1、血液学基础及血液分析一般原理目 录第 一 章 血 液 学 基 础第 一 节 血 液 的 功 能 和 组 成第 二 节 血 液 一 般 检 验 的 目 的 和 内 容第 二 章 血 液 分 析 仪 检 测 原 理 简 介第 一 节 血 液 分 析 仪 主 要 检 测 项 目第 二 节 血 液 分 析 仪 基 本 检 测 原 理第 三 节 血 液 分 析 仪 白 细 胞 分 类 检 测 原 理第 四 节 液 体 定 量 方 法第 五 节 血 液 分 析 各 参 数 的 结 果 来 源第 六 节 血 液 分 析 仪 的 技 术 发 展第七节 选 择 血 液 细 胞 分 析 仪 的 原 则本 部 分
2、要 点 :主 要 论 述 了 血 液 的 组 成 、 血 浆 与 血 清 的 区 别 , 白 细 胞 、 红 细 胞 、 血 小 板 的 功 能 ,血 液 常 规 分 析 的 目 的 和 内 容 以 及 血 液 分 析 仪 的 检 测 原 理 及 技 术 发 展 。本 部 分 为 血 液 学 及 血 液 检 测 最 基 本 的 知 识 , 除 非 具 有 一 定 的 专 业 基 础 , 建 议 各业 务 人 员 应 对 本 部 分 的 内 容 进 行 通 读 , 并 能 掌 握 有 关 英 语 缩 写 、 基 本 术 语 的 含 义以 及 血 液 分 析 仪 各 检 测 参 数 的 产 生 过
3、 程 。2第 一 章 血 液 学 基 础第 一 节 血 液 的 功 能 和 组 成1血液的功能 机体各组织器官营养成分和代谢产物的载体。 人体所需水分、氧及排出二氧化碳的载体。 参与人体免疫功能,防止疾病侵袭。2血液的组成血 浆 血 清血 小 板白 细 胞 血 饼红 细 胞加 入 抗 凝 剂 , 离 心 , 血 液 自 然 凝 固静 置 30 分 钟 后 的 情 况 血液由有形成分(血细胞等)和血浆组成。 血清:血液自然凝固,除去固体部分(血饼)后所获得的液体部分。 血浆:血液经抗凝处理,在离心作用后获得的清液部分。除血清所含成分外,还包括蛋白质、凝固因子等成分。血 清血 浆 蛋 白 质血 液
4、 凝 固 因 子红 细 胞 血 饼有 形 成 分 白 细 胞血 小 板其 他 有 形 成 分3 血 液 细 胞 构 成红 细 胞血 液 细 胞 白 细 胞血 小 板淋 巴 细 胞单 核 细 胞白 细 胞 嗜 中 性 粒 细 胞粒 细 胞 嗜 酸 性 粒 细 胞嗜 碱 性 粒 细 胞3(1). 红细胞: 形态和功能:78um0.8um 2.2um红 细 胞 模 型 图红细胞为扁圆状结构,中央凹陷,细胞内无核、柔软,可进入比本身直径更小的毛细血管,平均直径 78m 。内含血红蛋白,富含铁元素,容易氧化。负责将氧气输送致全身,并将二氧化碳收集至肺部排出。 红细胞的成熟:红 系 原 红 细 胞 早 幼
5、 中 幼 晚 幼 网 织 成 熟祖 细 胞 红 细 胞 红 细 胞 红 细 胞 红 细 胞 红 细 胞正常情况下,红细胞起源于骨髓中红系祖细胞,后者在促红细胞生成素的作用下,分化为原红细胞,经数次有丝分裂而依次发育为早幼、中幼、晚幼红细胞,后者已丧失分裂能力通过脱核成为网织红细胞进入外周血。由网织红细胞再发育成为完全成熟的红细胞。从早幼红细胞开始,已能利用铁蛋白和原卟啉合成血红素,后者再与珠蛋白肽链结合而成为血红蛋白,幼红细胞越趋向成熟,合成的血红蛋白越多,直到网织红细胞阶段仍能合成少量血红蛋白。一般外周血中网织红细胞的含量不超过 1%,网织红细胞中仍残留有 RNA,由此可通过流式细胞检测技术
6、进行检测。网织红细胞越成熟,DNA 含量越低,由此可计算出网织红细胞成熟程度。(2). 白细胞: 白细胞的分类和分群:从严格的意义上讲,只有将白细胞的种类分出淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜碱性粒细胞的分析才被认可为白细胞分类。除此之外的只能算作白细胞分群。但在国内,白细胞分类和分群的界定并不十分严格。以下是白细胞的分类或分群:小 型 白 细 胞 (淋 巴 细 胞 )二 分 类大 型 白 细 胞 (其 他 白 细 胞 )小 型 白 细 胞 (淋 巴 细 胞 )三 分 类 中 型 白 细 胞 (单 核 细 胞 、 嗜 酸 性 、 嗜 碱 性 粒 细 胞 )大 型 白 细 胞 (
