1、 中学生物实验整体解决方案第一品牌 400-696-5155试剂盒试用报告基本情况单位名称 海口市第一中学DNA 的粗提取与鉴定试剂盒申请试剂盒名称申请渠道 1.洛阳会议 2.朋友推荐 3.教研组织 4 网络试用背景:写写您的试用背景,让我们了解您的实验条件,以便日后更好的为您服务。1、有无生物新课标实验室?2、有无相关仪器配备?3、是否开展过相关实验?学校已建有实验室,但尚未开展本实验。仪器已备齐,由于生物组的老师之前都未做过相关实验,若有能有专业人员先对教师进行相关培训,对我们今后的实验开展将大有益处。试用过程与结果实验名称:DNA 的粗提取与鉴定实验原理:1. DNA 在 NaCl 溶液
2、中的溶解度是随着 NaCl 的浓度的变化而改变的。 当 NaCl 的物质的量浓度为 0.14 molL 时,DNA 的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在 NaCl 溶液中的 DNA 析出。2.DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的 DNA。3.DNA 遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂。实验仪器及实验材料:研钵、天平、漏斗、纱布、烧杯、酒精灯、玻璃棒、试管、试管夹、95无水乙醇、香蕉实验步骤(含操作过程照片):1.材料准备:用天平秤取香蕉 20g,将香蕉切成小块放入研钵中(如图) 。2.
3、制备滤液:从试剂盒中将研磨液取出,取 3mL 研磨液加入研钵中,与香蕉研磨充分。研磨至半流体状态时,将研磨的香蕉糊用漏斗和一层纱布过滤到烧杯中(如图 ) 。称取香蕉 制备滤液中学生物实验整体解决方案第一品牌 400-696-51553.提取 DNA:在上述香蕉提取液中,加入与滤液体积相等的 4冷却的 95无水乙醇。静置 1-2min,用玻璃棒朝一个方向轻轻搅拌,就会看到大量白色纤维状粘稠物从溶液中析出,用玻璃棒轻轻卷起(如图) 。蛋白质析出4.鉴定 DNA:将试剂盒中的二苯胺试剂 B 全部取出加入到 A 中混匀。取两支试管,各加入 2mol/L 的 NaCl溶液 5m,将丝状物放入其中一支试管
4、中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后向两支试管中各加入 4mL 的二苯胺试剂。混合均匀后,沸水浴 10min,观察结果(如图 ) 。加入二苯胺试剂 水浴加热实验结果(实验结果照片):实验结果如图:水浴加热下的颜色变化中学生物实验整体解决方案第一品牌 400-696-5155实验结果分析:在沸水浴的条件下,加丝状物的试管(含 DNA)遇二苯胺被染成蓝色,而对照组无变色现象。实验过程中,由于香蕉研磨液不易过滤,可加少量蒸馏水,并挤压纱布。使用试剂盒心得:课本上传统的实验方法采用鸡血,需要过滤很多遍,学生操作太麻烦,且时间明显不够用。而使用香蕉等植物则明显简化实验过程。使用试剂盒之后确实为老师的实验
5、准备节省很多的时间,方便学生操作,减轻了老师的实验任务。而且,试剂盒配制出的试剂实验效果明显,提高实验成功率。试剂盒或仪器使用改进意见试剂盒的量少,学生若操作失误则没有充足的试剂使用,可适当增加试剂量以备用。海南省海口市第一中学 尹翱翔、陈小燕 2013 年 3 月 28 日星期四中学生物实验整体解决方案第一品牌 400-696-5155试剂盒试用报告基本情况单位名称 海口市第一中学亚硝酸盐含量的测定试剂盒申请试剂盒名称申请渠道 1.洛阳会议 2.朋友推荐 3.教研组织 4 网络试用背景:写写您的试用背景,让我们了解您的实验条件,以便日后更好的为您服务。1、有无生物新课标实验室?2、有无相关仪
6、器配备?3、是否开展过相关实验?学校已建有实验室,但尚未开展本实验。仪器大都齐全,但有关仪器如摇床还欠缺,没有开展过相关实验。试用过程与结果实验名称:制作泡菜并检测亚硝酸盐含量实验原理:在弱酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸奈乙二胺偶合生成紫红色化合物,颜色的深浅与亚硝酸盐含量成正比,与标准显色液比较定量。实验仪器及实验材料:主要仪器:泡菜坛、容量瓶、榨汁机、天平、滤纸、量筒等。实验材料:黄瓜、白萝卜实验步骤(含操作过程照片):1.制作泡菜:先按 4:1 的比例配制盐水,煮沸冷却。然后将白萝卜和黄瓜修理、洗净、晾晒、切分成片状,装坛,加入冷却的盐水(如图)。2.配制溶液:打开
7、试剂盒,按提示配制氢氧化钠溶液、氢氧化铝乳液、N1萘基乙二胺盐酸盐溶液、对氨基苯磺酸溶液、5ug/mL 的亚硝酸钠标准液、提取剂及标准显色液(如图 ) 。制作泡菜 亚硝酸钠标准显色液3.样品处理:称取腌制的泡菜 40g,用榨汁机粉碎、过滤(如图) 。取 10mL 汁液置于 50mL 容量瓶中,加入 20mL 蒸馏水、10 mL 提取剂,用手振荡。加入 4 mL 氢氧化钠溶液,加水定容至 5 mL(如图) ,立即过滤。取 6 mL 滤液,加入氢氧化铝乳液,定容至 10 mL,过滤(如图 ) 。中学生物实验整体解决方案第一品牌 400-696-5155称取腌制泡菜 泡菜榨汁 加入汁液、蒸馏水、提取
8、剂 过滤4.测定:吸取 4 mL 样品溶液,置于 10 mL 试管中,贴好标签,加入 200uL 对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置 3-5min 后,加入 100uL N1萘基乙二胺盐酸盐溶液,加水定容至 5mL,混合均匀,静置 15min。观察样品的颜色变化,与标准显色液比较,找出与标准显色液最接近的颜色,记录对应的亚硝酸钠含量。实验结果(实验结果照片):实验结果如图:中学生物实验整体解决方案第一品牌 400-696-5155黄瓜比色结果白萝卜比色结果实验结果分析:由于室温较低,影响泡菜的发酵速度。由实验结果可知,黄瓜明显比白萝卜发酵得更快,亚硝酸钠含量更高。白萝卜在室温较低的情况下,第七天亚硝
9、酸钠含量最高;而黄瓜在腌制的第四天亚硝酸钠含量最高,之后开始下降。实验过程中,镉离子和钡离子通过静电吸附在泡菜碎片上的过程非常缓慢,必须通过长时间的振荡,效果才会明显,这就需要摇床。而实验室没有摇床则只能用手振荡,这就会增加了实验的困难。 使用试剂盒心得试剂盒中配制溶液所需药品已经完备,直接按说明配制,确实为老师的实验准备节省很多的时间,减轻了老师的实验任务。但是本实验测定亚硝酸盐的含量较为复杂,特别是加入 200uL 对氨基苯磺酸溶液和 100uL N1萘基乙二胺盐酸盐溶液,需要特别细心,学生操作不便。且发酵过程所花时间长,因此不适于开展实验课。试剂盒或仪器使用改进意见本实验需要隔天测亚硝酸钠的含量,需要提取剂的量较多,试剂盒中亚硝酸钠的含量可相应增加。海南省海口市第一中学 尹翱翔、陈小燕 2013 年 3 月 28 日 星期四