1、血库工作人员在职训练(高级班),台北荣总输血医学科 陈滢如医检师2012年07月08日/2012年07月22日,多重抗体与高频率抗原对应抗体的鉴定技巧,您已经熟悉,MP法、传统三相法 吸收冲出试验不规则抗体鉴定Cross-out特异性分析Selected Cells,通常从其他非常规使用的panel或Screening cells挑选，用以确认或排除某个抗体的特异性2nd Panel过期Panels,例：病人有anti-c+?,若各有两个以上的血球可供确认更佳记得考虑剂量效应&老旧血球的影响,课程大纲,多重抗体的鉴定技巧仔细判读反应价数，选择适当的鉴定方法参考病人的RBC抗原分型使用酵素/DT
2、T处理之血球辅助鉴定吸收及冲出试验中和试验及其他方法鉴定高频率抗原对应抗体（Ab to high-prevalence Ag）,PART 1.(多重)抗体的鉴定技巧,啊全部都有反應.,抗体鉴定难题的初步分析,疑为抗high-incidence antigen的异体抗体,疑为多重异体抗体,可能为自体抗体加上异体抗体,疑为自体抗体(但仍须仔细排除异体抗体的可能),(少数案例可见呈现特异性的自体抗体),多重抗体鉴定 Skill 1：仔细判读反应价数选择适当的鉴定方法（传统三相法通常优于MP法）可针对每个phase，以排除法仔细分析特异性可获知该抗体之血清学特性， 辅助特异性鉴定,抗体鉴定方法的选择,
3、传统三相法通常优于MP法可获知抗体之血清学特性（温型or冷型）， 辅助特异性鉴定可针对每个phase，以排除法仔细分析特异性省略室温期的三相法或CAT可降低冷凝集素与冷型抗体的干扰,反应价数与反应期的不一致，通常表示有多重抗体但反应价数与反应期一致，未必表示只有一种抗体单一抗体，但呈现反应价数不一致的状况：剂量效应（dosage effect）：Rh, Duffy, MN与Kidd等。 部分弱反应抗体可能只与抗原同合子血球作用， 于Rule-out时须注意。有的抗原于不同个体之血球表现强度差异较大，例如I, P1, Lea , Leb与Sda等，于分析特异性或Rule-out时须注意。,反应价
4、数提供的信息,常见异体抗体之血清学特性,#摘自AABB Technical Manual 14th edition. Page288, 317.,例：弱anti-M(仅与呈双剂量M抗原的血球反应),例：弱anti-P1(与少数P1阳性血球不反应),注：反应阳性的都是P1(+)P1(+)的有些是阴性,多重抗体鉴定 Skill 2：参考病人的RBC抗原分型若病人之某抗原为阳性，则可排除其对应抗体的可能,国人的RBC次要抗原频率,*国人抗原频率摘自93年血库在职人员基础班讲义，孙建峰主任,RBC抗原分型的难题,病人近日输过血找出输血前的检体测试分离病人自身血球测试基因分型IgG或IgM抗体附着的血球
5、IgM附着：须移除自发性凝集IgG附着：多不影响分型，除非须用抗球蛋白试剂,若输注单位不多，仔细观察mix-field反应的有无，仍可得到可信的分型结果,简易离心法(Simple Centrifugation)分离自体红血球,血球以saline洗三次，最后一次离心1000g 5-15分钟，于不破坏buffy coat层下尽量移除上清液。充分混合均匀后，填满十根毛细管(不含抗凝剂) ，一端封口。 注意！充填每支毛细管前均须再次充份混合！离心15分钟。割下十支毛细管顶端5mm，集中于试管，加入saline 。以滴管将红血球全冲出后，移至另一乾净试管。洗三次后泡成2-5%红血球悬浮液,（参考资料：A
6、ABB Technical Manual 15th edition, Method 2.15）,新生自体红血球比重较低，可利用离心法将之与输入的血球分离,注1: 至少须输血后3天的检体才有较佳的分离效果注2: 此法不适用于reticulocytes生成数较低的病人，亦不适用于有Hemoglobin S或spherocytic disorders 病人注3: 有些抗原在reticulocytes的表现比在老旧的血球为弱，测E, e, c, Fya, Jka与Ge抗原要特别留意,Anemia: Hypoproliferative (Low Reticulocyte Count),Nutrient
7、Deficiency Iron deficiency Vitamin B12 deficiency Folate deficiency OtherAnemia of Chronic Disease Chronic infection Chronic inflammatory diseases Malignancy Chronic renal disease Chronic liver disease Endocrine dysfunction,Bone Marrow Disorders Hereditary sideroblastic anemias Pure red cell aplasia
