1、 第十八章支原体、衣原体、立克次体 第一节支原体n 是一类缺乏细胞壁、形态上呈高度多形性,能通过除菌滤器,在无生命培养基中能生长繁殖的最小原核细胞型微生物。由于它们能形成有分支的长丝,故称之为支原体。 支原体科分支原体属和脲原体属两个属。对人致病的主要为肺炎支原体、人型支原体、生殖器支原体、穿通支原体和溶脲脲原体。除此之外,支原体还经常污染细胞培养,给实验室病毒分离、单克隆抗体制备等工作带来一定困难。一、肺炎支原体n 感染呈全球性分布,主要侵犯呼吸系统 ,借滑行运动穿过粘膜上皮细胞纤毛屏障,主要粘附因子为一类对胰酶敏感的表面蛋白,称 Pl蛋白。n 是青少年急性呼吸道感染的主要病原体,表现为上呼
2、吸道感染综合征,占非细菌性肺炎的 1 3以上。过去认为是温和的病原体,现在认为它也可引起严重的双侧肺炎和其他系统的肺外并发症,如心肌炎、心包炎、免疫性溶血性贫血、肾炎等。 微生物特性1 形态与结构 类似酒瓶状,没有细胞壁,仅有细胞膜。 G-易着色, Giemsa染色呈淡紫色。细胞膜中胆固醇含量多。所有肺炎 2株共同具有 P1蛋白,是主要特异性免疫原和血清学诊断的主要抗原。 2.抗原结构 来自细胞膜,胞膜外层蛋白质是主要抗原,常用生长抑制试验 (GIT)与代谢抑制试验(MIT)鉴定。 GIT是将吸有型特异性抗血清的滤纸片置于接种有支原体的固体培养基上,经孵育出现同型血清抑制该型支原体生长现象。
3、MIT是将支原体接种在含有抗血清培养基中,若抗体与支原体型一致,则抑制该支原体不能分解葡萄糖产酸。此两种方法可将支原体分成若干血清型。3培养特性 以二分裂繁殖,繁殖较慢;生长需要胆固醇;反复传代后呈 “ 荷包蛋 ”状菌落,可迅速溶解哺乳动物红细胞。4生化反应 肺炎支原体可根据是否能利用葡萄糖、水解精氨酸和尿素来与其他支原体进行鉴别。 5.抵抗力1.对热的抵抗力一般与细菌相似。耐冷,-70 或液氮可长期冻存 , 4 放置也不要超过 3天。2.支原体对干燥敏感,干燥的标本难以分离出支原体。没有细胞壁青霉素不敏感。 检验程序1 .标本采集 肺炎支原体有粘附细胞作用,以咽拭子标本为好,取材后宜立即接种。2. PCR法快速、敏感和特异,目前某些临床实验室以特异性引物通过这一技术从患者痰中检测肺炎支原体 DNA。 3. 电子显微镜观察无细胞壁,易与细菌鉴别。 4.分离培养n 以牛心消化液为基础 ,加 20小牛血清及新鲜酵母浸液制成的液体或固体培养基。加入青霉素 ,可防止杂菌生长。初次分离生长缓慢,在含 5 C02下培养, 10天长出油煎蛋状菌落。能发酵葡萄糖产酸,不能利用精氨酸与尿素,可还原美蓝。分离培养阳性率不高,对临床诊断意义不大 , 但对流行病学调查有重要意义 。