7、嗜 中 性 粒 细 胞 )淋 巴 细 胞单 核 细 胞五 分 类 嗜 中 性 粒 细 胞粒 细 胞 嗜 酸 性 粒 细 胞4嗜 碱 性 粒 细 胞 形状和功能:白细胞为球状结构,细胞内有核,直径 715m。产生人体免疫机能,直接攻击外来细菌或产生抗原抗体反应。单 核 细 胞 情 报 通 信侦 察 T 型 淋 巴 细 胞 (细 胞 性 免 疫 )B 型 淋 巴 细 胞 (体 液 性 免 疫 )直 接 攻 击产 生病 源 体 包 围抗 体* 嗜 酸 性 粒 细 胞 协 助 产 生 抗 体 。(3). 血小板:血液中的有形成分,体积较小,参与凝血和止血。4血液检测的意义和检验学科的分类 在生理情况下
8、,人体内血液各种成分的质和量,反映了机体正常新陈代谢和内外环境的平衡。 在病理情况下,血液成分质和量的变化,除了反映造血系统的病变以外,还能直接或间接地提示全身或局部组织器官的病变。 生物化学和免疫学检验:主要检验血浆中的成分。 血液学检验:主要检验与临床止血和凝血相关的各种血小板因子、凝血因子、血管因子等项目。 血液一般检验:主要检验血液中有形成分的质和量。5血液一般检验的方法 传统方法:以手工操作、普通光学显微镜、计数板等简单器材为主要检测手段。 现代方法:以血液自动分析仪为主要标志。 随着细胞化学、组织化学、位相显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、同位素示踪技术、单克隆抗体等现代技术的运用,
9、血液学研究不断得到新的发展。 到 20 世纪 90 年代,综合光学、电学、细胞化学原理的血液分析仪代表了当今血液一般检验技术的发展趋势。第二节 血液一般检验的目的和内容1血液一般检验的目的以现代血液学理论为基础,以常用的实验方法为手段,联系临床实际,为临床疾病的初步诊断和疗效观察提供客观依据。2血液一般检验的内容对血液中的有形成分和血液细胞的数量、质量和外观形态进行检测。3血液一般检验的检测项目(1). 白细胞检测WBC(White Blood Cell count): 白细胞计数: 单位体积全血白细胞数,(10 3/L 或10 9/L)。LYM%(Lymphocyte concentrati
10、on):淋巴细胞占白细胞百分率(%)。5LYM#(Lymphocyte count): 淋巴细胞计数:单位体积全血淋巴细胞数,(10 3/L 或10 9/L)。MONO%(Monocyte concentration):单核细胞(中间细胞 MID)占白细胞百分率(%)。MONO#(Monocyte count): 单核细胞( 中间细胞 MID)计数:单位体积全血单核细胞数,(103/L 或 109/L)。GRAN%(Granulocyte concentration):粒细胞占白细胞的百分率(%)。GRAN#(Granulocyte count): 粒细胞计数: 单位体积全血粒细胞数,(10
11、3/L 或10 9/L)。NEU%(Neutrophil concentration): 嗜中性粒细胞占白细胞百分率(%)。NEU#(Neutrophil count): 嗜中性粒细胞计数:单位体积全血嗜中粒细胞数,(103/L 或 109/L)。EOS%(Eosinophil concentration): 嗜酸性粒细胞占白细胞的百分率(%)。EOS#(Eosinophil count): 嗜酸性粒细胞计数:单位体积全血嗜酸粒细胞数,(103/L 或 109/L)。BASO%(Basophil concentration): 嗜碱性粒细胞占白细胞的百分率(%)。BASO#(Basophil
12、count): 嗜碱性粒细胞计数:单位体积全血嗜碱粒细胞数,(103/L 或 109/L)。(2). 红细胞检测RBC(Red Blood Cell count): 红细胞计数: 单位体积全血红细胞数(10 6/L 或10 12/L)。HGB(Hemoglobin concentration): 血红蛋白:单位体积全血血红蛋白浓度(g/L)。HCT(Hematocrit)或 PCV(Packed Cell Volume):红细胞比积:全血红细胞相对容积比(%) 。MCV(Mean Corpuscular Volume): 红细胞平均容积:全血单个红细胞的平均比积(fl:110 -15 升)。M
