1、有效成分研究的一般途径确定研究对象调 查 研 究成 分 预 试成分提取分离活性成分筛选结 构 测 定临床试验( 期) 类 新 药临床调查药材调查文献查阅活性部位活性成分结构改造人工合成 期临床药效学研究毒理学研究药代动力学研究 类新药提取方法 1 溶剂提取法 2 水蒸汽蒸馏法 3 其他方法:升华法,压榨法,吸收法,酶提取法分离方法一、溶剂法1 固 -液 溶剂分离法 :部位分离 2. 两相溶剂萃取法 ( 1)简单萃取法 被萃取液的准备:水悬浊液密度为 1.1-1.2之间 萃取剂的选择及其用量,次数 乳化及其破坏方法 ( 2)逆流连续萃取法 萃取效率高,溶剂用量少,不乳化,可工业化。 ( 3) 液
2、滴 逆流分配法 适用于分离同分异构体或同系物及多肽,蛋白质等高分子化合物,热不稳定化合物。二 .沉淀法 1、溶剂沉淀法(分级沉淀法) 2、 酸碱沉淀法 3、专属 试剂沉淀法: 如胆固醇、明胶、雷氏铵盐 4、盐析法 :如氯化钠、氯化铵、硫酸铵、硫酸钠、硫酸镁三、分馏法 利用液体混合物中各成分的沸点的不同而分离的方法 。四、结晶与重结晶法 ( 1)结晶的条件( 2)重结晶溶剂的选择 ( 3)重结晶过程和析晶方法 ( 4)微量重结晶( 5)结晶纯度的判断五、透析法与超滤法 用于纯化皂苷、蛋白质、多糖、多肽 透析膜:动物性膜,合成膜。分离量小,实验室用 超滤膜:直径 110nm, 小分子能滤过。多为合成膜,分离量大,适用于工厂和实验室六、色 谱 分离法一、分类按分离过程原理不同可分为:吸附色谱法分配色谱法凝胶渗透色谱法离子交换色谱法亲和色谱法按流动相类型来分 : 气相色谱 (GC); 流相色谱 (LC) 按操作方式来分 : 1、薄 层色 谱( TLC) 薄层色谱: 操作、展开方式及注意事项 制备型薄层色谱( PTLC): 特点、操作过程 离心薄层色谱法( CTLC) 高效薄层色谱( HPTLC) : 吸附剂粒度范围更窄( 57 微米)。并采用特殊的粘合剂,分离能力较普通 TLC高,展矩短,斑点集中,分离效果好,高效微量快速。