1、1,检验标本采集指南,检验科 江训英 5-25,检验结果是临床医师在诊疗过程中所需要的重要信息，临床医师可以根据这些检验结果及病人的临床情况来区分疾病的不同阶段，观察疾病的变化，判断预后或观察疗效。所以分析前阶段样本的质量保证是直接关系到检验结果能否真实客观地反应患者当前病情的一个重要环节。,3,患者采血前的准备,1. 一般要求：病人在采血前24h内应避免运动和饮酒，不宜改变饮食习惯和睡眠习惯。静脉血标本采集最好在起床后1h内进行。采血时间以上午79时较为适宜。门诊病人提倡静坐15分钟后再采血。2. 采血时间：有些血液成份日间生理变化较大，因此应相对固定采血时间，一般以清晨空腹抽血为宜急症项目
2、除外。3. 患者体位：有些血液成份存在立位与卧位之间的差异，为减少这种影响，取血病人的体位应相对固定。一般采用坐位取血，而且取血前应让病人有10分钟的时间稳定自己的体位。4. 剧烈的运动：激动的情绪都会影响到一些血液成份浓度的变化，取血的当晨病人不宜做剧烈的运动，避免情绪激动，取血前应有10分钟的休息。,4,5. 输液的影响：由于边输液边采血影响血液成份的测定！规定输液时应在输液的另一侧手臂取血。6. 生活方式的影响：烟、酒、咖啡及高脂、高糖饮食，可使血液中某些成份高于正常，需与一般病理情况相区别，取血前几日应注意避免。7. 生理差别的影响：不同年龄组的个体及妇女的妊娠期、月经期，血液成份有一
3、定的生理差异，应注意与病理情况区别。8. 葡萄糖耐量测定：试验前三天正常饮食，试验当日清晨空腹抽血2ml，并同时留尿。将100克葡萄糖溶于300ml温水中嘱病人一次服下，立即记录时间；然后分别在服糖后60、120、180分钟，各抽血2ml，并每次同时留取尿液，注名管号和杯号，立即送检，分别测定血糖及尿糖。,5,临床检验结果是否可靠，除了检验仪器和设备，以及检验人员的业务素质外，主要取决于临床检验的质量控制。临床检验的质量控制包括病人的准备、标本收集、运送、分析前处理、分析中实验过程、结果计算、报告书写等全过程。这中间，除了过失误差外，影响检验结果的主要是生理学变异及分析变异（即误差）。而正确的
4、收集标本就是为了排除引起生理学变异的种种因素。,6,、影响机体生理指标的主要因素。,、运动：强烈的肌肉运动明显影响体内代谢。一般在做血液检查时，应该采取晨血，住院病人可在起床前采血。而在院外，匆忙起床赶到医院门诊采血的病人应至少休息分钟后再抽血。,7,、紧张与情绪激动：可影响神经内分泌功能和呼吸。在患者相对安静和情绪稳定时采取。、饮食的影响：早晨空腹采血可以相对避免饮食对某些临床检验结果的影响。血液化学成分可因饮食量及性质而异。大量进食后取血检测，可使葡萄糖、钾、碱性磷酸酶及甘油三酯升高。食谱对某些生化指标有一定影响。如高蛋白的饮食可使血中尿素氮、氨、尿酸偏高，患者喝大量含咖啡的饮料，可使体内
5、儿茶酚胺释放，引起血中脂肪酸上升,8,、酒对生理指标的影响：饮酒可造成血中乳酸、尿酸增加；长期有饮酒习惯者，大多可有高甘油三酯血症，也会长期不正常。、取血的体位对结果的影响：体位改变可引起某些生理指标的显著变化。所以住院病人与门诊病人检查的结果会有所差别。甚至同一个病人在病房检查的结果与到门诊检查的结果有一定差异。,9,、药物对临床检验结果的干扰与影响主要表现在以下二方面。,、药物对临床检验分析方法的干扰：某些药物本身或其代谢产物可对临床检测的任何步骤进行干扰。其干扰原因可由药物本身的物理性质如药物的颜色与药物本身所发出的荧光，或药物的化学性质如强还原性，或药物与血浆蛋白形成复合物或药物本身对
6、血清酶的抑制等来决定。而造成临床检测结果与机体实际情况的差别,10,、药物通过其生理作用、药理作用及毒理作用改变机体生理参数。这类影响有的是临床治疗所需要的，有的则是不需要的，即平时所说的药物的副作用。故在采取检验标本前，应事先了解患者是否服用了某些药物。另外，临床上经常用血液学方面的检查来评价某些药物的疗效，及其副作用对人体的反应。由于某些药物中的成份可以改变机体某些生化参数，故在做此类临床药物监测时应排除此类药物对检测的干扰与影响。例如：长期服用避孕药的患者可使转氨酶及转肽酶升高。,11,、临床血液标本的分类与区别：,、血液标本的基本分类：血液标本分为全血、血浆、血清三种。简单表示即：血细