8、 Leukemia, acute and chronic Hodgkins disease Non-Hodgkins lymphoma (NHL) Myeloproliferative disorders Myelodysplastic syndromes (MDS).,处理/测试 IgM 附着的血球,因有cold autoagglutinin引起，有的检体甚至在室温有自发性凝集反应。将病人红血球悬浮液置37加热15分钟，再以温的saline洗数次，通常可消除此cold autoagglutinin。若仍无法消除，可以DTT (dithiothreitol)或2-ME (2-mercaptoe
9、thanol)处理，破坏IgM。 但此法处理过的血球主要用于测ABO、Rh与DAT。某些 抗原会被0.01M DTT破坏。,待处理红血球以PBS泡成50%.加入等量0.01 M DTT，于 37C反应15 minutes.以NS洗涤三次后泡成2-5% 悬浮液。,处理/测试 IgG 附着的血球,可能为自体免疫溶血型贫血病人，或有HDFN的新生儿等。亦可能见于近期内曾输入不合血品的病人。大部分的单株抗体试剂（非用抗球蛋白试验法），即使测的是DAT阳性血球，也能得到可信的结果。但某些高蛋白厚度抗血清有可能造成非特异性凝集。若必须使用抗球蛋白试验，可以热或酸或酵素处理血球，使其DAT变为阴性或减弱后测
10、试。 处理后的血球较脆弱易溶血，甚至抗原无预期地被破坏，故操作时要求以已知分型血球平行测试。 注意某些抗原会被酸或酵素破坏。,Gentle Heat Elution : 45加热1015分钟Heat Elution : 56 加热35分钟,Investigation of HDN: ABO and D type, DAT, antibody screening tests.The babys D type was reevaluated by dissociating antibodies from his RBCs utilizing chloroquine diphosphate at a
11、 pH value of 5.1.Blocked D is a rare phenomenon. It results from nonagglutinating or incomplete maternal antibodies that bind extensively to the neonates D antigen sites, thus preventing their interaction with saline agglutinating antibody resulting in false D- type. It should be suspected in the se
12、tting of HDN, when the infant RBCs demonstrate a strongly positive DAT and subsequent eluate studies reveal anti-D. The correct neonates typing is essential for appropriate care and transfusion management.,B- :有强Anti-D与弱anti-C,Transfusion 2008 Aug;48(8),特殊案例,Gamma EGA Kit,DAT(+)红血球以saline洗三次，泡成3-5%悬
13、浮液。取一试管，滴入30滴3-5%红血球，离心1分钟，尽量移除上清液。另取一试管，加入4滴EGA Solution 1与16滴EGA Solution 2，配制成EDTA glycine-acid solution。立即将此EDTA glycine-acid solution滴入前述红血球，混合均匀，设置计时器，于室温反应不超过2分钟。 若处理过的血球明显变色或形成团块，需缩短处理时间。立即加4滴EGA Solution 3，混合均匀，离心30秒 。去除上清液，以saline洗三次后泡成3-5%红血球悬浮液，立即检测DAT。若DAT阴性则可继续以IAT法检测抗原。 若DAT仍为阳性，可试着再处
