1、实验一 无蛋白血滤液的制备（无蛋白血滤液制备的基本原理是以蛋白质沉淀剂沉淀蛋白，用过滤法或离心法除去沉淀的蛋白。常用的方法有三氯醋酸法、氢氧化锌法、黑灯改良法及福林- 吴宪法（钨酸法） ，本实验采用最后一种方法，即钨酸法制备无蛋白滤液。实验原理： 钨酸钠与硫酸混合，生成钨酸。血液中的蛋白质在 pH 小于其等电点的溶液中时，可被钨酸沉淀。沉淀液过滤或离心，上清液即为无色、透明、pH 约为 6 的无蛋白血滤液。可供非蛋白氮、血糖、氨基酸、尿素、尿酸及氯化物等项目测定使用。实验试剂：10% 钨酸钠溶液，1/3 mol/L 硫酸溶液实验对象：新鲜鸡血操作步骤：取 50ml 锥形瓶或大试管 1 支，吸取
2、充分混匀的抗凝血 1 份（1ml） ，擦 1净管外血液，缓慢放入锥形瓶或试管底部准确用 10ml 移液管加入 7ml 蒸馏水，随加随摇，但也不能过于剧烈 2再加入 1ml 硫酸溶液，随加随摇 3放置约 5min 后，若振摇亦不再发生泡沫，说明蛋白质已完全变性沉淀， 4用滤纸过滤后即得完全无色的无蛋白血滤液实验过程（附图）：2.加清水混匀1.取 样这是未加入蒸馏水的抗凝血，可观察到血色鲜艳明亮，没有凝血块或杂质蒸馏水随加随摇于血液中后可以观察到无任何变化，只是血液颜色稍稍变浅，血液粘稠度有所下降3.加入硫酸溶液加入硫酸溶液并混匀后，可以观察到血液颜色变得暗淡，但并没有出现凝聚等反应现象，这一步主要是为钨酸（钠）与血液中的蛋白反应提供酸性环境。4.加入钨酸钠溶液加入钨酸钠溶液并且混匀后，可观察到血液颜色变为棕褐色，且变得浑浊有气泡；容器壁上有痕渍，这是因为血液中的蛋白与钨酸作用而发生沉淀的结果5.过滤收集清液附录：以上实验过程（图片）是第二次操作的结果，第一次操作时因为加入试剂时过快，没有做到随加随摇，故有很多气泡，效果不是很理想，遂又操作了一次。现附上第一次操作的图片以作对比。滤过后可看到离心管中的血清液无色澄澈，故实验操作成功2014.10.17（兴农楼 208）