7、胞血浆全血全血加抗凝剂后离心分离出来的淡黄色液体血浆全血不加抗凝剂而自然凝固后分离出来的，不含纤维蛋白原的淡黄色液体血清血浆中含有血细胞及其有形成分及多种生理物质和代谢产物。、血浆与血清的区别：采取血浆的优点是可以立即分离血细胞而无须待血标本自然收缩，这样可以避免凝血及标本运输过程中产生溶血。,12,、全血与血浆的区别。全血与血浆含水量不同，全血中水占，而血浆中水占。血中某些可溶于水的物质如葡萄糖、尿素氮等，用血浆测定比用全血测定高，尤以红细胞压积显著升高。目前临床检验用血标本，除血细胞检查、血培养等少数项目用全血外，其它生化、免疫、肿瘤标记物等检测多采用血清或血浆测定。这是由于血清或血浆中的
8、生理成分与机体组织间液比较接近，更能真实地反应机体的生理情况，反映其病理改变也更灵敏,13,、静脉血与毛细管血的区别：从理论上讲，除了毛细血管中葡萄糖高于静脉血，乳酸及丙酮酸则低于静脉血外，其它生理物质如、总蛋白（）、白蛋白（）等二者间无显著差异。二者间的区别主要是指在临床检测中，因采集方法的不同而引起被测物质含量的改变。最近，我院临床血细胞检测由原来手指采血改为静脉采血，这一改变在前一段时间引起了医院临床上小小的波动。,14,静脉血液采集作业指导书,15,1. 目的抽取静脉血标本以做各项检验。2. 适用范围适用于本科做生化、免疫、血常规等项目所需血液标本的采集。3. 物品准备：止血带、一次性
9、垫巾、无菌棉签、复合碘消毒液、一次性采血针、负压真空管（数量和种类根据要求选取后检查灭菌日期、有效期及有无漏气）、试管架、编号笔、口罩。,16,4. 检验申请单填写要求：4.1 检验申请单用钢笔填写，使用正楷字，字迹清楚，填写完整。4.2 填写内容包括：受检者姓名、性别、年龄、临床诊断、送检标本、检验项目、标本采集年月日时、申请医生及采样者签名。5. 操作步骤：5.1 查对检验申请单、受检者姓名及是否已按医嘱准备，向受检者解释操作目的，以取得合作。在采血管上贴好与检验申请单相对应的标签。5.2 采血完毕后，产生的医疗垃圾按规定分类处理,17,6. 注意事项6.1抗凝管收集血标本后，立即将试管轻
10、轻颠倒56次，使血液与抗凝剂充分混匀。6.2 一般生化、免疫检验用干燥非抗凝管收集标本，采样量3-5ml。若检验项目较多，应适当增加采样量。6.3 血常规检验用EDTAK2抗凝管收集标本，采样量0.5-1毫升。6.4 凝血用枸橼酸钠（0.2ml）抗凝管收集标本，采样量必须准确，为1.8ml。6.5 糖化血红蛋白测定需用EDTAK2抗凝管。6.6 餐后，血糖、血脂可增加而影响测定结果，故一般应空腹抽血。6.7 激素，肿瘤相关检测用干燥非抗凝管3-5mL。,18,7. 标本运输及实验前存放：低温条件2-8或室温运输，1小时内送检。1小时内分离出血清，室温放置不超过4小时，4保存不超过8小时，长时间
11、保存需在冰冻条件下，且只能冻融1次。8. 附加检验项目申请：8.1 标本采集送出后需附加检验项目的，其申请应在标本采集当天上午10点30分以前电话通知实验室。8.2 附加检验项目申请为本检验科目录外项目的需提前一天与检验科联系，以便联系其它实验室进行检测。,19,尿液标本采集作业指导书,20,1. 目的采集尿液标本以做尿液常规、生化检验。2. 适用范围适用于本科做尿液常规、生化项目所需尿液标本的采集。3. 物品准备：专用一次性尿杯、编号笔。,21,5. 操作步骤：5.1 查对检验申请单、姓名，向受检者解释操作目的，以取得合作。5.2 发一次性尿杯一个给受检者，嘱受检者留取新鲜尿立即送检，以清晨
