资源描述
【实 验】,色素的提取和分离实验,一、实验目的,进行绿叶中色素的提取和分离
探究绿叶中含有色素种类数目和颜色
培养合作和严谨的科学精神,色素的提取和分离实验,二、实验原理,提取：叶绿体色素易溶于无水乙醇（酒精、汽油、苯、石油醚等）等有机溶剂中，可以用无水乙醇提取绿叶中的叶绿体色素。
分离：纸层析法
不同的叶绿体色素随层析液在滤纸上扩散速度不同。不同的色素会在扩散过程中分离开来，形成条带。
（色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散速度快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散速度慢，因而可用层析液将不同的色素分离。）,色素的提取和分离实验,三、实验材料,【实验材料】：新鲜菠菜绿叶
【实验药品】：层析液（汽油：石油醚：丙酮：苯=20:2：2:1），无水乙 醇，石英砂，碳酸钙
【实验用具】：研钵，药匙，纱布，小烧杯，干燥滤纸， 剪刀，试管，毛细吸管，棉塞,色素的提取和分离实验,提取叶绿体色素,取材：取新鲜菠菜叶5g，撕去叶脉，尽量剪碎，放入研钵。
研磨：向研钵中放入少量石英砂和碳酸钙（量约为药匙的1/3），加入6ml无水乙醇，充分、迅速地研磨至匀浆状态。
过滤：在小烧杯上放上4层纱布，将研磨液倒入小烧杯，过
滤制备得到滤液。
【注】
加石英砂是为了使研磨充分
加碳酸钙是为了防止叶绿体色素被破坏
加入CaCO3和石英砂的量均很少，无水乙醇的量不应太少,四、实验步骤,色素的提取和分离实验,制备滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽的滤纸条，将其一端剪去两个角，并在距这一端1cm处用铅笔划线。
画滤液细线：用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀画出细线（细而齐）。待滤液干后，重复画线3-4次。
【注】
画滤液线时尽量画直、画细、画浓
每次画完，要等滤液干时再重复画，以防滤液扩散开使滤液线过宽，影响结果,分离叶绿体色素,四、实验步骤,色素的提取和分离实验,固定装置：将3mL层析液倒入试管中，将画好线的滤纸条插入层析液中，用棉塞塞紧试管口。
观察现象：10min后，将滤纸条取出，风干。观察色素带及其颜色，作好记录。
【注】
放滤液条时，要避免滤液细线浸没到层析液。不要让滤纸条贴在层析管壁上。
层析液中一些成分易挥发，要避免开放在空气中。,分离叶绿体色素,四、实验步骤,,1、选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的菠菜叶片。
2、研磨要快，收集的滤液要用棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。（无水乙醇和层析液都易挥发、易燃且有一定毒性）
3、每次点样前要把烧杯中的滤液摇匀。
4、尽量避免手上的杂质沾到滤纸条上。
5、实验时保持通风，安全操作
6、实验注重团队合作，组员们共同完成实验。,五、注意事项,色素的提取和分离实验,实验结果探究,六、实验结果,,你的结果？,实验结果探究,七、实验总结,,实验结果探究,叶绿体中的色素能够在滤纸上彼此分离的原因是（ ）
A．色素提取液中色素已经分层
B．阳光的照射使不同色素彼此分开
C．乙醇有使色素溶解并彼此分离的特性
D．各种色素在滤纸上随层析液扩散的速度不同
加SiO2、加CaCO3的目的分别是 ：
研磨充分；保护叶绿素。
为什么滤液细线越细、越齐越好？
防止色素带之间部分重叠。
为什么层析液不能没及滤纸条的滤液细线？
防止色素溶解在层析液中，影响实验结果。,八、课堂反馈,,D,聚焦高考,（2012上海理综17）图6表示叶绿体色素提取分离实验中纸层析的结果，据图判断用作实验材料的叶片颜色为（ ）
A．红色 B．黄色
C．绿色 D．紫色,B,聚焦高考,（2011江苏生物4）某研究组获得了水稻的叶黄素缺失突变体。将其叶片进行了红光照射光吸收测定和色素层析条带分析（从上至下），与正常叶片相比，实验结果是（ ）
A.光吸收差异显著，色素带缺第2条
B.光吸收差异不显著，色素带缺第2条
C.光吸收差异显著，色素带缺第3条
D.光吸收差异不显著，色素带缺第3条,B,,（1）二氧化硅（SiO2） 使研磨更加充分
（2）8.0 以1.0作为pH梯度进行实验
（3） pH小于6.0 叶绿素会由于酸性pH值而被破坏
（4）纸层析法
主要步骤：
制备滤纸条
画色素液细线
层析分离色素
观察色素带,你做对了吗？,
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