1、循环肿瘤 DNA的检测及临床意义肿瘤诊断方法l血清标志物：蛋白类（癌胚抗原，糖类抗原，甲胎蛋白等），核酸类（ microRNA, LncRNA）l影像学诊断 (超声， CT， MRI， PET， PET-CT)l循环肿瘤细胞（ circulating tumor cell , CTC）l循环肿瘤 DNA（ circulating tumor DNA， ctDNA）循环肿瘤 DNA(ctDNA)l人体血液循环系统中不断流动的携带一定特征（包括突变，缺失，插入，重排，拷贝数异常，甲基化等）来自肿瘤基因组的DNA片段；l来源： 1、来自于坏死的肿瘤细胞； 2、来自于凋亡的肿瘤细胞； 3、循环肿瘤细胞
2、； 4、来自于肿瘤细胞分泌的外泌体；l含量低，约占整个循环 DNA的 1%，甚至只有 0.01%。ctDNA发展简史l1948年首次发现人体血液中存在着循环 DNA，癌症患者的循环肿瘤DNA则发现于 1977年。l1994年发现这些 DNA含有癌症的标志性突变，证明其来自于肿瘤。l鉴于肿瘤 DNA会流入血液，香港中文大学的卢煜明（ Dennis Lo）教授推测胎儿 DNA应该也能进入血液。 1997年证明孕妇血液中携带着男性胎儿的 Y染色体。该发现允许医生们在怀孕初期通过无创方式检测胎儿的性别，甚至筛查唐氏综合症等发育疾病。这是产前诊断领域的一次革命 。循环肿瘤 DNA的应用l肿瘤的早期诊断；
3、l肿瘤治疗方案确定；l肿瘤疗效观察；l肿瘤预后评估；l肿瘤转移风险分析；l肿瘤复发监测。ctDNA优势l 无创、无损、实时、多次；l 当不能获得肿瘤组织信息时，可以开展 “液体活检 ”；l 假阳性率低，灵敏度高，准确度高，可用于肿瘤的早期诊断；l 能够对肿瘤的演化和适应性改变进行监控；l 能够对肿瘤病人的治疗效果进行实时监控（尤其在追踪肿瘤转归、转移和复发等方面），并进行个性化的治疗方案指导（如个性化靶向药物用药，个性化化疗等）。ctDNA如何发挥诊断、监测、预后评估的功能？循环 DNA水平变化循环 DNA基因修饰变异循环 DNA完整性点突变杂合性缺失 微卫星不稳定性超甲基化研究热点近 10年
4、 ctDNA相关发表文章数（ pubmed数据库）NEJM： 4篇PNAS： 7篇JAMA： 1篇Sci Transl Med： 6篇Cancer research:12篇Clin Cancer Res:28篇l 利用数字 PCR检测 640例不同癌症病人的血浆 ctDNA，在超过 75%的病人血液中检测到 ctDNA，原发癌检出率约为 50%。l 在结肠癌，胃癌，胰腺癌，乳腺癌中， ctDNA检出率分别为 73%, 57%, 48%, 50% 。ctDNA在不同恶性肿瘤中的检测l 相对于原发癌， ctDNA在转移癌中检出率更高，且分期越高， ctDNA检出率也更高；l 可用于耐药突变的检测；l ctDNA是普遍适用的、敏感和特异的标志物 ,可用于不同类型癌症患者的临床监测。ctDNA在不同恶性肿瘤中的检测
