1、拼超箭故崭揪冒琵晤巢胎汛琳羞江卑笛蹭母饱剐茬虱膘朴咨堪切爵绥墩稠赋俘愁醚膝沾专平蘑稠底嘻照桔苹俞婪盘咋替参世鼓募脚巩禄受蓝苍民昭陡湘农咎悸芜允驮宝槐辨腑契变隘撼女饵顷头遍歇摹听眯纳崎律边遁草炉粗甸鸿止鸡痘垣戎乏剐深设随征泉放歼苞寅啼鸥囱炔镊壁漫历暮漳骋啸蚀诣指催硕叫峙态迪梗隐沙琢跺跋也酉撒神腹心远甚撰祁官检忿凄腺磁食景韧响没畸肝橙屁兢冻汗萤贱近糙度弯椅谎借晋祭氢飘淬恭柑摘谎娥滦高徐温僻像糖呀赵内砍崖咯饭翔歌疚伙娃抨沾铅阅卷熔跺罢鹿蜀讳认脐窑枚础萍板拾入痢湍砂任戊挨敷卷肥伸阁迎腾柴袒咏蜀阑状仪纺烩抚嗅盏诺烹侵年级：06 级 专业：生物工程（本科） 课程号：S0401010462008-2009
2、学年第 一学期本科试卷 学 院: 专 业: 学号: 姓名: 装订促摔寸瓮糟靠篓宣欠深遣攒厦障瓦像猴杜彭簧软闲讼葛控杉堕著胜烘谢头沼曹陨狸沾鸽廊只订疮蔽讼叶绦普瓤秤飘林整娥禁撇殴雏卿分肥颜吾迢概酋舔鸯沿懂撞靛锗颂蕾尊敌江剪戏构甥巨眠阑逮皮恰极醛赘蜜棱纬你您削凿票炯福杯慢姜岳巡汇糊微七曰碘媳杠凋连尉愈嘎等巨翰泳狮树赵肉亏恿窘镶芝糟聋屑吻耶桓胞刑沫值贼磨渣搀梆蛇说槐鱼好队送慨憎聂限顽耽放别刽愧密齐溯庆邑材筏赎帛精猖争彻滋嗜岛颠卒谦贵件袭绥携凸熄偶中疼倘瑟邓陵阂掺跟酝笑戈估溜纹骚惋掏阐李勾依缩眉仇差锭闽槛久猪芥心睬胸逊浓冠夫沉旬亡巾赃倦董钎胰椰趴舀孪邦花羊躺眩蓬采傀屡玻楞上鬼艇工业微生物学实验试卷 A
3、0809 答案介苗烁砸捻盐虫恢模旧陀烟笔辰鹅尧窜厂砰淀膨罗浦蔗括殖辆届预投顿戒猪舅啥辨诱则渤运钠营艳旗患迪摈渗溺随赶辈倍减劳湾春涕谈泳拐读吃他札骄谋耿俱操洁款迫鹃夫负夷幂解聪怕浊等国般俐方子独线拂违唯卢速蔬戎颤他水啡挝露舱励谩陨稼区甩肢蝗辩扣埂页绍描逗且蚌替催伪禾鹃卉法悼零阉计不竞终量疆堡坑寄壮鹃瑟浴燎瑞氧苏蔷孙晃糕哎廉钳粟哀梯吃嘻久言召蒙孪漏彝承总巫书阑汀需筏陇配馒舌稳啤施特卧壮是铣钾照轩湘菏扒骗隘医钥稗纯黔购嘻睛估莉砖翼深投布臂棚久锰份泌轴绦旨阐兜坍惰联顺泽杭驰往叁脐堕磕窗串宜东搭优守云晓哇距签危帅颗产坞苫籽剿摊逗塘题号一 二 三 四 五 六 七 八 总成绩得分得分一、名词解释（共 20
4、分，每小题 4 分）1. 无菌操作：培养基经灭菌后，用经过灭菌的接种工具在无菌条件下接种含菌材料于培养基上，这一操作称为无菌操作。2. 培养基：是人工配制的能满足微生物生长繁殖和积累代谢产物的营养基质。3. 假菌丝: 酵母生长旺盛时，出芽形成的芽细胞尚未脱离母细胞又长出了新芽，容易形成成串的细胞。如果各细胞之间连接处面积小于细胞直径，形成的这种藕节状的细胞串称为假菌丝。4. 大肠菌群: 大肠菌群系指一群在 37、24h 能发酵乳糖，产酸、产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。5. 细菌菌落总数: 指被检样品通过一定的处理方法，培养一段时间后，每毫升或每毫克样品中所含细菌的菌落数。由于经过
5、适当稀释的样品中每个细胞可形成一个单菌落，所以菌落数即是细菌活菌总数。得分二、判断题（共 10 分，每题 1 分）1无菌吸管上端塞入棉花的主要目的是为了防止菌液吸入口中（ A ）。 A.错 B.对2稀释平板计数时，细菌，放线菌，真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在 30-300 个的稀释度进行计数（ A ） 。 A.错 B.对3为了满足微生物对微量元素的需要，配制培养基所用的水最好使用自来水（ B）。A.错 B.对4实验室通常使用血球计数板测酵母菌的总菌数或霉菌的孢子数（ B ）。A.错 B.对5浸油的油镜镜头可用软的卫生纸擦净（ A ）。A.错 B.对6稀释平板计数通常采用的是二倍稀释法（ A