14、理一次,利用EDTA glycine-acid 使红血球上的IgG脱离，以检测抗原分型,注1: 处理过的血球其Kell血型、 Era与Bg抗原被破坏。注2: 此法亦可应用于处理DAT(-)血球，破坏Kell血型抗原，辅助抗体鉴定。,5 min,多重抗体鉴定 Skill 3：使用酵素处理之血球辅助鉴定比较病人血清与酵素处理/未处理血球的反应消长同理，亦可使用DTT处理之血球辅助鉴定,Enzymes (Proteolytic),血库实验常用ficin、papain或bromelin移除RBC表面sialic acid，故破坏某些RBC抗原，但也让某些抗原表现增强.辅助多重抗体鉴定破坏：M, N,
15、S, s, Duffy增强：Rh, Kidd, Lewis, I, and P1 (ABO)其他应用：辅助检测弱反应抗体（增强抗原抗体反应）处理RBCs，增强吸收实验的效能与DTT协同移除RBC上自体抗体(W.A.R.M)将RBC上附着的C3b/C4b转换为C3d/C4d处理RBCs，使某血抗原反应增强（例：ABO抗原）,例：病人血清只与筛检细胞SI与panel的3号细胞有反应，怀疑有Anti-E。,001+w00000000 0,002+002+00002+,Papain,MP,AC,酵素处理细胞组应用(1)辅助检测弱反应抗体,1+3+2+3+2+1+3+1+3+2+3+ ,AGT,AC,其
16、他抗原分型：R2R2,Jk(a+b+),酵素处理细胞组应用(2)区分多重抗体,例：病人已知有Anti-Fyb ，但与所有Fyb(-)血球都有反应，是否有其他抗体?特异性?,再找Fyb(-)e(-)血球来作用，以排除其他抗体,Enzyme Techniques,One-stage Method酵素直接加入血清与血球悬浮液反应Two-stage Method先用酵素处理红血球，洗涤后泡成2-5%悬浮液病人血清再与红血球反应操作注意事项以肉眼判读凝集结果即可，不须用显微镜判读可购买厂制酵素溶液或自行泡制；解冻后的酵素溶液不宜再冷冻。最好加作自体对照（某些人的血浆中含有broad-specificit
17、y 抗体，与所有酵素处理过的血球均有反应）,不适用于MP法,Effects of Enzymes and Chemicals on Antigens,*s variable with ficin/papain,Blood Group Antigens & Antibodies (2007) Page 194,DTT在血库实验的应用,处理IgM 附着的血球，去除自发性凝集去除红血球上的某些抗原，辅助抗体特异性鉴别破坏血清中IgM抗体，分清某种特异性抗体属IgM或IgG,待測血球與對照血球以PBS洗滌。各加四份0.2 M DTT，於 37C反應3045 min以PBS洗滌四次後泡成2-5% 懸浮液
18、。,0.01 M,0. 2 M,0.01 M,取2支試管，各加入1mL待測血清或血漿“Control”管加入1mL pH7.3 PBS； “Test”管加入1mL 0.01M DTT， 於37C反應3060 mins。,使用DTT试剂区别血清中的IgM与IgG抗体Using Sulfhydryl Reagents to Distinguish IgM From IgG Antibodies,取2支试管，各加入1mL待测血清或血浆取其一标示“Control管，加入1mL pH7.3 PBS另一管标示“Test ，加入1mL 0.01M DTT混合均匀，于 37C反应3060 minutes.以两
19、管血清平行测试，记录反应价数,（参考资料：AABB Technical Manual 16th edition, Method 3-8）,DTT会破坏Kell抗原，故若作Kell抗体的调查，需改用其他方法。,DTT处理过久或厚度错误会造成检体呈胶状。胶状血清的蛋白均已被破坏，不能再使用。,補充,Sodium Hypochlorite (CloroxR)破坏S抗原,補充,取待测S+血球以saline洗2次以0.00075% sodium hypochlorite PBS 泡成3%悬浮液。 1份Clorox + 69份 PBS = 0.075% 1份0.075% Clorox + 99份 PBS
20、= 0.00075%于室温反应2分钟以saline洗3次。,Sodium hypochlorite (NaClO) 把红血球上Ss sialoglycoprotein第29个胺基酸methionine氧化，导至S抗原被破坏,注1: Rh抗原表现亦受影响。注2: 未稀释的Clorox含5.25% sodium hypochlorite 。,（参考资料：Immunohematology Methods,1st . American Red Cross,1993.）,多重抗体鉴定 Skill 4：吸收与冲出试验将12种抗体以吸收法去除，鉴定余下的抗体可再合并冲出法收集被吸收掉的抗体作多重（异体）抗体
