1、人内皮素-1（ET-1）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T8pg/ml-200pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中内皮素-1（ET-1）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人内皮素-1（ET-1）水平。用纯化的人内皮素-1（ET-1）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内皮素-1（ET-1），再与HRP标记的内皮素-1（ET-1）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素-1（
2、ET-1）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人内皮素-1（ET-1） 度。 试剂盒 成 1 30 洗涤液 20ml1 7 终 液 6ml1 2 酶标试剂 6ml1 8 标准品（400pg/ml） 0.5ml1 3 酶标包被板 12孔8 9 标准品 液 1.5ml1 4 样品 液 6ml1 10 说明书 1 5 显色剂A液 6ml1 11 板 2 6 显色剂B液 6ml1/ 12 1 标本 1 标本 后 ， 相关 ， 后应 实验。 试验，标本于-20currency1，“应免复fifl 检测含 的样品，NaN3制 过化物酶的（HRP）。”作1. 标准
3、品的 ：本试剂盒 供原 标准品 ，用 下在试中 。200pg/ml 5标准品 150l的原 标准品加入150l标准品 液100pg/ml 4标准品 150l的5标准品加入150l标准品 液50pg/ml 3标准品 150l的4标准品加入150l标准品 液25pg/ml 2标准品 150l的3标准品加入150l标准品 液12.5pg/ml 1标准品 150l的2标准品加入150l标准品 液2. 加样：分 孔（ 孔 加样品及酶标试剂， ”作相）、标准孔、测样品孔。在酶标包被板标准品准 加样 50l，测样品孔中 加样品 液40l， 后再加测样品10l（样品最终 度 5 ）。加样样品加于酶标板孔底，
4、量 及孔 ， 。3. ：用 板 板后 37 0分 。 4. 液：30 洗涤液用 水30 后 用5. 洗涤：心 板 ， 液体，孔加 洗涤液， 30 后 ， 复5次， 。6. 加酶：孔加入酶标试剂50l， 孔 。 7. ：”作3。8. 洗涤：”作5。9. 显色：孔 加入显色剂A50l，再加入显色剂B50l， ，37光显色分 10. 终 ：孔加终 液50l，终 应（ 蓝色转黄色）。11. 测定： ，450nm波长依 测量孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终液后15分 内 。”作程 总结：计算标准物的 度 横坐标，OD值 纵坐标，在坐标纸绘出标准曲线，据样品的OD值由标准曲线查出相应的 度；再乘 数；
5、或用标准物的 度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，样品的OD值代入方程式，计算出样品 度，再乘 数，即 样品的实际 度。 注意事项1 试剂盒从冷藏环境中 出应在室 平衡15-30分 后方使用，酶标包被板开 后 未用完，板 应装入 中currency1。2 洗涤液会有结晶析出， 在水浴中加 助溶，洗涤 影响结果。3 加样均应使用加样器，并经常校 准 ， 免试验误差。次加样间最好控制在5分 内， 标本数量多，推荐使用排枪加样。4 请次测定的做标准曲线，最好做复孔。 标本中测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第孔的OD值），请 用样品 液 定 数（n ）后再测定，计算请最后乘 总 数（n）。5 板 只限次使用， 免交叉污染。6 底物请光currency1。7 严格 说明书的”作 ，试验结果判定必须 酶标仪读数 准.8 所有样品，洗涤液和种废 物都应 传染物处理。9 本试剂 批 分 得 用。10. 与英 说明书有异， 英 说明书 准。currency1 件及有效期1 试剂盒currency1：；2-8。2 有效期：6 月
