1、 by Dr Baiqing LI免疫学教研室 流式细胞仪在临床检测和临床科研中的应用l 李 柏 青l 蚌埠医学院免疫学教研室-1-All rights reserved by Dr Baiqing LIBengbu Medical College Department of Immunology= 流式细胞仪和流式细胞术概述= 流式细胞仪的工作原理和测量参数= 流式细胞仪在临床检测和科研中的应用= 免疫学检测和科研应用= 血液病检测和科研应用= 肿瘤学检测和科研应用流式细胞仪的基本工作原理以及在基础和临床科研中的应用2All rights reserved by Dr Baiqing LIB
2、engbu Medical College Department of Immunology一、流式细胞仪和流式细胞术的基本概念= 流式细胞仪 (Flow Cytometer, FCM):是集合光电子物理,光电测量技术, 液流技术,计算机技术等现代高科技技术为一体的细胞测量和分析仪器。3All rights reserved by Dr Baiqing LIBengbu Medical College Department of Immunology一、流式细胞仪和流式细胞术的基本概念= 流式细胞术 (Flow Cytometry, FCM):是应用流式细胞仪,对处于快速流动液体中的细胞或生物
3、颗粒进行多参数、快速测量和定量分析,以及分选的技术。4All rights reserved by Dr Baiqing LIBengbu Medical College Department of Immunology一、流式细胞仪和流式细胞术特点= 多参数测量和分析(散射光和荧光) ;= 快速测量和分析= 每秒可达 1000-10000个细胞= 分选纯度可达 99%以上。= 获取的数据分析结果更具有统计学意义;= 通常测量的对象如各种细胞细胞必须处在单个细胞悬液中。此外,也可测量微生物等生物颗粒,或者工合成微球非生物颗粒,5All rights reserved by Dr Baiqing
4、 LIBengbu Medical College Department of Immunology台式机 FACSCalibur= 双激光488nm635nm= 四荧光参数= 分选、浓缩系统67All rights reserved by Dr Baiqing LIBengbu Medical College Department of Immunology大型机 FACSVantage SE= 科研型= 八荧光参数= 高速分选= 多路分选8All rights reserved by Dr Baiqing LIBengbu Medical College Department of Immunology流式细胞仪与荧光显微镜比较流式细胞仪 荧光显微镜流动的细胞 静止的细胞样本数量大 数量少高速分选 样本难以再利用细胞群体特征量分布 可揭示细胞内部结构信息9All rights reserved by Dr Baiqing LIBengbu Medical College Department of Immunology二、流式细胞仪的工作原理和测量参数l光路系统 :激光光源,光路系统(透镜、滤光片)l电子系统: 光电倍增管( PMT),补偿电路l液流系统 : 鞘液系统,样品流动系统l数据系统: 计算机,数据测量和分析软件 。l细胞分选系统(一) 流式细胞仪的结构 10