21、鉴定。,吸收技术经常用于移除病人血清中的自体抗体,Combined Adsorption-Elution,Ab Identification: anti-S, -Jka,Ab Identification: anti-c, -Fya,anti-c,-Fya, ?,应用：分离单一检体中的多重抗体 证实血球上弱表现抗原的存在 辅助鉴定弱反应抗体,Adsorption Procedure 吸收试验,（参考资料：AABB Technical Manual 15th edition, Method 3.12）,取适量血球，以saline洗涤三次；最后次离心至少5分钟，尽可能移除上清液。（保留少许血球作备
22、用） 以剪成细条的滤纸，可将上清液移除较完全以适量packed RBCs与血清（一般用1:1 ）作用，于适当温度反应3060分钟。期间不时将之混合均匀。离心至少5分钟，将上清液（即吸收后血清）移至乾净试管。 若能于反应温度离心尤佳，可避免抗体解离 血球可保留进行冲出试验。取吸收后血清与用于吸收的血球反应，若无反应则表示吸收完全，若仍有反应则再取packed RBCs，重复吸收步骤。,血球血清的接触面积大吸收效能较佳，至少用13mm以上的试管。通常吸收二次以上较完全，但太多次吸收可能稀释抗体。使用酵素处理的血球可增加某些抗体的吸收效能，但处理过的血球较不宜用于冲出试验。,针对DAT阳性的检体做进
23、步调查WAIHA案例溶血性输血反应新生儿溶血症药物引起溶血性反应厚缩与纯化特定抗体证实弱表现抗原的存在辅助多重抗体的特异性鉴定制备antibody-free的红血球抗原分型自体吸收,冲出技术的应用,通常需并用吸收技术,注意 (1) 某些冲出方法会破坏特定抗原 (2) 若作抗原分型，宜选择适当的血球，同步处理后当对照组。,冲出试验方法选择,IgM or IgG？ 红血球被破坏 or 保持完整？试剂可取得？操作容易？,No single elution method is ideal in all situations !,ELU KITTM PLUS 酸冲出试剂组For Acid Elution
24、 of Antibodies from Intact Red Cells,Wash Solution Concentrate: 以ddH2O稀释10倍爲Working wash solution ，洗去未结合的抗体。Solution I, Acid Elution Solution: 为low pH glycine buffer，含pH指示剂。Solution II, Base Buffering Solution:含TRIS与albumin，可中和冲出液。,Store at 15-30C. Do not freeze.,DAT(+)检体：保存于4C，72小时内测试。,冲出试验的结果分析,与所
25、有试剂血球反应：极有可能为自体抗体(尤其当病人近期内未输过血）与部分试剂血球反应：在HDFN或溶血性输血反应案例，冲出液中往往可测得血清中测不到的不规则抗体与所有试剂血球均无反应：Anti-A或anti-B低频率抗原的对应抗体药物相关的抗体非特异性吸附的球蛋白（例：- globulin level）,新产生的抗体可能需1421天才可在血清中测得,最后次洗涤液：须为阴性！,（参考资料：AABB Technical Manual 15th edition, p456-8）,冲出试验结果分析的其他考量,若希望增加冲出液的反应强度，可选择使用：与enzyme-treated cells反应使用poly
26、ethylene glycol (PEG)加强反应改变fluid-to-cell ratio以厂制设备将eluate再厚缩用low-ionic-strength saline (LISS)或cold wash solution洗涤冲出前的血球由于某些冲出法对特定抗体效果较差，当病人明显有RBCs被破坏的临床徵状，但冲出液却无反应时，改用不同冲出法调查也许有帮助。若serum与eluate与所有细胞均无反应，且病人有接受血管内注射高剂量的penicillin或其他药物治疗，应作drug-related antibodies的考量与实验调查。,（参考资料：AABB Technical Manual
27、 15th edition, p456-8）,多重抗体鉴定 Skill 5：中和试验利用可溶性抗原物质，去除特定抗体的反应 间接证实某种抗体存在 于多重抗体案例，将某种抗 体去除，鉴定余下的抗体,Antigens in Soluble Form,（参考资料：Blood Group Antigens & Antibodies (2007) Page 195）,HTLA,AC,中和试验于多重抗体鉴定的应用,例：怀疑病人有Anti-P1 ，还有其他抗体!?特异性?,参考：抗原分型、历史鉴定纪录、Selected cells反应结果必要时才利用中和法，移除anti-P1，测试剩余的抗体特异性,PART
