1、遗传病的诊断,3,4,1,病史、症状和体征,细胞遗传学检查,系谱分析,生物化学检查,2,Chapter 01 遗传病的常规诊断,1.病史采集,遗传病的个人病史和家族史的采集与常规疾病相似，但需问清一些重要的细节：,助孕情况(接受供卵或供精)，流产史，死胎，终止妊娠，儿童的收养或过继，近亲婚配和非婚生情况；,对于先天畸形，还需采集怀孕时父母身体健康情况和年龄、妊娠早期历史、暴露致畸物的情况、胎儿生长和活动情况、详细的出生记录，家庭其他成员的异常、发病年龄、病程特点，未受累者现在的年龄、种族等有关资料。,2.症状和体征,因为遗传病的患者及其家属常常具有较大的心理压力，所以检查病人的时间要充裕，环境
2、要安静。遗传性疾病可能影响许多器官、系统，因此体格检查必须全面，既要注意明显的体征、也要注意细微的异常迹象。,智力低下黄疸白内障肝脾肿大,智力发育不全毛发黄腐臭味,苯丙酮尿征 ？,半乳糖血症 ？,面似满月生长缓慢哭声象猫叫,猫叫综合征 ？,副性征发育不良继发/原发性闭经身体矮小肘外翻,45，XO ?,3,4,病史、症状和体征,细胞遗传学检查,系谱分析,生物化学检查,2,遗传病的常规诊断,2,1,系谱分析的原则,系统全面祥尽去伪存真注意新的基因突变注意临床假象,1.孟德尔遗传病,（1）常染色体显性遗传病(AD),（2）常染色体隐性遗传病(AR),（3）X连锁隐性遗传病(XR),（4）X连锁显性遗
3、传病(XD),（5）Y连锁遗传病,2. 非孟德尔遗传病,（1）线粒体遗传病,(2) 多基因病,母系遗传，女性患者的子女都可能发病。晚发，进行性。,2.1 线粒体遗传病,2.2 多基因病,许多出生缺陷和慢性晚发型疾病，家族性聚集性类似于孟德尔遗传，但不严格遵循孟德尔分离率。,4,细胞遗传学检查,系谱分析,生物化学检查,2,遗传病的常规诊断,3,1,病史、症状和体征,1.核型分析,骨髓,胸腹水,活检组织(如绒毛膜,手术取材的肿瘤组织等),组织培养物(如原代培养的细胞)羊水等都可以作为检查材料.,人外周血淋巴细胞培养,PHA,淋巴母细胞,秋水仙素,分裂中期的细胞,染色体检查的指征,1.明显的生长发育
4、异常,多发畸形,智力低下者;2.多发性流产和不育的夫妇;3.性腺以及外生殖器发育异常者;4.原发性闭经;5.35岁以上的高龄孕妇;6.已经生有染色体异常患儿的夫妇;7.身材高大,性情粗暴的男性;8.恶性血液病患者9.长期接受X线,电离辐射的人员.,2.性染色质检查,Y染色质检查 X染色质检查,3.荧光原位杂交技术检查,3,细胞遗传学检查,系谱分析,生物化学检查,2,Chapter 01 遗传病的常规诊断,4,1,病史、症状和体征,生化检查,主要是对蛋白质和酶结构或功能的检测;特别适用于分子病,先天性代谢病,免疫缺陷等遗传病的检查；材料主要有血液/活检组织/粪便/脱落细胞/尿/阴道分泌物等。,上
5、海：19811987年对284,396名新生儿进行PKU筛查，查出PKU患儿15名，高苯丙氨酸血症4名。,苯丙酮尿症的生化检查,(一)概念 基因诊断是指利用DNA重组技术在分子水平上对人类遗传病的基因缺陷进行检测以诊断遗传病的一种方法，又称DNA分析法。（二）特点和优点 1.以探测基因为目标，属于“病因诊断”，针对性强。 2.基因诊断取材来源广泛。可以是机体各种组织的有核细胞，因此基因诊断不受取材细胞类型和个体发育阶段的限制，可以做出现症病人的诊断及产前、发病前的早期诊断。 3.利用基因探针进行检测，灵敏度高、特异性强。,五.基因诊断,（三）原理 用已知的核苷酸序列测定未知的核苷酸序列。 （四
