1、Tris 是什么？有什么作用？Tris-HCl，Tris-EDTA 如何配制？Tris：三羟甲基氨基甲烷三羟甲基氨基甲烷（Tris(hydroxymethyl)aminomethane，一般简称为 Tris）是一种有机化合物，其分子式为(HOCH2)3CNH2。Tris 被广泛应用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备。例如，在生物化学实验中常用的 TAE 和 TBE 缓冲液（用于核酸的溶解）都需要用到 Tris。由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应Tris 为弱碱，在室温（25下，它的 pKa 为 8.1；根据缓冲理论，Tris 缓冲液的有效缓冲范围在 pH7.0 到 9.2 之间。T
2、ris 碱的水溶液 pH 在 10.5 左右，一般加入盐酸以调节 pH 值至所需值，即可获得该 pH值的缓冲液。但同时应注意温度对于 Tris 的 pKa 的影响。由于 Tris 缓冲液为弱碱性溶液，DNA 在这样的溶液中会被去质子化，从而提高其溶解性。人们常常在 Tris 盐酸缓冲液中加入 EDTA 制成“TE 缓冲液”，TE 缓冲液被用于 DNA的稳定和储存。如果将调节 pH 值的酸溶液换成乙酸，则获得“TAE 缓冲液”（Tris/Acetate/EDTA） ，而换成硼酸则获得“TBE 缓冲液”（Tris/Borate/EDTA） 。这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。用途：有机合成中间体
3、。在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系，稳定电泳过程中的 PH值。在凝胶中也起到稳定 PH 的作用，只不过是 Tris-HCl 缓冲体系。Tris 缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂，还有许多重要用途。Tris 被用于不同pH 条件下的蛋白质晶体生长。Tris 缓冲液的低离子强度特点可用于线虫（ C. elegans 核纤层蛋白 lamin）的中间纤维的形成。Tris 也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外，Tris 还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris 也被用作滴定标准物。1 M Tris-HCl (pH7.4，7.6 ，8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配
4、制量 1L配制方法：1.称量 121.1 g Tris 置于 l L 烧杯中。2.加入约 800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。3.按下表加入浓 HCl 量调节所需要的 pH 值。pH 值 浓 HCl7.4 约 70 ml7.6 约 60 ml8.0 约 42ml4.将溶液定容至 1 L。5.高温高压灭菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定 pH 值，因为 Tris 溶液的 pH 值随温度的变化差异很大，温度每升高 1，溶液的 pH 值大约降低 0.03 个单位。1.5 M Tris-HCl (pH8.8) 组份浓度 1.5 MTris-HCl配制量 1 L配制方法 1.称量 18
5、1.7 g Tris 置于 1 L 烧杯中。2.加入约 800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。3.用浓 HCl 调节 pH 值至 8.8。4.将溶液定容至 1 L。5.高温高压灭菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定 pH 值，因为 Tris 溶液的 pH 值随温度的变化差异很大，温度每升高 1，溶液的 pH 值大约降低 0.03 个单位。TE 即 Tris-EDTA buffer（10mM Tris，1mM EDTA，pH7.4 pH7.6 pH8.0） 。常用分子生物学试剂，用于 DNA 的溶解等。配制 1 0TE Buffer (pH7.4, 7.6，8.0) 组份浓度： 100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA配制量： 1 L配制方法： 1. 量取下列溶液，置于 l L 烧杯中。1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4， 7.6，8.0) 100 ml500 mM EDTA(pH8.0) 20 ml2.向烧杯中加入约 800 ml 的去离子水，均匀混合。 3.将溶液定容至 1 L 后，高温高压灭菌。4.室温保存。
