1、一花一叶1 一叶一世界技能操作题1 家畜生殖器官标本、模型的识别考核:各种家畜的卵巢、子宫的模型和标本的辩认问题: 1)牛的卵巢的形态及在体内的位置如何?答:牛的卵巢呈扁椭圆形,如中等拇指指肚大小,位于骨盆腔内,子宫角尖端外侧 2-3cm。2)牛的子宫有哪些特点? 答:牛的子宫颈发达,有 3-5 个半月瓣皱此嵌含形成皱褶,使管腔京戏得弯曲狭窄。子宫体不发达,一般成年母牛子宫体 8-10cm。子宫角弯曲呈绵羊角状。子宫内膜有 80-120 个子宫肉阜,将来能发育成母体胎盘。3)卵巢有什么功能? 答:卵巢可以产生卵子,分泌雌激素和孕激素。2家畜人工授精器械的洗涤与消毒操作:1)将玻璃器皿、金属器械
2、和胶质器具分别放入侵盆中用清水浸泡 20-30 分钟。要注意轻拿轻放,防止破陨。 2)假阴道内胎浸泡后应事先擦去油质和污垢,然后用 1%-5%的碱水充分刷洗干净。 3)洗刷干净的器皿和器械分别用水龙头流动水,冲洗皿外型,然后再用蒸馏水冲洗 1-2 遍。 4)玻璃器皿洗冲干净后,倒放在风干架上,等其自然干燥后再进行消毒;金属及橡校器械均用干净纱布擦干净。一花一叶2 一叶一世界5)金属器皿可用 25%的酒精棉球擦拭消毒。橡胶制品可用蒸煮方式消毒,玻璃器材用烘干箱鼓风消毒。问题:1 )如果人工授精有关器械消毒不良可引起什么后果?答:如要人工授精有关器械消毒不彻底可使精液受污染,精子活力下降而影响受胎
3、率。另外,器械消毒不良会引起生殖道疾病如子宫内膜炎等。2)酒精灯的火焰分为几种?哪种消毒效果好?答:酒精灯分外焰和内焰两种。外焰温度高,消毒效果好。3)人工授精器械消毒室有什么要求?答:操作室应打扫干净、无灰尘、操作台应进行全面细致的消毒。3精子活力检查操作:1 )把显微镜调整到一定状态备用。2)将精液一小滴制成载玻片或悬滴片,置于显微镜下,观察直线运动的精子比例。3)要求按十级一分制评定准确。问题:1)什么是精子活力? 答:精子活力又称活率,是指在显微镜视野中直线运动的精子占整个精子数的百分比。常用十级一分制表示。一花一叶3 一叶一世界2)温度对精子活力有什么影响?检查精子活力在什么温度下较
4、好?答:在适温下,精子运动正常。当环境温度高于体温状态,精子运动加速,活力下降很快。当温度低于体温状态,精子运动逐渐减速,当温度降至 0-5时,精子几乎处于休眠状态。低于 0则造成精子死亡,活力丧失。在温度下降过程中,精液由体温状态急剧降至 10以下,也会使大部分精子出现冷休克而丧失活力。3)用平板压片法和悬滴法检查精子活力时,有哪些要求?答:平板压片检查精子活力,要注意推动玻片,多看几个视野,取平均值。悬滴片要多看几层液面,取活力平均值。4精子密度计数操作:1)在显微镜的低倍镜下找到计算板的方格、然后调至高倍,找到某一个中方格,盖上盖玻片。2 )稀释精液,先用白细胞吸管吸取马鲜精 0.5-1
5、.0 处,然后吸取 3%的氯 NaCL 液至刻度 11,对精液进行 10 或 20 倍稀释。稀释中无论吸取精液还是 NaCL 液,管内液面只能缓缓上升,不能下降。吸取氯化钠后,用手指堵住吸管的两端,振荡几次,弃去管内精液 2-3 滴。3 )镜检:把稀释后的精液在盖玻片与计算室之间滴一小滴,使精液自然充入,推动玻片,找到计算板上某一角的中方格,检查精子数目。一般检查 5 个中方格内的精子数,即四角和中央的一个中方格。4)计算:检查完 5 个中方格的精子数以后,按下面公式计算:1ml 原精液的精子数 =5 个中方格的精子数5101000稀释倍数。一花一叶4 一叶一世界本实验要求做两次,如果两次结果
