1、高效液相色谱仪流动相配制标准操作规程1. 目 的明确高效液相色谱法流动相配制过程，保证操作过程的规范性。2. 适用范围适用于实验室高效液相色谱法流动相配制。3. 职 责实验室分析人员负责按本规程进行操作。4. 内 容4.1 流动相批号的编写原则：流动相批号按配制日期编制，如批号 20150609，代表 2015 年 06 月 09 日配制。4.2 流动相配制4.2.1 含水流动相和不含水流动相的配制所用量筒应区分开，配制不含水的有机溶剂类流动相所用量筒必须是干燥状态，不得有水。4.2.2 根据样品分析方法所规定的流动相体积比例配制，在清洁的带塞量筒中分别倒入相应的溶剂，若该流动相需加入适量的酸
2、或碱，则戴上一次性手套，用专用注射器吸取规定体积的酸或碱，加入量筒，盖上塞子摇匀，振动过程应主要排气。4.2.3 含盐的缓冲液类流动相的配制应根据规定比例配制，分别秤取规定重量的盐于清洁的带塞量筒中，加入适量纯水，振摇，待固体完全溶解后，再加纯水至规定刻度，盖上塞子，摇匀。4.2.4 若该流动相对 PH 值有特殊要求，根据流动相配制规定的体积比例，用酸或碱调节 PH 值，用 PH 计测定直至规定范围内。4.3 流动相抽滤4.3.1 含水流动相和不含水流动相的抽滤装置应区分，抽滤不含水的有机溶剂类流动相所用装置必须是干燥无水的。4.3.2 抽滤装置准备：将过滤器套在三角烧瓶上，用镊子夹取 0.4
3、5m 的水系或有机滤膜一张，放在砂芯过滤器上（注意：滤膜应将过滤面完全覆盖） ；再将量杯压在滤膜上，量杯边缘和过滤器的边缘对齐；用配套的夹子将过滤器和量杯接头边缘固定（注意夹子位置应避开抽滤嘴） ；将抽滤软管套在抽滤嘴上。4.3.3 抽滤：将少量配置好的流动相倒入量杯内，观察是否有漏液现象，若出现漏液须重新固定过滤器和量杯。如未漏液则继续倒入流动相（注意不要超过量杯最大刻度线） ，开启真空泵抽滤。抽滤结束先拔掉与抽滤嘴连接的真空软管，再关闭真空泵。4.3.4 脱气：将抽滤好的流动相转入流动相试剂瓶内（少量润洗一次倒入废液桶内再盛装） ，盖上瓶盖（瓶盖不得拧紧） ，常温下超声波超声 15 至 2
4、0 分钟。4.4 流动相储存及标识流动相全部转入专用试剂瓶内后拧紧瓶盖，及时填写流动相标签贴于试剂瓶身中间位置，备用。4.5 流动相有限期如下：流动相类别 纯甲醇 纯乙腈 5%甲醇 /乙腈水溶液 缓冲盐溶液 纯化水 甲醇缓冲盐混合液 乙腈缓冲盐混合液有效期 3 个月 1 个月 15 天 3 天 1 天 7 天 7 天4.6 流动相配制工具清洁4.6.1 配制含水流动相用器具：先用自来水清洗一次，再用纯化水清洗 3 次，沥干后封口备用。4.6.2 配制不含水流动相用器具：用纯有机溶剂少量倒入已安装完毕的抽滤装置内，抽滤润洗一次，再将抽滤过的有机溶剂转入量筒内润洗量具，洗液倒入废液桶后，待用。4.7 填写配制记录流动相配制后，配制人员及时填写相应的配制记录。4.8 注意事项4.8.1 流动相所用溶剂应选用色谱纯、高纯水或双蒸水。4.8.2 过滤流动相时应注意区分水系膜和有机滤膜使用范围，防止误用。4.8.3 配制不含水流动相的抽滤器具及存储容器应清洁干燥，不得残留水份。4.8.4 流动相严禁超过储存期限使用，经验证储存期限超过有效期流动相比例未发生变化的，须重新抽滤流动相并进行超声脱气处理后使用。4.8.5 不含有机溶剂的水系流动相每次使用前应进行刷洗，自来水冲洗干净后用纯化水润洗 3 次以上。