28、 2.鉴定高频率抗原对应抗体 Investigating Antibodies to High-Prevalence Antigens,抗体鉴定难题的初步分析,疑为抗high-incidence antigen的异体抗体,疑为多重异体抗体,可能为自体抗体加上异体抗体,疑为自体抗体(但仍须仔细排除异体抗体的可能),(少数案例可见呈现特异性的自体抗体),本课程中提及之高频率抗原,Updated August 2008,调查对抗高频率抗原的异体抗体（1）,分清病人抗体为异体抗体自体对照与DAT为阴性若病人近期输过血，自体对照与DAT可呈现mixed-field反应测试病人的ABO血型Anti-H或A
29、-HI常见于A1型或A1B型者孟买型者(例：Oh)产生Anti-H异体抗体测试抗体的反应期（Phase of reactivity）以传统三项法取代MP法测试，可区分抗体为温型或冷型若于室温即有反应，可能为anti-Ena, -Vel, -Sda, -P, -PP1Pk,与抗体筛检及鉴定细胞均有反应、自体对照无反应、与ABO血型相同之血球无反应(非异体抗体！),若用新鲜serum检体，有试管内溶血现象可能为anti-Vel,-P, -PP1Pk ,-Jk3,调查对抗高频率抗原的异体抗体（2）,询问病人之籍贯（人种）某些高频率抗原阴性者，在特定人种中相对较可能出现；可优先列入测试考量Caucas
30、ian： Kpb, Coa, Yta, and LubBlack: Hr0, Hr, U, Fy5, Jsb, Hy, Ata, hrB, and hrSJapanese: Dib, JraMongolian descent/ Mexicans: DibPolynesian/ Filipino: Jk3Swedish: PP1PkMelanesians: GeJewish/ Arab/ Druse: Yta,Selected Rare Phenotypes in Certain Populations (1/2),（参考资料：Blood Group Antigens & Antibodies
31、(2007) /AABB Technical Manual 16th edition）,Selected Rare Phenotypes in Certain Populations (2/2),（参考资料：Blood Group Antigens & Antibodies (2007) /AABB Technical Manual 16th edition）,测试病人的RBC次要抗原分型若病人输过血，需找出输血前的检体，或分离病人自身血球测试（例：简易离心法）；若有基因分型技术亦可利用基本的次要抗原分型D, C, E, c, e: if all (-) Rhnull Anti-Hr0(-Rh
32、17), -Hr(-Rh18) ?.Jka, Jkb : if Jk(a-b-) Anti-Jk3 ?Fya, Fyb : if Fy(a-b-) Anti-Fy3 ?S, s : if S+s- Anti-s ? if S-s- Anti-U ?Dia : if (+) Dib : if (-) Anti- Dib ?(K), k : if K+k- Anti-k ? if K-k- K0 phenotype Anti-Ku (-KEL5)? 或 McLeod phenotype Anti-Kx + -Km (-KEL20)?P1 : if (-) 不能排除为 p phenotype ant
33、i-PP1Pk(-Tja) ?,调查对抗高频率抗原的异体抗体（3）,Kx Antigen (XK1), McLeod Syndrome, and McLeod Phenotype,McLeod syndromeX-linked conditionAcanthocytosis (棘型红血球)Variety of late-onset muscular, neurologic, and psychiatric symptoms.,McLeod phenotypeKell antigens are expressed weakly and Km (KEL20) as well as Kx are a
34、bsent. When transfused, CGD (chronic granulomatous disease,慢性肉芽组织病) patients with McLeod syndrome usually produce anti-Kx plus anti-Km making it almost impossible to find compatible donors. It is recommended, therefore, that transfusion of males with CGD and McLeod syndrome be avoided.,鉴别anti-Kx + a