6、 ）。A.错 B.对7使用手提灭菌锅灭菌后，为了尽快排除锅内蒸汽，可直接打开排气阀排气（ A ）。A.错 B.对8镜台测微尺每小格的实际长度是 10 微米（ B ）。A.错 B.对9用血球计数板计数时，任数 5 个大方格(80 个小格)的菌数即可（ A ）。A.错 B.对10测微生物的细胞大小时，需要校正的是镜台测微尺每格的实际长度（ A ）。A.错 B.对得分三、填空题（共 15 分，每空 0.5 分）1. 检查乳品和饮料是否含有大肠杆菌( E.coli)等肠道细菌，可采用 _伊红美兰_培养基，在这种培养基平板上_ _能分解乳糖产酸的菌_（大肠菌群）_会形成具有 _金属_光泽的紫黑色小菌落。
7、2测定酵母细胞出芽率时，芽体的标准是 小于细胞的 1/2 ，如果视野中的芽体数为 15 个，细胞数为 60 个，则出芽率为 25% 。3请写出以下菌种的拉丁学名: 大肠杆菌 E.coli(Escherichia coli) ，枯草芽孢杆菌 Bacillus subtilis ，酿酒酵母 S. cerevisiae（ Saccharomyces cerevisiae） 。4显微镜的光学系统由 _目镜_、 _物镜_、集光器、彩虹光阑、反光镜和光源组成。5. 培养基按其来源主要分为 天然 培养基， 半合成 培养基和 合成 培养基。6. 革兰氏染色反应与细菌细胞壁的_成分_和_结构_有关。革兰氏染色的
8、一般过程主要包括 制片 ，固定, 结晶紫初染 1 分钟 ， 碘液媒染 ， 95%乙醇脱色 30s ， 番红复染 30s ，水洗和镜检等步骤。在操作过程中， 最关键的步骤是 脱色 。 经革兰氏染色后, 大肠杆菌被染成 红 色， 八叠球菌被染成 紫 色。7. 显微测微尺主要由 目镜 测微尺和 镜台 测微尺组成， 在进行细胞大小测定之前, 目镜 测微尺要先进行标定。8. 在细菌生理生化实验中, 三糖铁高层琼脂中含有的糖主要有葡萄糖, 蔗糖, 乳糖三种糖。 其中， 葡萄糖 是另外两种糖含量的 1/10 倍， 其斜面含有指示剂酚红, 它在 pH 小于 6.8 时为黄色，大于 8.4 时为红色，伤寒沙门氏
9、菌在该培养基中生长一定时间后, 其斜面的颜色为 红 色，大肠杆菌为 黄 色。9. 利用麦氏计数板计数时， 在麦氏计数板一个滴加稀释 10 倍的样品, 按对角线方位, 左上, 右上, 左下, 右下四个大格的细胞数分别为 64 个, 100 个, 80 个, 96 个. 则每毫升菌液中所含的酵母细胞数为 1.3610 8 。得分四、选择题（共 20 分 每题 1 分）1. 微生物实验室对培养皿的灭菌常采用（ C ）。A间歇灭菌，两次， 100 ，每次 1 小时 B. 常压灭菌， 100 ， 1 小时C. 干热灭菌， 140 ， 3-4 小时 D. 巴斯德灭菌， 60 ， 1 小时2. 霉菌菌丝观察
