1、胰岛素生产工艺的发展过程20年代动物胰岛素70年代纯化胰岛素80年代人胰岛素和半合成胰岛素2000年代胰岛素类似物1胰岛素应用的研究（ 1） l 1 1922年从动物胰脏提取胰岛素并应用于患者治疗成功l 2 纯度不断提高，免疫原性不断降低l 3由短效制剂发展到中效、长效及至预混制剂2药物胰岛素应用的研究（ 2）l 1生产工艺的改进：最初的生产是将动物胰脏（牛、猪）捣碎后直接提取胰岛素。 80年代后期经过生产工艺的改进后应用基因工程技术 ,采用细菌或酵母等原料批量生产胰岛素 .l 2 给药工具的改进：给药方法和工具的改进如诺和笔、诺和灵特充、胰岛素泵l 3胰岛素分子结构的改进：胰岛素的改良品种超
2、短效的 “胰岛素类似物 ”如诺和锐的研究成功3胰岛素纯化和免疫原性研究（ 1） 我国 80年代中期以前：l 提取 将动物（猪、牛）胰脏捣碎用酸酒精提取，盐析沉淀获得 “无定形胰岛素 ”l效价 无定形胰岛素的有效成分含量为 50-60%，生物效价 10u/mgl付作用 全身及局部的过敏反应甚多，局部注射可发生脓肿4胰岛素纯化和免疫原性研究（ 2）国外研究过程：l -1926年首先用结晶法纯化无定形胰岛素l -1934年采用锌离子使胰岛素形成六聚体的结晶再离心沉淀获得纯度 90%以上，生物效价25u/mg的 “结晶胰岛素 ”（我国至今仍在使用）l -1956年创建了灵敏度极高的免疫分析方法，查出约
3、 90%的使用结晶胰岛素的患者血中存在胰岛素抗体（主要由于结晶胰岛素中的杂质所引起）使用药量增加5动物胰岛素免疫原性的实质l 1动物胰岛素中杂质的异蛋白性质（相对于人体），刺激人体产生各种异蛋白抗体产生免疫反应（过敏）l 2胰岛素中动物蛋白和锌离子的免疫佐剂作用可致胰岛素抗体生成6单峰纯胰岛素l a峰 胰脏杂质蛋白峰，分子量 1500l b峰 猪胰岛素原及其中间代谢物峰，分子量 9000-10000l c峰 猪胰岛素单体峰，分子量为 6000l 所谓单峰纯胰岛素就是采用分子筛和阴离子交换树脂的层析法技术除去 a峰和 b峰所得到的纯度较高的 c峰胰岛素。7国产结晶胰岛素层析图a bc8单组份胰岛素反复的层析再加上多次的纯化可得到在聚丙稀酰凝胶上呈单带的 “单组份胰岛素 ”（前体胰岛素及杂质的含量较低）9动物胰岛素临床应用观察l 不同纯度动物胰岛素应用观察药用胰岛素 例数 动物胰岛素原抗体 胰多肽抗体 胰岛素抗体正常人 43 0 0 0未使用胰岛素 192 0 0 0用普通动物胰岛素 40 45% 32.5% 90%使用高纯度胰岛素 24 0 0 37.5%10
