1、改良加藤法(Kato-Katz)操作步骤1材料的准备1.1 塑料定量模板(统一供应):规格为 30mm40mm1mm 的聚苯乙烯模板,中央孔为圆台形,其短径 3mm,长径 4mm,高 1mm,容积为 38.75mm3;1.2 软性塑料刮片(统一供应):两头刮片型;1.3 尼龙绢片(统一供应):规格为 80100 目,裁剪成 8cm8cm;1.4 透明液的配制:取 100ml 蒸馏水、100ml 纯甘油、3的孔雀绿(或亚甲蓝)1ml,按此比例混合;1.5 亲水性透明玻璃纸( 统一供应):规格为 30mm25mm、厚40um,使用前需在透明液中浸泡 24 小时以上,使玻璃纸显示绿色或蓝色;1.6
2、载玻片:规格为 75.5mm25.5mm、厚 1.0mm1.2mm;1.7 其它:原始登记表、镊子、剪刀、记号笔、标本盒、吸水纸、光学显微镜和一次性手套等。2操作步骤2.1 编号:每份粪样取 3 张载玻片进行编号(与待检粪样的编号相同);2.2 打开待检粪样的包装,将尼 龙绢片置于待检粪样上,用塑料刮片轻压尼龙绢片并在其上轻刮,使细粪渣透过尼龙绢片的微孔滤出至绢片表面;2.3 将定量板放在载玻片中部,然后用刮片将绢片表面的细粪渣填入定量板的中央孔内,使填满全孔并抹平;2.4 小心移去定量板,使粪样留在载玻片上;2.5 取一张浸泡好的亲水玻璃纸,抖掉多余的浸泡液,盖在粪样上,用橡皮塞或另一块较厚
3、的载玻片覆于玻璃纸上垂直均匀用力压制,使粪便均匀地展开至玻璃纸边缘;2.6 待粪 便透明后(一般室温 25、75湿度下,涂片放置不宜超过 2 小时)及时镜检。3结果观察3.1 将透明后的加藤片置于光学显微镜的载物台上在低倍(10)镜下进行镜检,镜检时仔细检查每一视野,并特别注意受精蛔虫卵与未受精蛔虫卵的鉴别。3.2 Kato-Katz 厚涂片虫卵计数方法。3.2.1 每张涂片发现的鞭虫卵、钩虫卵全片计数。3.2.2 每张涂片发现的蛔虫卵、肝吸虫卵原则上全片计数,由于一些地区蛔虫、肝吸虫感染度特别高,有时一张涂片虫卵数达数千甚至数万个,计数蛔虫卵、肝吸虫卵比较费时,为此对 Kato-Katz 厚
4、涂片蛔虫卵、肝吸虫卵计数作以下规定:3.2.2.1 随意粗查几个视野,若每个视野蛔虫卵(肝吸虫卵)少于10 个,蛔虫卵、肝吸虫卵全片计数3.2.3.2 随意粗查几个视野,若每个视野蛔虫卵(肝吸虫卵)多于10 个,先读 完全片的各视野钩虫卵数和鞭虫卵数,再用定视野抽查法推算全片蛔虫卵、肝吸虫卵数。具体步骤是:按图 1 分布固定抽查 10 个视野,并算出抽查的 10 个视野蛔虫卵(肝吸虫卵)总数;图 1. 10 个视野分布计算出该涂片粪膜视野数,再推算出全片蛔虫卵(肝吸虫卵)数。按一定的规律,如自左而右,自上而下,再自右而左,一行接一行,一个视野接一个视野地用推行器移动涂片,数出全片粪膜视野数,则
5、:全片粪膜蛔虫卵(肝吸虫卵)总数抽查的 10 个视野蛔虫卵(肝吸虫卵)数之和 全片粪膜 视野10例如:抽查的 10 个视野蛔虫卵(肝吸虫卵)数相加为 366,全片粪膜视野数为 78,则:全片粪膜蛔虫卵(肝吸虫卵)总数36678102854.828553.2.3 其他虫卵均记录但不计数。3.3 结果登记 3.3.1 观察结果即时记录在原始登记表,并及时转登表。4注意事项4.1 亲水性透明玻璃纸:使用前需全部浸入透明液中,浸泡 24 小时以上。4.2 把刮片上的细粪渣填入定量板时,必须填满中央孔全孔并抹平;压制涂片时尽量使粪便均匀展开至玻璃纸边缘,但应避免粪渣溢出;4.3 涂片放置时间长短是关键。
6、一般室温 25、75湿度下,涂片放置不宜超过 2 小时。若温度低,空气湿度大,涂片放置时间可适当延长。 总之,涂片放置时间取决于粪样透明度,只要透明了,就应及时镜检,否则 透明过度,薄壳虫卵易变形看不清楚,会造成漏检或误判。4.4 用椭圆孔塑料定量板,每孔所容粪便重量平均 41.7mg,每片所得虫卵数乘以 24 即得每克粪便的虫卵数,填在表 2 为实际观察到的虫卵数(不乘 24)。4.5 粪样一粪三检,三片全计数取平均值。4.5.1 阴性片记为零一起算入平均值 4.5.2 平均值结果四舍五入保留小数点一位例如:三片计数结果分别为 15、0、11,则虫卵数为(15+0+11)/3 8.7若三片计数结果分别为 1、0、0,则虫卵数为(1+0+0)/3 0.3