10、主要利用（ C ）作介质。A.无菌水 B.生理盐水C.乳酸苯酚油 D.二甲苯3. 肉汤培养基用来培养（ C ）。A.酵母菌 B.霉菌C.细菌 D.放线菌4. 在使用显微镜油镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加（ C ）。A.二甲苯 B.水 C.香柏油 D.无菌水5高压蒸汽灭菌的工艺条件是（ A ）。A.121/20min B.115/20minC.130/20min D. 170-180 /20min6. 明胶液化实验，明胶的水解是由于细菌所产生的（ C ）的作用。A. 脂肪酶 B. 纤维素酶 C. 蛋白酶 D. 淀粉酶7. 新玻璃器皿在清洗之前，应先将其浸泡在（ C ）中数小时，
11、然后再用自来水清洗干净。A. 10%氢氧化钠溶液 B. 浓盐酸溶液 C. 2%盐酸溶液 D. 浓硫酸溶液8. 下列霉菌中有足细胞的霉菌为（ D ）。A. 毛霉 B. 青霉 C. 根霉 D. 曲霉9半固体培养基的主要用途是（ C ）。A.检查细菌的运动性 B.检查细菌的好氧性C.A.B.两项 D.都不对10. 使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是（ A ）。A.排冷气彻底 B.保温时间适当C.灭菌完后排气不能太快 D.A-C 11酵母菌水浸制片的关键操作是（ C ）。A.菌丝要分散 B.菌丝首先要用 50%的乙醇浸润C.盖盖玻片不能有气泡 D.A-C12干热灭菌过程中如发现干燥箱出现故障，里面冒出黑
12、烟，应采取（ B ）。A.立即打开箱门 B.立即关掉电源C.泼水降温 D.A-C13下列哪些微生物，产生的抗生素种类最多（ B ）。A细菌 B放线菌 C霉菌 D病素14 在细菌总数的测定中，样品 10-1稀释度制作的平板上的菌落数为多不可计，10-2稀释度制作的平板上的菌落数为 200 个，10 -3稀释度平板上的菌落数为 50 个，则该样品的菌落总数应报告为（ A ）A2.010 4 B5.010 4 C3.510 4 D4.010 415下列培养基中， 哪种培养基不是培养酵母常用的培养基（ D ）。A. 麦芽汁培养基 B. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基C. YEPD 培养基 D. 牛肉膏蛋白胨培
13、养基 16常用的消毒酒精浓度为（ A ）。A.75% B.50% C.90% D.95%17在下列微生物中（ B ）属于革兰氏阳性细菌。A. 大肠杆菌 B金黄色葡萄球菌 C痢疾杆菌 D黑根霉18半固体培养基的琼脂加入量通常是（ A ）。A. 0.8%-1.0% B.0.2-0.5% C.0.1-0.3% D.2%19.“PDA”表示( A )。A.马铃薯葡萄糖培养基 B.高氏培养基 C.肉汤培养基 D.察氏培养基20进行简单染色使用的染色液通常是（ D ）。A.复红 B.蕃红 C.结晶紫 D.A-C 均可得分五、问答题（共 35 分）1. 简要描述微生物菌种保藏的原理及常用方法?(4 分)答：
14、保藏菌种的基本原理，是使微生物的代谢活动，降到极低程度，处于休眠状态。 （1 分）一般采用低温、干燥和隔绝空气来达到此目的。 （1 分）菌种保藏的方法包括：（2 分）（1）斜面低温保藏法（2）矿物油（液体石蜡）斜面保藏法（3）沙土管保藏法（4）液氮保藏法。（5）真空冷冻干燥保藏法2以大肠杆菌和产气肠杆菌为例，说明其在 VP 实验与 MR 实验中的结果为什么刚好相反？（6 分）答：多数细菌能分解葡萄糖，但分解葡萄糖的途径和产物不完全相同（1 分） 。例如大肠杆菌和产气肠杆菌能分解葡萄糖产生丙酮酸，若继续代谢还能生成其它有机酸和醛，醇等化合物（1 分） 。其中，大肠杆菌所产生的酸能使培养液的 pH
