1、实验 2 水样总氮的测定过硫酸钾氧化-紫外分光光度法（HJ 636-2012）一、实验目的 （1）掌握总氮的测定原理和方法。（2）了解影响总氮测定的因素。二、实验原理K2S2O8+H2O2KHSO 4+1/2O2KHSO4H + HSO4HSO4 H + SO42-OH-+H+H 2O在 60 以上水溶液中，过硫酸钾可分解产生硫酸氢钾和原子态氧，分解出的原子态氧在 120124 条件下，可使水样中含氮化合物的氮元素转化为硝酸盐。在此过程中有机物同时被氧化分解。AA 2202A 275 （1-1）本方法的检出限为 0.05mg/L，测定范围为 0.204.00mg/L。三、实验试剂 （配制以下试
2、剂均使用无氨水） （1）氢氧化钠溶液（200 g/L）：称取 20 g 氢氧化钠，溶于无氨水中，稀释至 100 mL。（2）氢氧化钠溶液（20 g/L）：，将溶液（1）稀释 10 倍而得。（3）碱性过硫酸钾溶液：称取 40 g 过硫酸钾(K 2S2O8)溶于 600 mL 水中，另称取 15 g 氢氧化钠溶于 300 mL 水中。待氢氧化钠溶液温度冷却至室温后，混合两种溶液定容至 1000 mL，溶液存放在聚乙烯瓶内，最长可贮存一周。（4）盐酸溶液（19）：浓盐酸和无氨水的体积比为 1:9。（5）硝酸钾标准贮备液（氮含量 100 mg/L）：硝酸钾(KNO 3)在105 110电热干燥箱中干燥
3、 3h，在干燥器中冷却后，称取 0.7218 g，溶于无氨水中，移至 1000 mL 容量瓶中，用无氨水稀释至标线，混匀。加入 12 mL 三氯甲烷作为保护剂，并在 010 暗处保存，可稳定 6 个月。（6）硫酸溶液（135）：浓硫酸和无氨水的体积比为 1:35。3. 实验器材所用玻璃器皿用盐酸(19)或硫酸(135) 浸泡，清洗后再用无氨水冲洗数次。（1）紫外分光光度计：配备 10 mm 石英比色皿。（2）压力蒸汽灭菌器：医用手提式蒸气灭菌器或家用压力锅(压力为1.11.4 kg/cm 2)，锅内温度相当于 120124 。（3）比色管：具玻璃磨口塞，25 mL。四、实验方法和步骤1. 样品
4、测定（1）取 10.00 mL 试样（2080gN）置于比色管中5 mL 碱性过硫酸钾溶液，塞紧磨口塞用绳扎紧瓶塞，以防弹出将比色管置于医用手提蒸气灭菌器中，加热至顶压阀吹气，关阀使压力表指针到 1.11.3 kg/cm2，此时温度达 120124 后开始计时保持温度在 120124 之间 30 min自然冷却、开阀放气，移去外盖，取出比色管，冷却至室温，按住管塞将比色管中的液体颠倒混匀 23 次(19)盐酸 1.0 mL用无氨水稀释至 25 mL 标线，盖塞混匀在紫外分光光度计上，以无氨水作参比，10 mm 石英比色皿，分别在波长为 220 nm 与 275 nm 处测定吸光度，并用式（1-
5、1）计算出校正吸光度 Ar。同时作空白（10 mL 无氨水代替试样，A b0.03）2. 标准曲线的测定分别吸取(10 mgN/L)硝酸钾标准溶液 0.00、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00和 7.00 mL 于 25 mL 具塞磨口玻璃比色管中，其对应的总氮（以 N 计）含量分别为 0.00、0.20、0.40、0.80、1.20、2.00 和 2.80mg/L。加无氨水定容，直接上机测定，用差值A 与浓度 c 作标准曲线。计算线性回归方程。五、实验数据记录按式(1-1)计算样品的校正吸光度 Ar，减去 Ab 后在标准曲线上查出相应的总氮浓度，乘以定容体积，得总氮质量 m，按
6、下式计算总氮浓度 CN。VmCN式中： CN(mg/L)；m 试样含氮量，mg ； V 试样体积， L。六、思考题1. 实验的干扰离子有哪些？如何消除？若空白较高，原因？2.总氮与硝氮+氨氮的和大小比较，若小于硝氮+ 氨氮的和，原因？3.查国标 CB3838-2002 和污水排放标准，判断是否超标？七、注意事项1）参考吸光度比值 A275/A22010020时，大于 20%应鉴别。220-280nm，每隔 2-5nm 测吸光度，在 220 和 275nm 处不应有折线出现。2）玻璃具塞比色管的密合性应良好。使用压力蒸汽消毒器时，冷却后放气要缓慢；防开裂；3）测定悬浮物较多的水样时，在过硫酸钾氧化后可能出现沉淀。遇此情况，可吸取氧化后的上清液进行测定。4）使用高压蒸汽消毒器时，应定期校核比力表；5）无氨水；每升水中加入 0.1ml 浓硫酸，蒸馏。收集馏出液。
