1、宫颈病变检测人乳头瘤病毒感染的意义 摘要 目的 探讨人乳头瘤病毒（ HPV）感染与宫颈病变的关系。方法 用荧光定量 PCR 法检测 15 例正常宫颈，57 例宫颈尖锐湿疣， 78 例宫颈上皮内瘤变（ CIN）， 43 例宫颈尖锐湿疣合并 CIN， 13 例宫颈癌的 HPV 感染情况。 结果本组宫颈病变中 HPV 感染率 92.72%，单一型 HPV 感染率 89.52%，高危型 HPV 感染率 98.25%；宫颈尖锐湿疣以HPV52 感染为主（ 41.18%）； CIN 以 HPV16 感染为主（ 41.67%）；尖锐湿疣合并 CIN 感染 HPV58 者占 25.00%，感染 HPV16 和
2、 HPV52 的各占 15.00%； 60.00%宫颈癌感染HPV16；多重型 HPV 感染以 HPV 亚型双重感染为主。 结论 HPV 检测对于宫颈病变的筛查及临床分流监测有重要价值。 关键词 宫颈病变；人乳头状瘤病毒；宫颈上皮内瘤变；宫颈癌；尖锐湿疣 中图分类号 R711.3文献标识码 B文章编号 1673-9701（ 2014） 15-0145-03 Significance of infection with human papillomavirus in cervix lesions HAN Shuzhen1 WANG Fuqiang2 WANG Zhijing2 WANG Duju
3、an1 ZHAO Yinghai2 CHEN Xiaoyi2 1.Department of Pathology, Affiliated Dongguan Houjie Hospital, Guangdong Medical College,Dongguan 523945,China;2.Department of Pathology, Basic Medical Sciences of Guangdong Medical College,Zhanjiang 524023,China Abstract Objective To investigate the relationship betw
4、een human papillomavirus infection and cervix lesions. Methods HPV infection was detected by fluorogenic quantitative polymerase chain reaction in all specimens included 15 cases of normal cervix, 57 cases of cervical condyloma acuminatum, 78 cases of cervical intraepithelial neoplasia（ CIN） , 43 ca
5、ses of cervical condyloma acuminatum combining CIN, 13 cases of cervical carcinoma. Results In this groups of cervix lesions,HPV infection rate was 92.72%, HPV single infection rate was 89.52%, high risk HPV subtypes infection rate was 98.25%. Cervical condyloma acuminatum cases were most commonly i
6、nfected with HPV52(41.18%). CIN cases were most commonly infected with HPV16(41.67%). Cervical condyloma acuminatum combining CIN cases were more often infected with HPV58 (25.00%), HPV16 (15.00%) and HPV52 (15.00%). 60.00% of cervical carcinoma cases were infected with HPV16. Multiple infection HPV
7、 subtype cases were more often infected with dual infection subtype. Conclusion The detection of HPV infection has great value for screening and triage of patients with cervix lesions. Key words Cervix lesions； Human papillomavirus；Cervical intraepithelial neoplasia； Cervical carcinoma；Condyloma acu
8、minate 人乳头瘤病毒（ human papillomavirus,HPV）是一种嗜生殖道黏膜和皮肤上皮细胞的病毒 ,性接触是 HPV 感染的主要途径之一， HPV 可根据其致病性的不同分为低危型和高危型 1。研究结果表明 ,HPV 感染与宫颈尖锐湿疣、宫颈上皮内瘤变（ cervical intraepithelial neoplasia,CIN）及宫颈癌的发生密切相关 2-6，若能早期发现亚临床和潜伏性 HPV 感 染，并鉴定其亚型有助于临床诊治。本研究以宫颈尖锐湿疣、 CIN、尖锐湿疣合并 CIN、宫颈癌等病变作为研究对象，对在我院筛查宫颈癌的部分患者进行阴道镜检查并取宫颈活检，用荧光