13、CH(Mean Corpuscular Hemoglobin): 红细胞平均血红蛋白浓度:单个红细胞平均血红蛋白含量,(pg: 110-12 克)。MCHC(Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration):平均红细胞血红蛋白浓度(g/L)。RDW(Red Blood Cell Volume Distribution Width):红细胞体积分布宽度。RDW-CV(RDW-Coefficient of Variation): 红细胞体积分布宽度变异系数(%)。RDW-SD(RDW-Standard Deviation): 红细胞体积分布宽度标准偏差(fl)。
14、HDW(Hemoglobin Distribution Width): 红细胞血红蛋白分布宽度。(3). 血小板检测PLT(Platelet count): 血小板计数: 单位体积全血血小板数,(10 3/L 或10 9/L)。MPV(Mean Platelet Volume): 平均血小板体积:全血血小板平均体积,(fl:110 -15 升)。PCT(Plateletocrit): 血小板压积: 血小板相对容积(L/L)或(%)。PDW(Platelet Volume Distribution Width): 血小板体积分布宽度;PLCR(Platelet Large Cell Ratio)
15、:大血小板比率:体积12fl 的血小板比率。(4). 网织红细胞检测RET#(Reticulocyte count): 网织红细胞计数:单位体积血液中网织红细胞的数量,(104/L 或 1010/L);RET%(Reticulocyte concentration):网织红细胞百分率:网织红细胞占成熟红细胞的百分率(%);MRV 或 MCVR(Mean Reticulocyte Volume):网织红细胞平均体积;HFR%(High Fluorescent Reticulocyte concentration):高荧光率网织红细胞占网织红细胞的百分率(%);MFR%(Middle Fluore
16、scent Reticulocyte concentration):6中荧光率网织红细胞占网织红细胞的百分率(%);LFR%(Low Fluorescent Reticulocyte concentration):低荧光率网织红细胞占网织红细胞的百分率(%);RMI(Reticulocyte Maturation Index): 网织红细胞成熟度指数:高荧光率网织红细胞与中荧光率网织红细胞之和与低荧光强度网织红细胞的比值(%);RMI = (HFR+MFR) / LFR100%RPI(Reticulocyte Proofreading Index):网织红细胞成熟校正指数:RPI=RET%(H
17、CT/0.45)1/1+(0.45-HCT)RDWR(Reticulocyte Distribution Width): 网织红细胞分布宽度;HCR(Reticulocyte Hemoglobin Concentration): 网织红细胞血红蛋白浓度;MCHCR(Reticulocyte Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration):网织红细胞平均血红蛋白浓度;HDWR(Reticulocyte Hemoglobin Distribution Width): 网织红细胞血红蛋白分布宽度;MOXI(Mean Peroxidase Index): 平均过氧
18、化物酶活性指数;LI(Iobularity Index): 分页核指数。4血液分析项目参考值及临床意义(1). 白细胞检测项目 单位 参考值 临床意义WBC 109/L 4.511.0 增加: 生理性:新生儿、妊娠末期、分娩期、 饭后等。病理性:大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、白血病、急性出血、组织损伤等。LYM% % 2040 增加: 百日咳、传染性单核细胞增多症、腮腺炎、结LYM# 109/L 1.54.0 核、传染性肝炎等。减少: 多见于传染性疾病的急性期、放射病、细胞免疫缺陷等。MONO% % 410 增加: 结核、伤寒、亚急性心内膜炎、疟疾、单核