6、）方法 主要包括分子杂交、DNA体外扩增（PCR）、DNA单链构象多态分析法等，其中最基本的技术是核酸分子杂交技术。 1.核酸分子杂交概念及过程示意图 2.核酸分子杂交的应用 （五）应用 1978年简悦威（YW Kan）首次用DNA重组技术进行镰刀型贫血病的产前诊断，到1982年普遍开始试用基因诊断技术。迄今已对数百种遗传性疾病进行基因诊断和产前基因诊断。随着检测人类基因探针的分离和克隆化，以及基因DNA序列的阐明，将有更多的单基因遗传病能进行基因诊断。,分子杂交：不同来源的核酸经变性和复性的过程，其中一些不同的核苷酸单链由于存在局部碱基互补片段，而在复性时形成杂化双链，此过程称分子杂交。,加
7、热,退火,分子探针:带有某种标记物的分子，如核苷酸链片段； 分子杂交和探针技术是许多分子生物学技术的基础，有广泛的应用价值。,加热,退火,镰形红细胞贫血症的分子诊断,1.35Kb,1.15Kb,凝 胶 电 泳 图,HbAHbA,HbAHbS,HbSHbS,1989年，Orita等建立的PCR产物单链DNA凝胶电泳技术。,1：正常人 2,4,5：纯合体患者 3：杂合体(2的弟弟)左为泳动变位模式：a 正常人；b 纯合体患者,B.PCR-RFLP,应用PCR-RFLP法检测软骨发育不全,1，6，11：待诊胎儿外祖父；2，7，12：孕妇；3，8，13：待诊胎儿4，9，14：待诊胎儿外祖母；5，10，
8、15：先证者（待诊胎儿舅舅）,家系A产前诊断电泳分析图谱,六、皮纹分析 （一）皮肤纹理 (简称皮纹) 1.皮肤纹理 (简称皮纹)概念 每个人都有特殊的皮肤纹理，在胚胎的第14周就已形成，出生后定形且终生不变，说明皮纹具有重要的遗传基础。 2.皮纹类型及其特点 皮纹主要包括指纹、掌纹、足底纹和掌褶纹。,（1）指纹：指手指末端腹面的皮纹。 指纹类型：主要分弓形纹、箕形纹和斗形纹三种类型。,嵴纹计数的基本方法：从箕形纹或斗形纹的中心点至三叉点画一直线，统计跨过这根直线的纹线数。弓形纹无中心和三叉点，故计数为0。斗形纹有两个三叉点，计数时以较大的数为准。而将双手10指的嵴纹数目相加即得到总嵴纹数(TF
9、RC)。染色体病患者的指纹TFRC与正常人的相比有明显的差异。对于性染色体数目异常的患者而言，有随X染色体数目的增多而TFRC降低的趋势。例如，据统计XY个体TFRC为145，XX个体的为127；XXX个体的为109，XXXXY个体的为49.4等，故统计TFRC可以作为诊断某些染色体异常疾病的辅助指标。,（2）掌纹：是手掌中的皮纹。掌纹观察分析时一般应包括5个方面。 大鱼际区，位于拇指的下方。 小鱼际区，位于小指的下方。 指间区，从拇指到小指的指根部间区域。依次分为四个小区(1、2、3、4)。 指基三叉点（a、b、c、d），分别位于第2、3、4、5指基部。四条主线（A、B、C、D），分别由指基