35、nti-Km (anti-KL)的方法: (其实不太容易) Anti-Kx: 与K0血球反应较强，正常血球反应较弱 Anti-Km: 与正常血球反应，但不与K0及McLeod血球反应用K0血球吸收掉anti-Kx后，鉴定出Anti-Km。另从冲出液鉴定anti-Kx 。,与proteases (例：ficin, papain)处理的血球反应if all (-) anti-Ch? Rg? Inb? -JMH ?.与硫氢还原剂(例：DTT, AET)处理的血球反应if all (-) anti-Kell? anti-LW? -Yta, -JMH ? -Inb?Scianna ; Cromer; K
36、nops; Lutheran; Dombrock; AnWj与cord RBCs反应if all (-) anti-Ch? Rg? AnWj,利用简单的方法排除部分抗体，缩小鉴定范围节省珍贵的稀有血球及特殊抗血清资源,调查对抗高频率抗原的异体抗体（4）,Effects of Enzymes and Chemicals on Antigens,*s variable with ficin/papain#High-Titer, Low-Avidity HTLA antibodies,Usefulness of Cord RBCs,Antigens in Soluble Form,（参考资料：Blo
37、od Group Antigens & Antibodies (2007) Page 195）,HTLA,HTLA Antigens,High Titer Low Avidity (high titer, low antigen density)High titer: 1:64 or greaterLow Avidity: 1+ or less through all titer dilutionsOccur with high frequencyAntibodies are weak and are not clinically significantThe antigens detecte
38、d by antibodies formerly called HTLA are now well characterized and have been assigned to their own Blood Group System.,補充,Investigation of HTLA cases,If you suspect an HTLA Ab you can do Titer patient serum: HTLA antibodies will titer out a long way (1:64) while others will not then you can Chemica
39、l treatment of test RBCsNeutralize patient serum with normal fresh plasma, it will remove HTLA antibody (anti-Ch/anti-Rg).,補充,使用血浆抑制法鉴别anti-Ch与-Rg Using Plasma Inhibition To Distinguish Anti-Ch and -Rg from other Antibodies with Similar Characteristics,将待测病人血清以NS作系列稀释（例如1:21:512）。取试管依序加入2d稀释血清，需准备两组
40、。其中一组各管加入2d pooled plasma（测试组），另一组各管加入6% albumin （对照组） 。混合均匀，于室温反应至少30 min。于各管加入1d 35%测试血球，置37反应1hr。以NS洗四次后，加入anti-IgG离心判读。,（参考资料：AABB Technical Manual 16th edition, Method 3-9）,取至少6个人的血浆混合,若测试组反应完全被抑制，极有可能为anti-Ch或-Rg 。若测试组反应被部分抑制，可能表示还有额外的异体抗体。可制备足量的inhibited血清与panel cells反应分析之。若病人具对抗其他血浆抗原的抗体，也可能