6、接近。取其平均值。如果两次结果差别较大,再做第三次,其结果与前两次中哪一次的结果相近,即与该次精子密度取平均值,做为本次检查的最后结果。参考数据:马原精液精子的密度约为 1-3 亿/ml。5)器械的洗涤:显微镜恢复原始状态、装箱。吸管、计算板等洗涤。擦净。问题:1)血细胞计数法检查精子密度一般在什么时候进行?生产单位是否每天都要检查?答:一般在采精后进行。定期(每月一次)测定公畜的精液品质,做为评定公畜种用价值的参考依据。2)为防止精子重复和漏掉,检查时要采取什么技术措施?答:为防止精子重复和漏掉,对于头部压线的精子一般按“上计下不计、左计右不计”的方法。3)稀释精液为什么使用 3%的 NAC
7、L?答:3%NACL 属高渗溶液,目的是杀死精子,便于数目的观察。5葡萄糖 卵黄稀释液的配制操作:1)稀释液配方:葡萄糖 5 克、卵黄 10 毫升、青、链霉素各 10 万单位蒸馏水 100 毫升。2)配制方法:将量好的葡萄糖和蒸馏水溶液混均匀后,过滤、水洗消毒、降温冷却后加入卵黄和抗菌素。问题:1)此稀释液稀释精液能否进行低温保存?为什么?答:能进行低温保存。因为加入了卵黄,即能为精子体外生存提供一定的营养,又能抗冷休克。一花一叶5 一叶一世界2)如果用蒸煮法消毒,水分减少后怎么办?答:蒸煮消毒减少的水份用无菌蒸馏水来补充。3)精液稀释时有哪些操作要点?答:要求室温 18-25,把精液和稀释液
8、都调整到 30,在30的水浴中进行稀释。稀释时,把稀释液沿着精液容器壁慢慢加入精液中,边加入边搅拌。如需高倍稀释,应先做 3-5 倍的低倍稀释。然后再高倍,以防稀释打击。6伪阴道的安装与调试操作:1)安装:将内胎套在外壳上(内卷法、外翻法),使其松紧适度,再用胶圈固定。2 )消毒:用长柄钳子夹酒精棉球由里向外对内胎进行擦拭消毒,等酒精挥发后用稀释液或生理盐水冲洗一遍。3)灌水:由注水孔灌入 50左右的温水,水量为外壳与内胎容积的2/3。4)涂抹润滑剂:用玻璃棒蘸取润滑剂(液体石蜡)由入口处向内涂抹,约涂外壳长度的 1/2-2/3 为宜。5)测温:用水温计插入伪阴道内腔测温,温度随家畜种类而异,
9、一般在 38-40。6 )调压:从调节钮吹入适量气体,使腔内有一定压力。压力大小应根据公畜的种类和个体而定。问题:1 )伪阴道调拭以后,应具有哪几个条件?答:应具备适宜的温度、压力和润滑度。2)一般情况下猪、牛的采精量是多少?一花一叶6 一叶一世界答:牛一次采精为 5-10ml;猪 100-300ml。3)简述牛伪阴道法采精的技术要点。答:牛的射精较快,采精动作要敏捷。先把公畜保定好,术者站在公牛的右侧,当公牛爬跨后,迅速用左手将阴茎导入伪阴道内,当公牛耸身向前一冲,即为射精。7精液的低温保存操作:1 )稀释精液。2 )把稀释后的精液分装到小试管或玻璃瓶中,盖好封严。包以数层脱脂棉或纱布,最外
10、层装上防水套扎紧,放到冰箱的低温室(4 )。如果没有冰箱,可在广口保温瓶内加 7 成满的冰块,把包装好的精液放到上面即可,盖好盖,定期添加冷源。问题:1 )低温保存的稀释液中为什么要加入卵黄?答:低温保存的精液要经过一个降温过程,如果降温速度较快,就可能造成部分精子出现冷休克,使精子失去活力。加入卵黄后,卵磷脂充入精了内部,使精子得到保护,故可防止冷休克的产生。但也要注意缓慢降温,否则仍会有冷休克现象发生。2)哪些家畜的精液可以进行低温保存?低温保存的精液精子活力应达到多少? 答:牛、羊、马的精液都可以进行低温保存。猪的精液由于保存效果不好,故生产中很少采用。 低温保存的精液精子活力应在 0.