9、定量 PCR 技术检测宫颈 HPV-DNA，以探讨分型检测 HPV 对于宫颈病变筛查及临床分流监测的意义。 1 资料与方法 1.1 标本来源 2012 年 1 12 月 , 用液基细胞学方法对东莞市厚街镇有性生活史妇女进行宫颈癌筛查，共检 13 610 例，选择其中同时进行 HPV 检测和宫颈活检的 15 例正常宫颈和 191 例不同类型宫颈病变为研究对象 ，所有对象均为非孕期，无自身免疫性疾病，取材前 3 d 内无阴道冲洗及阴道用药。宫颈活检病理诊断为宫颈尖锐湿疣 57 例， CIN 78 例（其中 CIN 10 例、 CIN 21 例、 CIN 47 例），宫颈尖锐湿疣合并 CIN 43
10、例，宫颈癌 13 例。宫颈病变（除外宫颈癌）患者的年龄17 79 岁，平均 33.1 岁。宫颈癌患者年龄 34 54 岁，中位年龄 40 岁，平均年龄 43.2 岁。 1.2 HPV-DNA 亚型检测 专用取样器于宫颈口刷取宫颈脱落细胞，将毛刷放入专用细胞保存液内。用荧光定量 PCR 技术对样本进 行HPV-DNA 亚型检测，上述检测法不能明确 HPV 型别的标本用基因芯片技术检测。 1.3 阴道镜检查并取活检 对阴道镜下黏膜有充血、水肿、粗糙、糜烂、溃疡者在病变处取材，对阴道镜下无明显病变者在宫颈管鳞柱上皮交界处 2、 4、 8、 10 点处取材。所有患者均知情同意，所有活检组织均有病理诊断
11、结果。 2 结果 2.1 正常宫颈及宫颈病变中 HPV 感染的检测情况 本组 206 例病例中， 15 例正常宫颈 HPV 感染率为 0（ 0/15）， 191 例宫颈病变 HPV 感染率为 92.72%（ 191/206），其中单一型 HPV 感染有 171 例，占 89.52% （ 171/191），多重型 HPV 感染 20 例，占 10.48%（ 20/ 191）。 191 例不同宫颈病变中单一型或多重型 HPV 感染情况见表 1。 171 例单一型 HPV 感染的宫颈病变中高、低危型 HPV 感染情况见表 2。 表 1 191 例不同宫颈病变中单一型或多重型 HPV感染情况 n（ %
12、） 表 2 171 例单一型 HPV 感染的宫颈病变中高、低危型HPV 感染情况 n（ %） 2.2 不同宫颈病变中 HPV 亚型感染情况 宫颈尖锐湿疣组 HPV 亚型以 HPV52（ 41.18%） 为主 ,其次为 HPV11（ 11.76%）、 HPV66（ 11.76%）、 HPV 16 （ 5.88%）、 HPV56（ 5.88%）、 HPV68（ 5.88%）、 HPV35 （ 5.88%）、 HPV39 （ 5.88%）、 HPV51（ 5.88%）。 CIN 组 HPV 亚型以 HPV16（ 41.67%）为主，其次为 HPV58（ 20.83%）、HPV52（ 16.67%）、
13、 HPV18（ 8.33%）、 HPV33（ 8.33%）、 HPV66 （ 4.17%）。尖锐湿疣合并 CIN 组 HPV 亚型以 HPV58（ 25.00%）为主，其次为 HPV16（ 15.00%）、 HPV52（ 15.00%）、HPV33（ 10.00%）、 HPV51（ 10.00%）、 HPV11（ 5.00%）、 HPV18（ 5.00%）、 HPV39（ 5.00%）、 HPV56（ 5.00%）、 HPV68 （ 5.00%）。 13 例宫颈癌均为单一型 HPV 感染，以 HPV16（ 60.00%） 为主，其次为 HPV31 （ 20.00%）、 HPV33 （ 20.0
14、0%）。 2.3 20 例多重型 HPV 感染的宫颈病变中 HPV 亚型感染情况 20 例多重型 HPV 感染的宫颈病变中， 3 例为 3 个不同亚型 HPV 感染，病理诊断为尖锐湿疣 1 例 （ HPV33、 52、68）， CIN 1 例 （ HPV16、 18、 68），尖锐湿疣合并 CIN 1例 （ HPV31、 51、 58），余下 17 例均为 2 个不同亚型 HPV感染，病理诊断为尖锐湿疣 6 例，检测出 1 例 HPV 16+52、1 例 HPV39+58、 1 例 HPV42+52、 1 例 HPV51+56、 1 例HPV51+66、 1 例 HPV52+68； CIN 4
15、 例，检测出 1 例HPV16+18、 1 例 HPV31+52、 1 例 HPV51+56、 1 例 HPV52+68；CIN 5 例，检测出 1 例 HPV16+52、 1 例 HPV16+68、 1 例HPV18+31、 1 例 HPV18+52、 1 例 HPV52+58；尖锐湿疣合并 CIN 2 例，检测出 1 例 HPV18+52、 1 例 HPV58+66。本组实验结果与文献报道相一致，即多重型 HPV 感染患者中以HPV 亚型双重感染为主 7， 8。 此外，本组多重型 HPV 感染检测结果显示， HPV52 的检出率最高（ 50%, 10/20），其次是 HPV16（ 25%,
