小鼠骨髓染色体制片技术.ppt

《遗 传 学》校 级 精 品 课 程湖州师范学院 生命科学学院生物系《遗 传 学》校 级 精 品 课 程《遗 传 学》校 级 精 品 课 程一、实验目的1、了解动物细胞染色体制片的原理；2、学习小鼠骨髓细胞染色体的制片方法；3、观察小鼠细胞染色体的数目和形态。《遗 传 学》校 级 精 品 课 程《遗 传 学》校 级 精 品 课 程二、实验原理※制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术，优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。※染色体的制备在原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。最常用的途径是从骨髓细胞、血淋巴细胞和组织培养的细胞中制备染色体。 《遗 传 学》校 级 精 品 课 程《遗 传 学》校 级 精 品 课 程※小型动物的染色体制片最好最有效的材料就是骨髓组织。※骨髓细胞中，有丝分裂指数相当高，因此可以直接得到中期细胞而不必象淋巴细胞或其它组织 体 培养。 ※ 型动物 常 用 骨、 或 骨 术骨髓，小型动物 用 术 骨以得骨髓细胞。二、实验原理《遗 传 学》校 级 精 品 课 程《遗 传 学》校 级 精 品 课 程、实验材料小 鼠 2 、实验 ¡¢备£⁄※ ¥ƒ、显§currency1、'“«‹›、fifl、 –、解†–、‡·、 ¶¡•‚„、”» ¥…、 …、‰ 片和¿ 片。※ 2` ´ˆ«˜¯，2´˘˙¨ ˚液， ¸ ˝˛ˇ— ˇ， ， ¨，1—1 ˝˛ˇ— ¨ 液 ， Æ˝ ª原液《遗 传 学》校 级 精 品 课 程《遗 传 学》校 级 精 品 课 程、实验 1、前处理为提高有丝分裂的指数，增多细胞中期分裂相。提前3-4小时向小鼠腹腔内注射0.02—0.04%秋水仙碱溶液。每10g体重注入0.1ml《遗 传 学》校 级 精 品 课 程《遗 传 学》校 级 精 品 课 程2、取股骨：带手套，拖颈椎法处死小鼠，剖出股骨。、实验 《遗 传 学》校 级 精 品 课 程《遗 传 学》校 级 精 品 课 程、实验 2、取股骨：剖出股骨，剔净股骨上的肌肉。《遗 传 学》校 级 精 品 课 程《遗 传 学》校 级 精 品 课 程、实验 2、取股骨：剖出股骨，剔净股骨上的肌肉，用2％柠檬酸钠溶液洗净。《遗 传 学》校 级 精 品 课 程《遗 传 学》校 级 精 品 课 程、实验 3、 骨髓细胞 Ł 骨ØŒ，用 ¶¡ 2º˘˙¨ ˚液1˝ˇ， ‚„ 骨髓 ， ¶， 骨髓细胞 ¥… 骨髓细胞液 æ 直ı骨 。