41、呈现被部分抑制的反应。,補充,调查对抗高频率抗原的异体抗体（5）,与库存稀有血球 / 特殊抗血清反应（捐中、马偕、台大） 若仍无法解决，可送至国外谘询实验室（IRL）,Standards for Immunohematology Reference Laboratories, 4th edition,Reference Standard 2R-AMinimum Inventory Resources (摘录),病人除对抗高频率抗原抗体外，是否仍有 其它异体抗体？,调查对抗高频率抗原异体抗体的难题 (1),获得病人的次要抗原分型结果，找寻表现型相似的血球(phenotypically simil
42、ar red cells) ，进行吸收试验。吸收后的血清（不含对抗高频率抗原抗体）再作抗体鉴定即可。,如何区分DAT(+)病人是具有对抗高频率 抗原异体抗体或温型自体抗体？注：输血后检体之DAT阳性； 血清、冲出液和所有细胞反应,调查对抗高频率抗原异体抗体的难题 (2),若病人仅具对抗高频率抗原异体抗体，输血后检体DAT必有mixed-field反应。 弱反应与混合视野型反应不易区分尽可能取得输血前检体，或利用血球分离技术获得自体红血球。 测试自体红血球DAT是否为阴性 若DAT(-) ，与alloantibody的反应相符 将输血后血清与 DAT(-)自体红血球反应 若为阳性 ，与autoa
43、ntibody的反应相符,Antibodies to High-Prevalence Antigens案例探讨,Case1,摘自2012 CAP Survey JE-A,摘自2012 CAP Survey JE-A,Case1 (续),摘自2012 CAP Survey JE-A,Case1 (续),Case 2,Antibody Screening cells 均 (+), Autocontrol (-)Panel cells 均 (+) AHG phase:2+调查性别、年纪、输血史 7岁女童，去年输过1u WB典型对抗高频率抗原的异体抗体反应！以台湾人而言，最可能是哪一种？,Antibo
44、dy Screening/ Identification : all (2+),TVGH 案例：林小妹妹 输血事件簿,Antibody Screening cells 均 (+), Autocontrol (-)Panel cells 均 (+) AHG phase:2+调查性别、年纪、输血史 7岁女童，去年输过1u WB典型对抗高频率抗原的异体抗体反应！以台湾人而言，最可能是哪一种？ 测Jka与Jkb抗原 Jk(a-b-)询问何时需输血？ 明日进行小脑手术；不定会用血，顶多1u。父母及唯一的姐姐前来采检 均不为Jk(a-b-)自体储血？ No! 病人太小延至放寒假时开刀术前个月通知血库，向献
45、血中心订1u WB 手术前天备血，检体竟与两袋Jk(a-b-)血品中的袋不合！确认两袋均为Jk(a-b-) ！测试病人及血袋之其他次要抗原,Anti-Jk3?,TVGH 案例：林小妹妹 输血事件簿,Case 2,Whats the additional Ab?,Major Crossmatching test MP(+), AHG phase:2+RBC phenotyping (Pt & two RBCs units),怀疑为anti-Jk3 + anti-S?,血清只剩三滴,TVGH 案例：林小妹妹 输血事件簿,Whats the additional Ab?,Combined Adsor
46、ption-Elution,Ab Identification,TVGH 案例：林小妹妹 输血事件簿,Antibody Screening cells 均 (+), Autocontrol (-)Panel cells 均 (+) AHG phase:1+调查性别、年纪、输血史典型对抗高频率抗原的异体抗体反应！次要抗原分型：D, C, E, c, e, M, N, S, s, P1, K, k, Fya, Fyb , Jka, Jkb, Dia+ + 0 0 + + + 0 + 0 NT + + 0 0 + + 与Enzyme treated RBCs反应 Pos与W.A.R.M (ficin
47、 + DTT) treated RBCs反应 Pos与3个 cord RBCs反应 Pos请其兄弟姐妹前来采检。,與Dib(-)血球亦有反應:1+(感謝馬偕血庫提供),Case 3,TVGH 案例：长期洗肾的吴阿姨(A+),High Frequency Antigens: the 901 Series (11 Antigens),Jr(a-) is much less rare in Japanese,（参考资料：AABB Technical Manual 16th edition, p.433 ）,TVGH 案例：长期洗肾的吴阿姨(A+),Predicting the clinical significance of antibodies,
