1、标本的采集管理程序 一目的:正确采集标本,保证检验结果准确可靠。二适用范围:适用采集标本和实验室人员接收标本。三职责:实验室工作人员须熟知标本的采集,处理贮存,安全处理等全过程。并有责任向临床医护人员进行宣传培训如项目选择,标本采集,运送,处理等技术要求和注意事项。采集标本必须严格按无菌操作,避免交叉污染,防止假阳性和假阴性结果出现,保证实验结果准确可靠。四采集操作步骤:一、血液标本采集法(一)毛细血管采血法一般常规检验用毛细血管采血法,这种采血法由检验人员执行,血清生化及细菌培养等检验因需要较多量的血液,一般由护理人员协助采血。目前不少生化项目检验已采用微量测定法,故也可采用毛细血管采血法采
2、标本。(二)静脉采血法1用物 同静脉注射法,备干燥注射器(510ml),7 号针头,标本容器(按需要备干燥试管、抗凝管或血培养瓶),酒精灯,火柴等。2操作方法(1) 备齐用物,贴好标签,核对无误后按静脉穿刺法采取所需血量,立即卸下针头,将血液沿管壁缓慢注入试管内,切勿将泡沫注入,避免震荡,以防红细胞破裂而造成溶血。因血液中细胞的内外成分有很大差异,如细胞内钾离子浓度是细胞外的 20 倍,细胞内的某些酶含量也较细胞外高,如发生溶血,则直接影响检验结果的准确性。(2) 如需全血、血浆,可将血液如上法注入盛有抗凝剂的试管内,立即轻轻摇动,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。血液常规检验标本使用含 ED
3、TA2K 的抗凝试管,抽血需要快速,避免血液凝固,打入抗凝管后需立即颠倒混匀,但不能过于用力,避免溶血。对于血小板少或者有其他血小板疾病的,需要尽快检测,最好不要超过 10 分钟,以免影响血小板结果。如需作二氧化碳结合力测定时,抽取血液后,应立即注入有石蜡油的抗凝试管中,注入时针头应插入石蜡油面以下,以隔绝空气,立即送验。否则血液中二氧化碳逸出,使检验结果降低,影响准确性。(3)采集血培养标本时,应防止污染。静脉采血后,将血液注入培养瓶内, 瓶内盛培养液约50ml,经高压灭菌,使用时将盖打开,用 2碘酒和 70酒精消毒瓶盖,更换针头将抽出的血液注入瓶内,摇匀后送验。一般血培养取血 5ml,亚急
4、性细菌性心内膜炎病人,因血中细菌数目较少,为提高细菌培养阳性率,应取血 1015ml。(4 )采血完毕,连同检验单及时送验。血液标本采集所需血量视检验目的而定。3注意事项(1)根据不同的检验目的,计算所需的采血量,选择试管。( 2)需空腹抽血时,应事先通知病人,避免因进食而影响检验结果(因清晨空腹时血液中的各种化学成分处于相对恒定状态)。( 3)采集血标本应严格执行无菌技术操作,严禁在输液、输血的针头或皮管内抽取血标本,应在对侧肢体采血。( 4)如同时抽取几个项目的血标本,一般应先注入血培养瓶,其次注入抗凝管,最后注入干燥试管,动作要准确迅速。(5)取血后,应将注射器的活塞略向后抽,以免血液凝
5、固而使注射器粘连并阻塞针头。(三)动脉采血法(以作血气分析为例)1用物 同静脉穿刺法,另加肝素抗凝剂(5),橡皮泥或橡皮塞。2部位 多选用桡动脉、肱动脉、股动脉。3操作方法 用 2 ml 注射器,连接 7 号针头,吸 1:500 肝素生理盐水溶液 1ml,将活塞来回抽动,使内壁沾匀肝素,再推掉全部肝素溶液,将活塞推至空筒顶端后不再回拉,以保持注射器内无空气。选择动脉(桡动脉采血比较方便),常规消毒病人的皮肤及操作者的左手食、中指后,以左手绷紧皮肤,右手持注射器,用左手食指触摸动脉搏动处,以 45 度角进针,见血液自动加入空筒内至 2ml 后拔出针头,嘱病人按压局部 5 分钟,应立即用橡皮泥或橡