19、细MONO# 109/L 0.20.8 胞白血病、急性感染恢复期等。NEU% % 5462 增加: 急性化脓性感染、粒细胞性白血病、急性出血、NEU# 109/L 27 溶血、手术后、尿毒症、酸中毒、急性汞和铅中毒等。减少: 伤寒、副伤寒、疟疾、流感、化学药物、X 射线和镭照射、化疗、再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症等。EOS% % 13 增加: 变态反应、寄生虫病、某些皮肤病、手术后、EOS# 109/L 00.45 烧伤等。减少: 伤寒、副伤寒、应用肾上腺皮质激素后等。BASO% % 01 增加: 慢性粒细胞性白血病、嗜碱性粒细胞白血病、BASO# 109/L 00.2 何杰金病、癌转移、铅中
20、毒等。(2). 红细胞检测项目 单位 参考值 临床意义7RBC 1012/L 男性:4.35.8 增加: 生理性:新生儿、高原居住者。女性:3.85.3 病理性:真性红细胞增多症等。减少: 各种贫血、白血病、各种急慢性失血等。HGB g/L 男性:126174 临床意义见红细胞计数。一般情况下血红蛋白女性:117161 浓度与红细胞数有一定的比例关系,二者对贫血诊断有帮助。HCT L/L 男性:0.370.51 增加:大面积烧伤、体外循环脱水等。女性:0.350.47 减少:各类贫血时随红细胞的减少而有不同程度的降低。MCV fl 80100MCH pg 2735 临 床 意 义 见 贫 血
21、形 态 学 分 类MCHC g/L 310370RDW-CV % 11.614.0 是 反 映 红 细 胞 大 小 的 客 观 指 标 , 增 加RDW-SD fl 39.046.0 见 于 缺 铁 性 贫 血 、 营 养 不 良 性 贫 血 。贫 血 的 形 态 学 分 类1Wintrobe 分类法分 类 依 据 : MCV、 MCH、 MCHC 这 三 个 参 数 是 否 正 常 为 依 据 。类 型 MCV (80100)MCH (2735)MCHC (310370)常 见 疾 病大细胞性贫血 100 35 310370 巨幼细胞贫血、非巨幼细胞性大细胞贫血正常细胞性贫血 80100 2
22、735 310370 急性失血性贫血、溶血性贫血、症状性贫血、再生障碍性贫血单纯小细胞性贫血 80 27 310370 亚急性或慢性炎症小细胞低色素贫血 80 27 310 缺铁性贫血、铁粒幼细胞贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、铅中毒贫血2Bessman 分类法分 类 依 据 : 以 MCV、 RDW 是 否 正 常 为 分 类 依 据 。类 型 MCV(80100)HDW(正常上限约为 14.0%)常 见 疾 病小细胞均一性贫血 降低 正常 杂合子珠蛋白生成障碍性贫血、慢性疾病小细胞不均一性贫血降低 上升 缺铁性贫血、血红蛋白 S(HbS)、- 珠蛋白生成障碍性贫血、红细胞破碎综合症、血红蛋白
23、H(HbH)正细胞均一性贫血 正常 正常 少部分再生障碍性贫血、慢性粒细胞性或淋巴细胞性白血病、出血、慢性疾病、输血、化疗正细胞不均一性贫血正常 上升 缺铁性贫血、缺叶酸或维生素 B12 双相性贫血、铁粒幼细胞贫血、溶血性贫血、骨髓纤维化大细胞均一性贫血 增加 正常 多数再生障碍性贫血、前白血病、白细胞明显增高的淋巴细胞白血病大细胞不均一性贫 增加 上升 缺叶酸或维生素 B12 缺乏性贫血、免疫性贫8血 血贫 血 病 因 学 分 类根 据 贫 血 发 生 的 不 同 机 制 进 行 分 类 。类 型 发 病 机 制 疾 病红细胞生成减少骨髓功能衰竭 造血干细胞减少造血干细胞或祖细胞暂时受抑制红
