流式细胞仪实验方法及常见问题分析中心实验室 李 琳2012.09.19 流式细胞仪 ( Flow Cytometer) 是集多种技术为一体的新型高科技仪器。 流式细胞术 (flow cytometry, FCM)是以流式细胞仪为检测手段,对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒同时进行多参数定量分析和分选的高新技术。 研究对象 : 各种细胞、微生物、人工合成微球等。BD FACSAria 中心实验室的流式能做什么? 流式实验需要做哪些准备和工作?流式细胞仪检测范围细胞结构 细胞功能细胞大小细胞粒度细胞表面面积核浆比例DNA含量与细胞周期RNA 含量蛋白质含量染色体分析特异性抗原 (细胞表面 /胞浆 /核)细胞活性细胞因子酶活性激素结合位点细胞受体凋亡 在上述信号基础上的细胞分选(未开展分选)单细胞标本的制备标记荧光抗体检 测 (老师)数据分析FCM实验流程一、单细胞标本的制备(关键步骤)6种标本来源 外周血单细胞悬液制备 新鲜的外周血是天然的单细胞悬液,需要用红细胞裂解液裂解 RBC。 培养细胞的单细胞悬液制备