1、中华人民共和国医院消毒卫生标准GB159822012,一、采样和采样原则,一、采样和采样原则1 采样后尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过4h；若样品保存于0-4时，送检时间不得超过24h。2 不推荐医院常规开展灭菌物品的无菌检查，当流行病学调查怀疑医院感染事件与灭菌物品有关时，进行相应物品的无菌检查。常规监督检查可不进行致病性微生物检测，涉及疑似医院感染暴发、医院感染暴发调查或工作中怀疑微生物污染时，应进行目标微生物的检测。,3 可使用经验证的现场快速检测仪器进行环境、物体表面等微生物污染情况和医疗器材清洁度的监督筛查；也可用于医院清洗效果检查和清洗程序的评价和验证。,二、卫生标准
2、值,（1）各类环境空气、物体表面菌落总数卫生标准,（2）致病性微生物 不得检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌等致病菌。2 医务人员手 卫生手消毒后医务人员手表面的菌落总数应10CFU/cm2 外科手消毒后医务人员手表面的菌落总数应5CFU/cm2.,2 医疗器材（1）进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌。（2）接触粘膜的医疗用品细菌总数20CFU/件（CFU/g或100cm2，致病性微生物不得检出。,（3）接触皮肤的医疗用品细菌总数200CFU/件（CFU/g或100cm2，致病性微生物不得检出。3.消毒剂类卫生标准（1）使用中消毒剂：细菌总
3、数100CFU/ml，致病性微生物不得检出。（2）灭菌用消毒液的菌落总数应为0CFU/ml.（3）无菌器械保存液：必须无菌。,三、 检测方法,1 空气微生物污染检查方法（1）采样时间：消毒处理后与医疗活动前期之间进行采样。（2）采样方法：类环境可选择平板暴露法和空气采样器法，参照GB50333医院洁净手术部建筑技术规范要求进行检测。空气采样器法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。,要求：按操作说明书。 结果报告： 采样器各平皿菌落数之和（CFU）空气细菌总数（cfu/m3）= 1000 采样速率（L/min）采样时间（min）,、类环境采用平板暴露法。A 基本要点：平板直径9c
4、m，采样高度80150cm，边角距离1m，暴露时间（类环境暴露15min，、类环境暴露5min）。B 操作：室内面积30，设内中外对角线3点，内、外点应距墙壁1 m处；室内面积30，东、西、南、北、中布5点采样，采样时将培养皿盖扣在培养皿口边缘，暴露一定时间后盖好送实验室置37培养48h作菌落计数，必要时分离致病性微生物。,（3）结果报告：按平均每皿的菌落数报告：CFU/（皿.暴露时间）2 物体表面微生物污染检查方法（1）采样时间：潜在污染区、污染区消毒后采样。清洁区根据现场情况确定。（2）采样面积：被采面积100 cm2，采样100 cm2。被采面积100 cm2，采全部表面。,）采样方法：
5、用5cm5cm灭菌规格板放在物体表面，用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液或N.S的棉拭子各1根在格子内横竖往返涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样1-4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检。若采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。,实验操作：将样品管充分混合后，用无菌吸管吸取不同稀释倍数的洗脱液1.0ml接种于灭菌培养皿中（共接种2只平皿，做平行样），加入熔化的450C灭菌营养琼脂15ml-20ml混合后，待其凝固，翻转平板置360C10C培养48h作菌落计数。,（4）结果计算： N采样液稀释倍数物体表面菌落总数(cfu/cm2)= 100
6、N平均菌落数10换算成10ml，即100 cm2采样面积100面积换算成每cm2报告小型物体表面的结果计算：N cfu/件。,3医务人员手卫生检查方法,（1）采样时间：采取手卫生后，在接触病人前或从事医疗活动前采样。（2）采样方法：令被检者5指并拢，用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液或N.S的棉拭子1支在双手指曲面从指根到指尖端来回涂,抹两次（一只手涂抹面积约30 cm2），并随之转动棉签，剪去手接触部分，放入10ml采样液中送实验室检验（共60cm2面积）。采样面积按平方厘米（cm2）计算。若采样时手上有消毒剂残留，采样液应含相应中和剂。,操作：将样品管充分混合后，用无菌吸管吸取不同稀
7、释倍数的洗脱液1.0ml接种于灭菌培养皿中（共接种2只平皿，做平行样），加入熔化的450C灭菌营养琼脂15ml混合后，待其凝固，翻转平板置370C培养48h作菌落计数。,（5）结果计算： N10细菌总数(cfu/cm2)= 60N平均菌落数10换算成10ml，即60cm2采样面积60面积换算成每cm2报告,4使用中消毒液细菌总数测定,（1）采样方法：用无菌吸管吸取1.0ml待检样品，在无菌条件下加入9.0ml含相应中和剂的采样液中混合后送实验室检验（采样液可以用N.S代）。（2）操作：将样品管充分混合后，用无菌吸管吸取1.0ml待检样品,接种于灭菌培养皿中（共接种2只平皿，做平行样），加入熔化的450C灭菌营养琼脂15ml混合后，待其凝固，翻转平板置370C培养48h作菌落计数。（1）结果计算：细菌总数(cfu/ml)=N10N平均菌落数10换算成10ml，即1ml采样量，结果按每ml报告。,谢谢,