16、 5/20）和HPV18（ 25%, 5/20）， HPV68（ 20%, 4/20）， HPV51（ 20%, 4/20），HPV31（ 15%, 3/20）， HPV58（ 15%, 3/20）， HPV66（ 10%, 2/20），HPV33（ 5%, 1/20）， HPV39（ 5%, 1/20）。 3 讨论 近年来 HPV 在性活跃人群中经生殖道传播和感染率明显上升，根据 HPV 致癌性强弱分为低危型和高危型，低危型包括 HPV6、 11、 42、 43、 44 等，主要引起尖锐湿疣；高危型包括 HPV 16、 18、 31、 33、 35、 39、 45、 51、 52、 53、5
17、6、 58、 59、 66、 68 等，主要引起 CIN 和宫颈癌 8-10。 有文献报道，高危型 HPV 感染与 CIN 及宫颈癌密切相关，低危型 HPV 感染见于尖锐湿疣病变中； HPV 多重感染可能与宫颈疾病的病变程度无关 6。本研究结果显示，宫颈尖锐湿疣、 CIN、宫颈尖锐湿疣合并 CIN 和宫颈癌患者高危型 HPV 感染率明显高于低危型，单一型 HPV 感染明显高于多重型感染，提示东莞市厚街镇的大多数宫颈尖锐湿疣患者感染高危型 HPV，并且多数为单一型感染。 本组单一型 HPV 感染患者中，宫颈尖 锐湿疣组 HPV 亚型高危型以 HPV52 感染为主，其次是 HPV66，低危型为HP
18、V11 感染； CIN 组 HPV 亚型高危型以 HPV16 感染为主，其次是 HPV58、 HPV52，无低危型 HPV 感染；尖锐湿疣合并 CIN 组 HPV 亚型高危型以 HPV58 感染为主，其次是HPV16、 HPV52 ，低危型为 HPV11 感染； 13 例宫颈癌均为高危型 HPV 感染，以 HPV16 为主，其次是 HPV31、 HPV33。上述结果提示，不同型别 HPV 亚型的致病性不同，高危型HPV 感染在东莞市厚街镇不同宫颈病变患者中均有较高的检出率，尤其是 HPV16、 HPV52、 HPV58 在宫颈病变患者的感染中均占有较高比例； HPV16 在 CIN 及宫颈癌病
19、变中感染率较高，证明 HPV16 与该地区妇女 CIN 及宫颈癌的发生有关。 本组多重型 HPV 感染患者以 HPV 亚型双重感染为主，与文献报道一致 7， 8，但本组最常见多重感染亚型不是HPV16，而是 HPV52（ 50%, 10/20），其次是 HPV16（ 25%, 5/20）和 HPV18（ 25%, 5/20）。这一结果可能与样本数量偏小有关，也可能与地区人群差异有关 9，还可能是由于HPV52 在东莞市厚街镇的妇女 中感染率较高。 本组宫颈病变（除外宫颈癌）患者的年龄 17 79 岁，平均年龄 33.1 岁；宫颈癌患者年龄 34 54 岁，中位年龄40 岁，平均年龄 43.2
20、岁。分析本组患者的年龄结构，我们发现 HPV 感染人群绝大多数处于性活跃年龄段，宫颈癌患者绝大多数是中青年女性，因此加强生殖健康教育、临床上加强 HPV分型检测的应用以发挥其对 HPV 感染高危人群的提示作用，加强对高危人群的监测、随访，定期复查、早期诊治、积极治疗等，从而降低宫颈癌的发生率及病死率，对提高广大妇女的生活质量有重要意义。 此外，值得注意的是 近年来宫颈尖锐湿疣发病率明显上升，多数患者同时伴发生长在大小阴唇、阴道口、尿道口或阴道壁等处的尖锐湿疣，患者乃至医生往往只注重外阴部明显疣体的治疗，而忽视 HPV 会感染宫颈部引起病变。因此，对于外阴部尖锐湿疣患者，应同时进行宫颈部 HPV
21、 分型检测、阴道镜检及宫颈组织病理活检，发现高危型 HPV 感染的宫颈尖锐湿疣患者一定要进行合理的临床分流监测，尤其是同时合并 CIN 的患者更应该密切观察，及早治疗。 参考文献 1Tao P， Zheng W， Wang Y， et al.Sensitive HPV genotyping based on the flow-through hybridization and gene chipJ. J Biomed Biotechnol， 2012， 2012:938780 2McCormack PL， Joura EA Spotlight on quadrivalent human Pap
22、illomavirus(Types 6,11,16,18) recombinant vaccine( Gardasil?) in the prevention of prem alignant genital lesions， genital cancer， and genital warts in womenJ. Bio Drugs, 2011, 25（ 5） : 339-343 3何倩 ,孙丽萍 . 人乳头瘤病毒与子宫颈病变关系的研究 J. 中国妇幼保健 , 2010, 25（ 14） :1929-1930. 4王贵宇 , 刘春江 . 人乳头瘤病毒感染与子宫颈病变关系的探讨 J. 中华医院
23、感染学杂志 , 2010,11（ 20） :1628-1630. 5Khan MJ, Castle PE, Lorincz AT, et al. The elevated 10-year risk of cervical pre-cancer and cancer in women with human Papillomavirus （ HPV） type 16 or 18 and the possible utility of type-specific HPV testing in clinical practiceJ. Natl Cancer Inst, 2005, 97（ 14） :1072-1079. 6周武，陈占国，陶志华，等 . 不同 HPV 亚型的多重感染和年龄因素与宫颈病变的关系 J. 中国卫生检验杂志 ,
