而粗，常呈束状或团状排列，抗酸染色着色均匀。无动力、无荚膜、无芽胞。本菌为典型的胞内寄生菌，有麻风分枝杆菌存在的细胞呈泡沫状
16、，称为麻风细胞，据此可与结核分枝杆菌区别。,麻风细胞抗酸染色,麻风分枝杆菌组织切片（Triff染色）,（四）麻风分枝杆菌麻风分枝杆菌（M. 1eprae），是麻风的病原菌。又称Hansen杆菌。麻风分枝杆菌的人工培养迄今尚未成功，犰狳对本菌高度易感，可皮内、皮下或静脉接种亦可用小鼠足垫接种，但易感性较犰狳低。,（四）麻风分枝杆菌2. 临床意义麻风是一种慢性传染病，主要表现为皮肤、黏膜和末稍神经的损害，晚期可侵犯深部组织和器官，形成肉芽肿。人类是麻风分枝杆菌的惟一宿主，也是惟一传染源。细菌随病人鼻分泌物、痰、汗液、乳汁、精液或阴道分泌物排出，通过直接接触或由飞沫传播。,（四）麻风分枝杆菌2. 临床意义人类对麻风分枝杆菌的免疫主要为细胞免疫。根据机体的免疫状态、病理变化和临床表现，分为结核样型（细胞免疫正常，传染性小）、瘤型（细胞免疫缺陷，传染性强）、界线类和未定类。我国以结核样型和未定类为多。,结核样型麻风皮肤损害,结核样型麻风皮肤损害,瘤型麻风,界线类麻风引起的手变形,（四）麻风分枝杆菌2. 临床意义3. 微生物学检验 麻风分枝杆菌的病原学诊 断主要依靠采集患者病理标本涂片或切片， 作抗酸染色，找到麻风细胞即可作出诊断。,