6、皮塞封闭针头(针头斜面埋入橡皮中即可),以隔绝空气,在手中搓动注射器,使血与肝素混合,立即送验。4注意事项( 1)血标本必须隔绝空气。因为血气分析是指当天大气压条件下,用隔绝空气的血标本与一定浓度的气体相结合,而后测定人体内 PH 值、氧分压等,作为监测及追踪观察病人的血气情况。血标本中若进入空气将产生误差。因此采血的注射器使用前应检查有无漏气,针头必须连接紧密,标本采集后立即封闭针头斜面。(2)及时送验。标本采集后应立即送验,如要等待测定,应将标本置于 0 到 4 度冰箱内保存不得超过1 小时,以免影响检验结果。(3)标本采集需注意的生理因素的影响进食、运动、妊娠、情绪波动、体位、吸烟、昼夜
7、变化等对检测结果的影响。如进食可显著影响血 GLU、TG 的结果;运动可增加血中肌酸激酶的含量;醛固酮的立卧位结果完全不同;妊娠可影响血生化、血常规等多个项目;皮质醇的昼夜结果差异也很大。因此采集标本时尽可能避免这些干扰,尽可能在清晨病人空腹的条件下采集,保持条件一致。食物成分:高蛋白、高脂及饮食可引起血中蛋白、血脂、尿酸增高、香蕉、咖啡等可引起尿中儿茶酚胺代谢产物的测定等. 药物:异胭肼、庆大毒素、氨芐青毒素可使谷丙转氨酶活性增高、咖啡因可使胆红素增加。因此,建议检查前几天就停止使用有干扰的药物,且申请单最好能注明近期用药情况。(4)造成不合格标本的常见原因1) 未询问病人姓名,未核对标签,
8、抽错标本。2) 在输液时抽血,造成血样污染或被稀释:由于前臂静脉存在广泛联系,同一手臂一侧输液另一侧抽血会污染,输液及输血的针头或滞留管内采血都会造成污染并稀释血样。3) 抽血时压脉带使用时间过长,病人攥拳太紧,部分抽血困难,采血后未卸下针头直接快速注入试管,甚至注入气泡,造成溶血,这些都将影响检测结果。4) 抽血量少或量不准,需要加抗凝剂的标本未按血液和抗凝剂比例抽血,甚至没有及时颠倒混匀,造成标本明显凝固而失效。5) 错过最佳采血时间:如血药浓度,肌酸激酶,皮质醇(Am8 :00、Pm4:00),疟原虫(发作时采血),微丝蚴(安静状态下晚上 9:00-11 :00),血培养应在抗菌药物应用
9、前或无法停药时下次用药前并在发热时采集,且需多次采集等。6) 抽动脉血气前未准备好橡胶塞,抽时未推完针筒里的肝素,抽后没有将针头及时插入橡胶塞,忘了马上来回搓动针筒混匀标本,造成部分血液凝固。7) 病人同时需做血培养时的采血顺序:先注血培养瓶,再注抗凝管,最后注入干燥试管。5. 葡萄糖耐量试验:(1).试验前三天每日碳水化合物进量不得少于 300g,(2).试验前一天晚餐后禁食至试验完毕(3)试验日抽空腹血 2ml,将 100g 葡萄糖溶于 300ml 水中,让病人服下,服后 0.5h,1h,2h.3h 各抽血 2ml 测血糖即可。及时送检。 1 需加抗凝剂的检测项目:(此类标本抽血必须量准)
10、 检测项目 抽血量 试管(及抗凝剂) 要求血常规、网织红细胞计数(可抽同一管)1ml 全血糖化血红蛋白(HbAc)同上血常规试管(含 1.5-2.2mgEDTA.K2)充分混匀及时送验血沉(ESR ) 1.6 ml 全血 血沉管(含0.4ml、106mmol/L 的枸橼酸钠)充分混匀及时送验血流变学3-5 ml 全血1.6 ml 全血血粘度管(含 100U肝素)血沉管需空腹,充分混匀及时送验血凝系列,3P 试验,D-二聚体,1.8ml 全血 枸橼酸钠抗凝管(含0.2ml、109mmol/L 的枸橼酸钠)充分混匀及时送验血培养 成人 10mL,儿童1 5mL. 骨髓 1 ml血培养瓶 混匀及时送
