微生物-培养方法.ppt

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选修一 专题2,微生物的培养与应用,微生物的种类,非细胞:病毒; 原核细胞:细菌、蓝藻、放线菌、支原体等。 真核细胞:真菌、原生生物、藻类等。 细菌:大肠杆菌、乳酸菌等 真菌:酵母菌、霉菌; 原生生物:草履虫、变形虫等。,微生物的特点,体积小,面积大 吸收多,转化快 生长旺,繁殖快; 适应强,易变异; 分布广,种类多。,微生物的营养,培养基:碳源、氮源、水、无机盐等。 适宜的环境条件:温度、pH、氧气等。 自养型:无机碳源;异养型:有机碳源。,细菌,(1)结构:单细胞的原核生物,有球形,杆形,螺旋形。   基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、拟核。   特殊结构:荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞。    (3)繁殖: 二分裂。,菌落,菌落: 单个细菌用肉眼是看不见的,当单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,便会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群落。   菌落是菌种鉴定的重要依据。不同种类的细菌菌落的大小,形状光泽度颜色硬度透明度都不同。,培养基的种类及应用,按物理状态不同划分,按化学组成不同划分:合成培养基/天然培养基,按用途不同划分,鉴别培养基,,,选择培养基,无菌技术,消毒:不能杀死芽孢和孢子。 煮沸、紫外线、化学药剂 灭菌:能杀死芽孢和孢子。 高压蒸汽灭菌、灼烧、干热、过滤。,,配制培养基,包器材,灭菌,菌种扩增,倒平板,接种,培养,,,,,,,观察记录,,实验操作——微生物的培养,配制培养基,LB培养基: 蛋白胨: 10g 酵母粉: 5g NaCl: 10g 琼脂: 20g 将上述物质溶解后, 用蒸馏水定容至1000ml, 分装后及时灭菌。,包器材,灭 菌,高压蒸汽灭菌 : 通过加热使菌体内蛋白质凝固变性,从而达到杀菌目的。 条件:压力100 kPa 温度121 ℃ 时间15-30 min,菌种扩增,摇床震荡培养12h(于LB液体培养基中),本图来自十一学校,实验用具,LB固体培养基 大肠杆菌菌液(LB液体培养基) 培养皿 接种环 酒精棉 酒精灯 镊子、火柴、记号笔,接种前准备,用肥皂洗手并使用酒精消毒。 顺序: 点燃酒精灯→酒精棉擦拭双手→酒精棉擦拭桌面,倒平板,接种、划线,灼烧接种环→ 取菌液→ 划线分离→,,烧至暗红,接种、划线,灼烧接种环→ 取菌液→ 划线分离→,,菌液膜,接种、划线,灼烧接种环→ 取菌液→ 划线分离→,接种、划线,,①,③,②,划线分离,为什么通过划线分离可得到单菌落?,倒置后做好标记,写在培养皿侧面,划线分离,我们的实验结果,培养,为什么要倒置培养?,恒温37℃培养,配制菌悬液,1个99ml无菌水 2个9ml无菌水,得10-2, 10-3, 10-4的菌悬液,1g土壤,稀释菌悬液 (10-4),,高浓度→低浓度,换枪头,接种,取200ul菌悬液(10-4),涂布分离,低浓度→高浓度,可不用换枪头,涂布分离,涂布前后三角刮刀需要灼烧吗?,37℃倒置培养,按浓度捆成一摞,恒温37℃培养,10-4 、 10-3,、 10-2,常见接种方法,平板划线法: 主要用于分离、纯化培养 稀释涂布平扳法: 主要用于分离菌种并计数,
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