12、第一次中间段尿为宜。5.3 受检者按要求自己用一次性尿杯留取半杯尿标本交待检。6. 注意事项,22,6. 注意事项6.1 根据采集时间，可分为晨尿、随机尿、空腹尿、餐后尿、计时尿（2h、3h、12h、24h）等。一般定性分析测定，可在任意时间留取标本。常规定性分析，多采用晨尿。一般尿液检查应留取新鲜尿液置清净、干燥容器中立即送检。（静脉滴注大剂量青霉素、VitC时可影响尿蛋白、尿糖及尿隐血结果，应尽量避免）。 6.2 标本应避免污染。一般定性分析标本，应在留取后马上检测。若需保存、或收集24小时尿液，原则上应首选04冷藏，必要时可添加化学防腐剂。常用的化学防腐剂有：a. 甲苯（或二甲苯）：较常
13、用，如24h尿糖定量、尿蛋白定量测定。100ml尿液中加1ml。不能制止尿液中已有细菌的繁殖。b. 氯仿：防腐效果较甲苯好。可能干扰尿沉渣镜检。,23,c. 盐酸：分析测定甾体激素及其衍生物或儿茶酚胺以及含氮物质时常选用。100ml尿液中加1ml，或24小时尿液中10-15ml。d. 甲醛：100ml尿液中加0.5ml。用于24h尿无机离子定量及艾迪氏计数测定可干扰尿糖测定和干化学法的白细胞测定。7. 其它：如分析失败，将对同一原始样本进行检验。如仍不能发出报告者，分析原因并告知受检者重新采样检验,24,临床微生物标本的采集与运送,25,微生物让人类步步为营,我们应该追求：“准确的病原学诊断”
14、“针对性病原学治疗”正确的微生物标本采集和运送，是准确的病原学诊断的前提！,26,基本原则,1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检5.棉拭子标本宜用运送培养基6.混有正常菌群污染标本，不可置肉汤培养7.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂。8.送检标本应注明来源和检验目的,27,如何提高细菌阳性检出率？,标本采集时机标本采集方法标本的质与量标本的运送与保存镜检筛选合格标本（退检制度）高质量、多种分离培养基培养环境合理的收费制度,28,血培养标本,采集与运送,29,血培养的采集时间,对怀疑菌血症、真菌血症的患者，在考虑使用抗菌药
15、物之前，应立即采集血培养标本。必须同时或间隔短时间内采集套以上血培养标本。,30,血培养的采集次数,患者：推荐同时采集套（不同部位）血培养标本。（即双瓶双臂同时采集血培养标本。）婴幼儿患者：推荐同时采集次（不同部位）血培养标本。,31,血培养的采血量,成年患者：推荐采血量为每套不少于10ml，每瓶不少于5ml。婴幼儿患者：推荐采血量每瓶不少于2ml。（少于病人总血容量的1%）,32,皮肤消毒,推荐使用碘町、洗必泰或碘伏作为皮肤消毒剂。碘町作用1min碘伏作用1.5-2min洗必泰作用时间与碘町一样（但不能用于少于2个月婴儿皮肤消毒）,33,采集部位,推荐从外周静脉采集血液标本。不推荐动脉血，因
16、其诊断价值没有比静脉血更大。不推荐静脉留置导管，因其常伴有高污染率。如果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本以帮助阳性结果的判读提供解释。,34,采集方法,在采血之前，血培养瓶的橡皮塞需使用70%酒精消毒并干燥。然后再进行穿刺部位的皮肤消毒。严格按照“酒精、含碘消毒剂、酒精”的消毒步骤操作，并等待足够的消毒时间。严格无菌操作，不允许在皮肤消毒后用手接触静脉，除非带有无菌手套。不推荐采血和接种血培养瓶更换注射器针头。,35,血培养标本的运送,采集后的血培养瓶应在1小时之内送往实验室。血培养瓶在采血接种后在室温不超过数2时。血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏或冷冻。,36