11、验发热初期 12天内或高峰期采血G6PD 2.0ml ACD 抗凝管 充分混匀及时送验血气分析 2.0ml 肝素抗凝 空针肝素化后方可采血、隔绝空气2特殊要求的项目(各类标本) 要求检测项目时间要求 温度要求血气分析、各类细菌培养0.5h 内送检GLU、ESR、电解质、血常规、体液常规、涂片找霉菌等及时送检淋球菌培养、脑脊液培养,精液常规,粪便找阿米巴原虫等0.5h 内送检 需保温留尿过程及痰、尿培养、衣支培养、血气分析等无法及时送检时4保存冷凝集试验、血常规等 及时送检 不得冷藏3直接注入洁净干燥试管的项目:(为减轻病人痛苦同一科室的项目可适当同享标本,即多个项目共用一个标本,并且严防溶 血
12、) 项目抽血量注意事项生化全套:包括肝功能、肾功能、电解质、血糖、血脂 3 -5ml 必须空腹采血杂项:心肌酶,Amy,脂肪肪酶,CHE, 同上 空腹为宜血清蛋白电泳 同上 空腹为宜微量元素(铜、锌、铁、镁、总铁结合力) 同上 空腹为宜乙肝三系、Pre-S1Ag、HIV-Ab 、 RPR、TPPA 同上 空腹为宜免疫系列: 免疫球蛋白、C3、C4、ASO 、RF、CRP 同上 空腹为宜、严防灰尘污染甲状腺功能检测: T3、T4、TSH、FT3、FT4、TG、TM、TRAb 同上 空腹为宜性腺功能检测:E2、P、T、PRL、FSH、LH、-HCG 同上 空腹为宜肝炎系列:甲丙戊丁庚肝抗体 同上
13、空腹为宜肝纤维化系列: HA、LN 、C、PC 同上 空腹为宜自身免疫反应系列: 抗核抗体全套(ANA、总 ENA、ENA 分型、抗 Ds-DNA)AKA、AMA 、AMA-M2、ANCA、CCP、LKM-1、LC-1、 SLP/LP、ALA同上 空腹为宜肿瘤标志物: CA-1-99、CA-50、 CA-153、CA-125、 AFP、CEA、PSA 、FPSA,CA724, TPA, NSE,同上 空腹为宜病毒抗体类:EBV- IgM,RSV- IgM,TOX-IgM ,CMV- IgM, 麻疹- IgM,同上 空腹为宜蛋白类检测:铁蛋白,叶酸,Vic-B12 同上 空腹为宜一些药物浓度检测
14、: 地高辛 同上 注意采集时间杂项: cTnI- ,肌红蛋白, 同上 空腹为宜肥达氏反应,外斐氏反应 同上 空腹为宜、严防灰尘污染红斑狼疮细胞(LES) 同上 写明时间及时送验HBV-DNA 同上 空腹为宜及时送验4 常用血液抗凝剂剂名 抗凝力 机理 应用 禁忌10草酸钾 0.2ml 抗凝10ml 的血与 Ca结合成不溶性草酸钙而抗凝血非蛋白氮二氧化碳结合力血 K 血 Ca草酸钠 1 2mg 抗凝1ml 的血与 Ca结合成不溶性草酸钙而抗凝血凝血酶原时间及复钙时间测定血 Na+ 血 Ca38枸橼酸钠6mg 抗凝 1ml的血与血中生成不溶性离子化的枸橼酸钙,阻止血液凝固血沉 1:4 凝血 1:9