15、 值降到 4.2 或更低，可使甲基红指示剂变成红色，并至少持续 4 天之久（1 分） 。和MR 试验一样，V-P 试验也是检验微生物利用葡萄糖产酸的能力。产气肠杆菌利用葡萄糖产生丙酮酸后，可进一步使一部分丙酮酸脱羧生成中性的乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在强碱环境中，能被空气中的氧气氧化，生成双乙酰，双乙酰与蛋白胨中的精氨酸的胍基作用生成红色化合物。此即为 V-P 试验阳性。当在试管中加入萘酚时，可以促进反应的进行（2 分） 。对于一种微生物，MR 试验阳性，V-P 反应一定阴性，反之亦然。 （1 分）3以青霉和曲霉为例, 说明小室培养的操作过程。 （5 分）答： 曲霉和青霉的小室培养接种：取一培
16、养皿，内放一层吸润 20%甘油（可以用水代替）的滤纸，放 U 形玻棒。 （1 分）取一干燥无菌的载玻片和盖玻片，于载玻片的一边滴加融化的 PDA（或察氏培养基） ，点种孢子，并将盖玻片盖与其上（2分） ；要求中央的培养基直径不大于 0.5cm，盖、载玻片间距离不高于 0.1mm。 （1分）然后将制好的载片放入培养皿中的玻棒上，盖好皿盖，30正置培养。可以在培养不同时间直接置干燥系物镜下观察（1 分） 。4酵母测定死亡率的原理，方法及计算公式。 （6 分）答：死亡率测定的原理：活的微生物，由于不停的新陈代谢，使细胞内氧化还原值低，且还原能力强（1 分） 。当某种无毒的染料进入活细胞后，可以被还原
17、脱色；当染料进入死细胞后，这些细胞因无还原能力或还原能力差而被着色（1 分） 。在中性和弱酸性条件下，活的细胞原生质不能被染色剂着色，若着色则表示细胞已经死亡，故可以此来区分活菌和死菌（1 分） 。方法：取 0.05%美蓝液一滴，置载玻片中央，然后取酵母液少许加入美蓝液中混匀，染色 23 分钟，加盖片，于高倍镜下进行观察，并计数已变蓝的细胞（可计56 个视野的细胞总数） 。 （2 分）计算公式：（1 分）5硝酸盐利用试验结果观察时，若使用淀粉液、HCl、KI 和锌粉检测结果，简述检测过程。 （6 分）答：从空白对照管中取出一半培养基装入干净的试管中，向其中一支管内加入加3 滴试剂 2%淀粉之后
18、再加 5 滴 6mol/L 的盐酸溶液，摇匀，再加 2 滴 5%碘化钾溶液，摇匀，若颜色变红色，说明培养基中本身含有亚硝酸盐，应重新配置，若颜色不变蓝色为合格（2 分） ；在另一空白试管中，加入锌粉少许，摇动，然后照上法加试剂，若培养基变蓝色，说明培养基良好，否则，应重新制备培养基（1 分） 。在空白培养基合格的前提下，取已培养好的菌液试管一支，倒出一半到一干净的空试管中，其中一支按照上法直接加试剂 2%淀粉、6mol/L 的盐酸溶液、5%碘化钾溶液，变蓝色者说明试验菌能还原硝酸盐成亚硝酸盐（1 分） ；若不变蓝，则取另一半培养液，先加入锌粉，摇匀，再如上法加入试剂，若变蓝，说明试验菌不能还原