11、5 以上方能使用。一花一叶7 一叶一世界3)牛细管冻精的制作程序如何? 答:牛细管冻精的制作程序为采精精液处理 降温平衡分装冻结解冻及活力观察。4)在运输精液时,如果没有冰源应采取什么方法?答:应采用化学致冷法。在保温瓶中加入 7-8 成满的冷水,加入尿素或氯化铵等致冷,可使水温达到 2-4。每隔 3-4 小时加入一次即可保证温度维持在 5以下。8冷冻精液细管的解冻及精子活力观察操作:1)准备好显微镜、调整到待作状态。把盖玻片、载玻片擦净,烧杯中装满温水,水温在 38-40。2)打开液氮罐塞,把金属镊子放在罐口预冷。提起挂筒,保持在罐的颈基以下,用镊子夹取冻精。要求每次夹取的时间不能超过 5
12、秒。夹出细管冻精后,把活塞端朝下放入烧杯中并迅速搅动,25-35 秒即可。3)活力观察:用细管镊子剪开细管冻精的封闭端,取一小滴冻精于载玻片上,盖上盖玻片,放在镜下观察活力。活力在 0.3 以上可用。要求方法正确、估计准确。问题:1)为保证冻精的成功、其稀释中必加的两种成份是什么?比例如何? 答:必须加卵黄和甘油。在降温中卵黄可防止精子出现冷休克,其比例通常为 20%。甘油是抗冻剂,是冷冻精液冷冻成功的关键,其比例通常为 7%-14%。2)液氮有哪些特性,怎样防止液氮的伤害?一花一叶8 一叶一世界答:A、低温性:要防止冻伤。液氮喷溅皮肤上可用水冲洗,不要揉搓。B、膨胀性:常温下液氮极易挥发变成
13、气体,膨胀多数达680 倍,要防止液氮罐倒地或剧烈碰撞。C、窒息性:液氮挥发后使空气中氧气的浓度降低,故操作室或冻精贮藏室要注意通风。9母牛的发情鉴定 操作:1)外部观察:观察母牛是否有发情的外部表现如哞叫、兴奋不安;外阴是否肿胀、有无粘液流出及粘液的量和状态。2)阴道检查:用阴道开放器打开母牛阴道,借手电筒观察阴道粘膜的颜色和子宫颈口的开张情况。 3)直肠检查:术者经准备后,一手伸入母牛直肠内,寻找卵巢,触摸是否有卵泡发育并判定发育的阶段。问题:1 )母牛发情盛期有哪些外部表现?答:母牛发情盛期精神高度兴奋、大声哞叫、食欲明显减退。在牛群中可见接受其它母牛的爬跨。外阴明显肿胀,有时可见有大量
14、粘液流出。2)牛的卵泡发育分为几个时期?哪期可以配种?答:牛的卵泡发育可分为四个时期,即出现期、发育期、成熟期和排卵期。第二期可进行输精。3)牛发情后什么时间排卵?答:牛发情后 30-35h 即发情结束后 8-12h 可引起排卵。10母牛的直肠把握法输精一花一叶9 一叶一世界操作:1)母牛牵入保定栏内保定,术者指甲剪短磨光,手臂清洗消毒。首先用清水冲洗母牛外阴部,再用 75%的酒精棉球消毒,尾巴拉向一侧。2 )解冻一支细管冻精,检查活力应在 0.3 以上,装入输精枪。3)用直肠把握法输精:左手抻入母牛直肠内,把屋住子宫颈,右手握输精枪,先斜上方插入阴道内,然后平直达子宫颈口,两手协同把输精枪导入到子宫颈的 3-5 皱褚或子宫体内,慢慢注入精液。问题: 1)牛的输精时间如何确定? 答:母牛发情后 12-20h进行第一次输精,隔 8-12h 进行第二次输精。2)牛的妊娠期是多少? 答:平均 282 天。范围是 260-300 天。3)牛输精的另一种方法是什么?有哪些特点?答:另一种方法是阴道开张器输精法。这种方法受胎率低,输精操作不方便,对母牛刺激较大,虽较易掌握,但生产中也很少用。