15、双草酸盐(草酸钾、草酸胺)0.5ml 抗凝 5ml的血保持红细胞形态不变 RBC 压积测定 草酸钾 氟化钠0.1ml 抗凝 1ml的血抑制葡萄糖分解而保持血糖浓度血糖测定 BUN(尿素氮)肝素 0.1ml 抗凝5 10ml 的血抑制凝血酶元转为凝血酶血氨 血气分析二、尿标本采集法(一)尿常规标本 1目的 检查尿液的色泽、透明度、比重、尿量、尿蛋白、尿糖定性、细胞和管型等。2用物 容量在 100ml 以上的清洁玻璃瓶 1 个。3操作方法备容器贴检验单副联,注明病区、床号、姓名等。当晚并待病人留取翌日晨第一次尿液约 10-50m 于标本瓶内。由于晨尿浓度较高,且不受饮食的影响,检验结果更具参考意义
16、。留取尿标本时,不可将粪便混于尿液中,以防粪便中的微生物使尿液变质。昏迷或尿潴留病人可导尿留取标本,男病人也可用塑料袋固定接尿。女病人在月经期不宜留取尿标本。(二)尿培养标本 1目的 取未被污染的尿液作细菌培养及计数,以明确诊断。2用物 无菌试管、试管夹、酒精灯及火柴,必要时备外阴冲洗及导尿物一套(见导尿术)。3操作方法 女病人留中段尿法:病人取坐位或卧位,垫便盆,按导尿法清洁、消毒外阴部(轻病人自行清洗),再用 0.1%新洁尔灭溶液消毒尿道口,嘱病人自行排尿,护士用试管夹夹住无菌试管,弃去前段尿液,留取中段尿约5ml,留尿前后均应将无菌试管口及棉塞在酒精灯焰上消毒,盖紧棉塞,防止污染。留尿困
17、难时可用导尿法留取或膀胱穿刺法收集尿液。采集后及时送检。操作完毕,协助病人穿裤,整理用物,及时送验。若无法及时送检时应 4保存。男病人留中段尿法基本同女病人法,将尿道口周围彻底消毒后留取即可。4注意事项(1)严格无菌操作,以免污染尿液。采集中段尿时,必须在膀胱充盈情况下进行。 (2)尿内勿混入消毒液,以免产生抑菌作用而影响检验结果。(3)留早晨第一次尿(细菌阳性率高),且在膀胱充盈下进行,尿内不得混入消毒液。(三)留 12 小时或 24 小时尿标本 1目的 检查一日尿量及尿内容物,如钠、钾、氯、 17羟类固醇、 17酮类固醇、肌肝、肌酸、尿糖、尿蛋白定量及浓缩查结核杆菌等。2用物 备清洁带盖的
18、大口容器(容量为 30005000ml)。3操作方法(1)备好容器,贴上标签,注明采集的起止时间,并向病人说明留尿的目的、方法。以取得合作。(2 )嘱病人于清晨 7 时排空膀胱,弃去尿液,记录开始留尿时间,病人解第一次尿时即应加防腐剂(6 ),使之与尿液混合,防止尿变质;至次晨 7 时排尽最后一次尿,即 24 小时尿液全部送验。留 12小时尿标本,应从 19 点开始至次晨 7 点止。(3)如作尿肌酸、肌酐、17羟类固醇、17酮类固醇、钾、钠、尿糖定量检查,可测定 24 小时尿总量,记录于检验单上,取出 100ml 尿液送验,其余弃去。也可将 24 小时的尿标本分段留取,即:711 时为第 1
19、次,11 时17 时为第 2 次,1721 时为第 3 次, 21 时至次晨 7 时为第 4 次,作为 4 段尿糖定性检查。如浓缩检查结核杆菌或作尿蛋白定量检查,则将 24 小时全部尿液送验。(四)测定肾功能的尿标本采集法124 小时尿比重测定法(浓缩稀释试验法)。(1)目的 测量肾功能 ,其中主要了解肾小管的调节功能。(2)用物 6 个标本瓶和留 12 小时尿容器。(3 )操作方法 备好容器贴标签,注明采集时间,在病人在正常饮食情况下进行,上午 8 时排尿弃去,此后每隔 2 小时的尿液,分别留于清洁瓶内,共留取 6 次尿标本送验。20 时至次日 8 时,将尿留入一个标本瓶中送验。参考值:在正
