大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 一. 实验目的通过本实验，学习大肠杆菌感受态细胞制备和转化的原理与技术方法。 二. 实验原理感受态细胞(Competent cells):受体细胞经过一些特殊方法处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能使许多有外源DNA的载体分子通过的感受态细胞(competent cell) 。转化（transformation）：是将异源DNA分子引入受体细胞，使其获得新的遗传性状的一种技术方法。 进入细胞的DNA分子通过复制表达，才能实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。大肠杆菌转化的方法：1.化学法：使用化学试剂（如CaCl2）制备的感受态细胞，通过热击处理将载体DNA分子导入受体细胞；2.电转化法：通过高压脉冲的作用将载体DNA分子导入受体细胞。转化子的筛选：利用导入的DNA上的选择性标记，区分转化子与非转化子。选择性标记主要有两类：营养筛选标记抗性筛选标记三实验方法 1挑取大肠杆菌DH5单菌落，接于5mL LB液体培养基 37 培养过 2 1:50 将1ml菌液转移 新 LB液体培养基 ，37 培养1.5 2 hr ，使A600 0.4 0.5