17、,血培养标本的拒收,瓶子上帖的标签错误或未帖标签。血培养瓶打破的、损坏的或渗漏。血液凝固。,37,感染性细菌性心内膜炎,急性：在经验性抗生素用药前30min之内采集血培养。亚急性：在30分钟至1小时之内连续抽取数套血培养。最初采集3套血培养。假如这些血培养在24小时之内结果是阴性的，再采集2套血培养，总共5套。,38,痰培养标本,采集与运送,39,病原体种类繁多而复杂,使下呼吸道感染病原诊断成为难题,细菌（包括放线菌与奴卡菌，厌氧菌与分枝杆菌）真菌（包括肺孢子菌）病毒支原体、衣原体与立克次体原虫寄生虫,40,咳痰途经口咽部,不可避免地受到污染,唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml。
18、研究显示，国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象,41,我国痰细菌培养现状,标本送检率低苛养菌检出率极低结果重复性差报告速度慢感染菌与污染菌不易区分药敏结果与治疗反应存在差距,42,咳痰标本的采集,标本采集方法医师或护士直视下采集标本病人先漱口，去除表面的菌群教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液临床上约半数咳痰标本不合格！,43,关于咳痰标本,在抗生素应用前采集痰标本;标本采集后12h内必须立即进行实验室处理；咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本 ;取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口;深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导;无痰可用35NaCl 5ml雾吸约5min导痰
19、；也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰；,44,咳痰标本不合格，退检吗？,如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于25个，白细胞小于10个，应不做或仅在特殊要求时做培养。如做培养，报告中注明“镜检结果表明标本口咽分泌物污染明显”。,45,痰培养的送检次数,对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续23天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状出现改变；怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检；怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的送检次数尚无定论。,46,痰培养的运送和保存,尽快（2h）送至实验室。如不能及时送达，应将标本暂存于4，但放置时间不可超过24h。厌氧培养标本的最佳运送时间取
20、决于标本量。被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌氧菌培养。,47,痰培养的拒收,光学显微镜细胞学检查发现口咽分泌物污染明显。没有标签或贴错标签。运送容器选择不当或有渗漏。标本采集不符合要求。同一天同一试验重复送检2次。延时送至实验室的标本。,48,尿培养标本,采集与运送,49,尿培养标本,清洁中段尿导尿导管尿经耻骨上皮肤穿刺采集膀胱内尿液送检标本以晨起第一次尿液为佳不能立即送检者，可暂存4冰箱，但保存不超过8h,50,粪便培养标本,采集与运送,51,粪便标本的采集方法,自然排便采集标本时，取有脓血、粘液、组织碎片部份的粪便13g。液体粪便则取絮状物，一般取13ml，直接装入粪便容器或运送培养基中送检。直肠拭子采集粪便标本：先以肥皂、水和70%酒精，将肛门周围洗净，然后用经无菌盐水湿润的棉拭子插入肛门超越肛门括约肌约2-4cm，与直肠粘膜表面接触，轻轻旋转，必须将棉拭子置于运送培养基中送检。对于弧菌的培养需要提出特别申请。,52,53,谢谢！,