10、三叉点向手心端引出的线。,轴三叉点（t）：在大小鱼际交联的底端，掌面基部正中，大约在无名指直下。对于成年人而言，t三叉点距离腕线约1.4cm处。 atd角，指基三叉点a、d与t三叉点连线所成的夹角，可用量角器测定。我国正常人群的atd角均值为41。 三叉点t的位置对某些染色体病的诊断有重要意义。atd角的大小也可以反映t三叉点的位置，atd角越大，则轴三叉点位置越高、越远离腕线，向掌心方向移动。若atd角小于45，轴三叉点以t表示；atd角在4556之间，轴三叉点以t表示，多见于先天愚型患者；若atd角大于56，轴三叉点以t 表示，多见于13三体综合征患者。,（3）褶纹：是手指和手掌的关节弯曲
11、活动处明显可见的褶线。指褶纹：正常人除拇指有一条指褶纹外，其余各指都有两条指褶纹。先天愚型患者和18三体综合征患者的第五指可只有一条指褶纹。掌褶纹：普通人手掌中一般有三条大褶纹：远端横褶纹、近端横褶纹和大鱼际纵褶纹。远端横褶纹和近端横褶纹不相连接。(见右图),掌褶纹还常见四种变异类型。（见下图）,（4）足纹：在脚趾、脚掌的皮纹中，研究得最多且有临床意义的主要是拇趾球部的纹理，其中基本的纹理型也分为弓、箕、斗三种，并按皮纹的胫侧、腓侧、近远侧的走向分为七个类型，其中胫弓型多见于先天愚型患者中。,（二）皮肤纹理分析 从目前对皮纹与染色体病的关联的研究资料中可以发现，染色体病病人的皮肤纹理具有值得注
12、意的特征性变化，在遗传病诊断中具有一定的诊断价值，皮纹分析时要注意取样的方法，以获得准确、清晰的资料。另外，正常人也可出现“异常”皮纹，故皮纹分析仅可作为某些遗传病诊断的初筛手段。,常见染色体病患者的皮纹特征,七、产前诊断 （一）产前诊断概念 产前诊断又称为宫内诊断，是利用直接或间接方法对胎儿进行疾病诊断的过程，从而有效地预防具有严重遗传病、智力障碍及先天畸形的患儿出生。 （二）目前能进行产前诊断的遗传病 染色体病； 一些特定的酶缺陷所致的先天性代谢病； 可利用基因诊断方法诊断的遗传病； 多基因遗传的神经管缺陷； 有明显形态改变的先天畸形。 产前诊断可以有效地预防遗传病患儿的出生，降低遗传病的
13、发病率，因为产前诊断结果出来后，医生可据此建议孕妇继续妊娠或进行选择性流产。,（三）产前诊断的指征 夫妇一方有染色体异常或生育过染色体异常患儿的孕妇； 夫妇一方为单基因病患者或生育过单基因病患儿的孕妇； 35岁以上的高龄孕妇； 有不明原因习惯性流产史、畸胎史、死产史或新生儿死亡史的孕妇； 夫妇一方为染色体平衡易位携带者； 有脆性X综合征家系的夫妇或同胞中有严重X连锁隐性遗传病的孕妇； 夫妇一方有神经管畸形者或生育过先天性神经管畸形的孕妇； 羊水过多的孕妇； 夫妇一方有明显致畸因素接触史； 具有遗传病家族史或近亲婚配的孕妇。,（四）产前诊断的取材技术 绒毛吸取术：早期妊娠（511周）时进行； 羊膜穿刺术 ：最常用，中期妊娠（1620周）时进行； 脐带穿刺术：中期至晚期妊娠（1732周）时进行； 母血分离胎儿细胞：母血中含有少量胎儿的滋养叶细胞、有核红细胞、和淋巴细胞。,遗传病诊断的三个层次,现症病人诊断症状前诊断产前诊断,1.现症病人的诊断,明确的临床诊断 相对比较容易确定其遗传规律 遗传异质性 患病对后代的影响很难确定,2.携带者的检出,携带者携带有隐性致病基因，本人表现正常的个体；携带有显性致病基因，但没有外显的正常个体；携带有致病基因，迟发个体；染色体平衡易位或倒位的个体。,