20、常情况下夜尿量应少于日尿量,夜尿量一般在 250500ml ,最多不超过 700ml,如超过此数量,比重固定在 1.010 左右,表示肾功能不全。日尿量标本中,其中最高的一次比重应在1.018 以上,最低的一次应在 1.000 1.009.2酚红排泄试验(1 )目的 测定肾小管排泄功能。(2)用物 静脉穿刺用物 1 套,1ml 注射器,针头,0.6酚红 1 支,标本瓶 4 个。(3 )操作方法备齐用物,贴好标本瓶标签,注明标本采集时间,并向病人说明采取标本的目的及方法,试验前2 小时至试验完毕禁吸烟、饮茶。嘱病人晨起禁食,排尿弃去后,饮水 300500ml,促进排尿。静脉注射酚红溶液 6mg,
21、剂量必须准确,并记录注射时间。注射后 15 分钟、30 分钟、60 分钟及 120 分钟各收集全尿 1 次,待全部标本采集后,一同送验。如采用肌内注射法,则于注射后 70 分钟、120 分钟留全部尿一次。参考值:排泄率分别为 15 分钟 2550,30 分钟 1525, 60 分钟 1015 ,120 分钟 510 。2 小时排泄总量55 。3内生肌酐清除率试验 (1 )目的 测量肾小球滤过率。(2)用物 静脉穿刺盘 1 套,抗凝标本瓶 2 个,尿标本瓶 1 个。(3 )操作方法患者进低蛋白饮食 3 天,试验当天勿饮茶或咖啡,避免剧烈运动,清晨嘱病人饮水 300ml 后排空膀胱,此后准确收集
22、5 小时的尿液,并抽血 3ml 送验。测定尿及血中肌酐含量,算出每分钟尿量,再按下式计算内生肌酐清除值。内生肌酐清除值( ml/min)= 尿肌酐浓度(mg/日)尿量 (ml/min)/血肌酐浓度(ml/日)。参考值:70-125ml/min.4.尿素澄清试验(1 )目的 了解肾脏排泄功能。(2)用物 静脉穿刺盘 1 套,抗凝标本瓶 1 个,尿标本瓶 2 个。(3 )操作方法试验前一日及试验当日,病人进正常饮食,但不可饮茶或咖啡,也不宜作剧烈运动。 当日早餐后(或饮水 300ml,半小时后),排尽尿液弃去,此后准确收集第 1 小时和第 2 小时的全部尿液,切勿丢失。在 2 小时之间抽血 2ml
23、 送验。分别测定血液及 2 次尿液中的尿素含量,并算出每分钟尿量。参考值:最大清除值 6090ml/分,标准清除值 4168ml分,清除率 65125 。如两次尿标本计算的清除率相差超过 30,应重留标本测定。(五)葡萄糖耐量试验1目的 测定胰腺功能。正常人服一定量葡萄糖后,血糖随即升高,待一段时间后,血糖恢复到空腹血糖水平。如给一定量葡萄糖负荷后,观察血糖升高、恢复的水平和速度,可间接了解胰岛 细胞的储备功能。2用物 抗凝血标本瓶 5 个,尿标本瓶 5 个,静脉穿刺盘 1 套。3操作方法(1)试验前三天,每日碳水化合物进量不少于 300g.(2)试验前一天晚餐后禁食至试验完毕。(3)试验日清
24、晨抽血 2ml 检查血糖,并留尿一次。(4)将 100g 葡萄糖溶于 300ml 开水中,请病人服下,服后半小时、1 小时、2 小时、3 小时、各收集尿标本查尿糖,并分别抽血查血糖,应将标本迅速送验。参考值:空腹血糖 3.9 6.2mmol/L, 30min9.5mmol/L, 60min/9.0mmol/L , 2 小时6.7mmol/L, 3 小时后恢复至正常水平,每次尿糖均为阴性。6尿液 HCG 试验标本收集的注意事项:标本应为晨尿,即清晨起床后的第一次尿标本。(六)特殊尿化学成分检测留尿种类及需添加的相应防腐剂一览表: 检测项目(/24h) 尿液种类添加的防腐剂防腐剂剂量尿 24h 生