24、系干细胞缺乏再生障碍性贫血急性造血功能停滞单纯红细胞再生障碍性贫血、先天性红细胞生成障碍性贫血造血调控因子缺乏 肾性贫血、内分泌紊乱所致贫血铁缺乏 缺铁性贫血铁利用障碍 铁粒幼细胞贫血单核巨噬系统铁释放障碍 炎症、感染所致慢性疾病贫血铁运转障碍 先天性运铁蛋白缺乏症铜缺乏 缺铜性贫血造血物质缺乏或利用障碍DNA 合成障碍 叶酸、维生素 B12 缺乏性巨幼细胞贫血及其他巨细胞贫血红细胞酶缺陷 遗传性球性红细胞增多症遗传性椭圆形红细胞增多症遗传口形红细胞增多症遗传性棘形细胞增多症红细胞酶缺陷 遗传性红细胞 G-6-PD 缺乏症遗传性红细胞丙酮酸激酶缺乏症糖无氧酵解、戊糖旁路及谷胱甘肽代谢中其他酶缺
25、乏所致溶血性贫血血红蛋白异常红细胞破坏过多珠蛋白合成减少珠蛋白结构异常红细胞对外补体过敏珠蛋白生成障碍性贫血、镰状细胞贫血、血红蛋白 C,D,E(HbC,D,E)病不稳定 Hb 所致溶血性贫血阵发性睡眠性血红蛋白尿症免疫反应自身免疫同种免疫药物诱发免疫温抗体型自身免疫性溶血性贫血冷凝血综合症新生儿 ABO 溶血病、新生儿 Rh 溶血病、血型不合输血后溶血病药物性免疫性溶血性贫血机械性损伤 红细胞破碎综合症、行军性 Hb 尿高温 烧伤所致溶血性疾病化学物质 药物和化学毒物所致溶血性疾病微生物、寄生虫 疟疾和多种细菌所致溶血性贫血红细胞外在异常脾功能亢进 脾功能亢进所致溶血性贫血红细胞丢失(失血)
26、 急性失血 急性失血所致贫血慢性失血 慢性失血所致缺铁性贫血9(3). 血小板检测项目 单位 参考值 临床意义PLT 109/L 100300 增加: 急性大出血、急性溶血、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、慢性粒细胞白血病等。减少: 急性白血病、再生障碍性贫血、原发性血小板减少性紫瘢、脾功能亢进、系统性红斑狼疮、DIC 、血栓性血小板减少性紫瘢等。MPV fl 6.512 增加: 非免疫性血小板破坏、骨髓抑制恢复时期、体外循环手术后 8 天、先兆子痫、ITP 初期、慢性白血病、心肌梗塞直到 7 周后、巨血小板综合症、脾切除后、原发性血小板增多症等。减少: 再生障碍性贫血、药物抑制骨髓、巨
27、幼细胞性贫血(治疗后上升) 、恶性肿瘤化疗期、肾移植等。PCT L/L 0.1450.209 临床意义见血小板计数(PLT)。PDW-CV % 16.319.3 MPV 与 MPV 呈负的线形相关,急淋、慢淋、糖尿病可正常。巨幼细胞性贫血、恶性贫血 PDW 升高,血小板体积大小不均是 PDW 可增加。P-LCR % 1343第二章 血液分析仪检测原理简介第一节 血液分析仪主要检测项目1CBC 分析: CBC 分析是只进行细胞计数和初步分析的检验模式,其检测参数通常只有 8 项。包括:WBC、RBC、HCT、HGB、PLT、MCV 、MCH、MCHC 等。2CBC+DIFF 分析:CBC+DIF
28、F 分析是进行细胞计数和白细胞分类的检验模式,实际上白细胞二分类、三分类并不能算作 CBC+DIFF 分析。由于国内对此未进行严格意义上的界定,因此仍将其列在 CBC+DIFF 模式之中。二分类血液分析仪主要项目: WBC、W-SCR%、W-LCR% 、S-WCR#、L-WCR#、RBC、HGB 、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-CV(或 SD)、PLT、MPV、PDW;WBC、RBC、PLT 直方图。三分类血液分析仪主要项目: WBC、W-SCR%、W-MCR%、W-LCR% 、W-SCR#、W-MCR#、W-LCR#、RBC、HGB、HCT 、MCV、MCH 、MCHC、RDW-CV(或 SD)、PLT、MPV、PDW;WBC、 RBC、PLT 直方图。五分类血液分析仪主要项目:WBC、LYM%、MONO%、NEU%、EOS%、BASO%、10LYM#、MONO# 、NEU#、EOS# 、BASO% 、RBC、HGB 、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-CV(或 SD)、PLT、MPV、PDW;P-LCR 等以及WBC、 RBC、PLT 散点图、直方图。3CBC+DIFF+RET 分析: 在某些高档血液分析仪中还有检测网织红细胞的功能,CBC+DIFF+RET 分析就是在进行细胞计数和白细胞分类的基础上进行网织红细胞分析的检验模式。