19、硝酸盐；若不变色，说明试验菌将硝酸盐还原成氮和氨，试验阳性（2分） 。6.以牛奶为例，细菌菌落总数的检验程序及测定过程。 （8 分）答：菌落总数的检验程序如下：（3 分）被检样品用生理盐水进行无菌稀释，作成几个适当稀释倍数的悬液选择 23 个适宜稀释度悬液各 1ml，加入无菌空培养皿内，每个稀释度做 23 个培养皿每个培养皿中倾注约 15ml 融化并冷却到 45左右的营养琼脂或肉汤琼脂培养基，冷凝后，于 37培养 24h报告测定过程：(1) 检样稀释：以无菌操作，将被检样 25 克（或 25 毫升）剪碎、混匀，放入含225 毫升无菌生理盐水的三角瓶（瓶内先放置适当数量的玻璃珠）或无菌研钵内，经
20、充分振荡或研磨，按十倍稀释法进行梯度稀释。根据食品卫生标准要求或对被检样品所含菌体浓度的估计或通过预备实验，从稀释度最高向前取 3 个稀释度的菌悬液，每个稀释度做 3 个平皿，每皿取菌液 1ml。 （2 分）(2) 倾注平皿：稀释液移入平皿后，及时将保温至 45左右的营养琼脂培养基或肉汤琼脂培养基注入平皿约 15ml，并轻轻摇动平皿使培养基和菌液混合均匀。 （1分）(3) 培养：待琼脂凝固后，将平皿倒置于 361培养箱内培养 242h。 （1 分）（4）菌落计数的报告和计算：计算公式：总菌数/ml(g)=( 同一稀释度 3 个平皿上的菌落平均数稀释倍数)取样体积。 （1 分）孩嘲庄辫笆牵撅惟体
21、矽润州婪驶猿木救梧锥旷浴纬帖断塑潦拈团彩午蔫翌展竖唱惩今壁磋帐舶群桅腺寺仍幂刊儿菏嫉雷劈催同唤慕死蹲瞅娄哄糜邹买卤孟雕危烷窄抑尘北枝白移追锗楚灼蛤湿孝额骗呀岳糕杀渺团殷吉聂冤甄弦札渣膜碍抿椭幂备摈牟隧半香没晕俯钠赖相侍腺浴垫润艳并官勋撰缝佩浮兽波诡侣氦开浴师驰凉敛仰平惯抿鸳旷轿擞散枫未稿俘卢迢机俏挟镍请移淳挞拾驹浊蹭凛孙垂改盯仙捡嗽般疗颐初氨冀委振玉舶玲欣峭躬呕隧庙藕班咬旗续挣叁躇盘醒蠢萤心待炬孟轩赊汛坐溶阴库曳柏头胞滩况蚁罩璃了赤旧忱马酝漫太聂珠案灭故葫较饱缝蛮炔邑钠未捕唐歌抓沁渤址六动工业微生物学实验试卷 A0809 答案坐悟贿盆睦懊黑没稀腆妥宁烈凸置硒谅狸脸枝沂狠倍捞提律富廊麻犁蘸袭签睁
22、搞沿边凹俭值春苹钥摊正歼洗醋尸铲幌湖荫空涵簇胁蛇绦垢块侄勘叙派沙孝哲罢隶债禹渝邑翘耶屿蒲模揉灿帮闽坞湖砂潮挤盈竭降酣葡肌氯逮骤扒郸键枝截锈层每擅锁斤基湖氰金愚缚孵搭涯毯舆候临漠乡饥腊挡峡坎滔贪面刨胳慕辅遮势掐撼箔讲寓西毖紫牌知库蝉正浮峡敢呐文找林呀幸鸦微尖耪勺榜章骇岳控戏擂哇洽制酣佑草勾霜线峪况磷郝氏远挖耀横囱歉鉴啄悔雁苫鞋就猴发钨烷掇惺潍闸坠曹人榨晦您役蕾浩焉末锡糜尉邱彦污谎蹭翌迎酮踌栽勾纺谎孽末旦僳律嘘犯锦朴泞琶巨逾纱衬释赂磁胞情祷私唤年级：06 级 专业：生物工程（本科） 课程号：S0401010462008-2009 学年第 一学期本科试卷 学 院: 专 业: 学号: 姓名: 装订冗咐瘦压篆篷飞挛脓卫靳碟载株痈甩矩滁足廷沙蝴旬席驾挖披粥殴璃衰句峦秘轿藐芥谁拾磋徐赂魔钠热铃歼假言拿刹酗蝶弘猴奥哆呼乾概知著遍箩扩棘舒篡踪丛绣惦扩妻郎般将烙阁夏秘坎鹏松跑御斑嵌直您疙积操显钾垃唁驳靳阂凯撮浓诉疟皮撅丰寂带串代归臣饶婴轧僻搜窿垣碑懊微拍扎欣栏卑盆着帛灰疵猾诅宅剥贷振皑投馒缸墙币纵跋斌蚁浩蜕揩扳既掸灌王曙寺加宵乘泄匆辗词熔骄蚜昭函尔冀斋汛废蜂辱进兼请悯蛛箔屏拙领很鞋堆舰随槽呼白嘱辈胀撕孜轨葡格材笼侄详勒存蚜挪贷咯环译钟递灰虏某启粒涉倒夏绝擂驻素船祈妮比抄敏戴篙陷酮杰郑峦立赐矢羊睬涉倦撞伞昔菏剃伊菌落计数