25、化项目:尿蛋白定量、尿 K、尿 Na、尿CL、尿 Ca、尿 Cr、尿 UA、尿 GLU、尿微量白蛋白24h 尿甲苯5ml尿 24h 激素类:类固醇、肾上腺素、去甲肾上腺素、VMA、儿茶酚胺同上浓 HCL6-10ml尿糖 餐后 2 h 尿免疫球蛋白 G,尿微量白蛋白,尿转铁蛋白,尿-2微球蛋白随机尿 七常用的防腐剂剂名 机理 应用举例40% 甲醛 固定尿中有机成分,抑制细菌生长。 爱迪氏计数 100ml 尿中加 0.5ml甲苯 保持尿液的化学成分不变,形成一薄膜覆盖尿液表面,防止细菌污染。尿蛋白定量、尿糖定性加入数滴,测定尿中钾、钠、氯、肌、酐,肌酸等须加入 10 ml.浓 盐 酸 使尿液在酸性
26、环境中,能防止尿中激素被氧化。17羟类固醇与 17酮类固醇等检查 24 小时尿中加 510ml三、粪便标本采集法(一)粪便常规标本1目的 检查粪便颜色、性状、有无脓血、寄生虫卵等。2用物 蜡纸盒、竹签。3操作方法(1)将化验单副联贴于蜡纸盒上,注明科室、床号、病人姓名等。(2)交待病人清晨留取标本,用竹签取 5g 大便(似蚕豆大小),放入蜡纸盒中送验 。重病人由护士协助留取,如为腹泻病人应取脓、血、粘液等异常部分,如为水样便,可盛于大口玻璃瓶中送验。(二)粪便培养标本 1目的 取粪便标本作细菌培养。2用物 便盆 清洁蜡纸盒或试管,棉签或肠拭子。3操作方法 嘱病人排便于便盆内,用消毒棉签选取含有
27、粘液、脓血等异常病变成份的粪便试管内,也可用肠拭子蘸等渗盐水,由肛门插入直肠 4-5cm 处,轻轻转动,取出粪便少许,放入无菌培养试管中,盖好送验。用肠拭子直接采取标本进行培养,可提高阳性率。冬天保温并于用药前送检。4注意标本不得被尿液、泥土、药物等污染(三)检查寄生虫及虫卵标本1目的 检查寄生虫数、浓缩集卵、孵化血吸虫毛蚴。2 用物 带盖的便器,蜡纸盒,竹签。3操作方法( 1)检查寄生虫卵的粪便标本:应从粪便几个不同的部分采集 5-10g。如查血吸虫卵,则应采集带血及粘液部分送验;查蛲虫卵,应在 23 点左右,病人感觉肛门周围发痒时,用无菌棉签蘸生理盐水,自肛门周围皱壁处拭取,然后插入试管内
28、,塞好管口送验。( 2)检查阿米巴原虫的粪便标本;收集标本前,应先将便器加温后再排便,便后连同便盆立即送验(因阿米巴原虫排出体外后因温度突然改变失去活力,不易查到)。( 3)查寄生虫体:病人服驱虫药后,应将大便排于清洁便盆中留取全份粪便,检查蛔虫,钩虫、蛲虫的数目。如驱绦虫,应嘱病人勿用手纸去拉已排出肛门外的虫体,以免拉断虫头不能排出。如第一次大便未见虫头,应告诉病人再留第二次大便送验,只有头节排出才表示驱虫成功。(4)孵化血吸虫毛蚴的标本;留取粪便 50g(鸭蛋大小),必要时留取 24 小时大便,要及时送验。(四)隐血标本1目的 检查粪便内肉眼不能察见的微量血液。2 用物 蜡纸盒、竹签或特制标本盒。3操作方法 嘱病人在检查前三天内禁食肉类、肝类、血类、叶绿素类饮食、维生素 C 及含铁剂药物,避免出现假阳性,于第 4 天留取 5g 粪便,置于蜡纸盒内, 及时送验。四、痰标本采集法 (一)痰常规标本1目的 检查痰液中的细菌、寄生虫卵和癌细胞。2用物 蜡纸盒或广口瓶。3操作方法 嘱病人晨起用清水漱口清洁口腔,或用朵贝氏液再用清水漱口,以除去口腔中细菌,然后用力咳出气管深处的痰液,盛于蜡纸盒或广口瓶内,如查癌细胞,瓶内应放 10甲醛溶液或 95酒