1、许冰莹, 昆明医科大学法医学院 Tel:0871-65922837；13769175605Email:bingying_,这究竟是怎么回事,亲 权 鉴 定,paternity testing昆明医科大学法医学院,一、亲权鉴定的历史二、亲权鉴定的概念与原理三、亲权鉴定中遗传标记的选择四、亲权鉴定的程序五、父权关系的认定与排除六、亲权鉴定的伦理道德问题,一、亲权鉴定的历史,十二铜表法 依据妊娠月数推定父权。,谲术察情 所罗门的审判,滴骨认亲法 谢承会稽先贤传（三国）,滴血认亲法 宋慈洗冤集录（宋朝）,生育能力和性交能力 （中世纪的欧洲）,亲子鉴定历史,所罗门的审判,谲术察情,在我国，有关亲权认定的
2、最常见的方法之一为“谲术察情”，即先施诡计，后观其真情并作出判断。这种方法和前面所说的所罗门断案法如出一辙。,十二铜表法,公元前449年左右，相当于我国春秋战国时期，古罗马制定了成文法典十二铜表法，它记载有最早的有关“亲子鉴定”的法律条文。即依据妊娠月数推定父权。,滴骨验亲法,三国时代（公元220280年） 谢承著会稽先贤传,合血法,南宋（公元1247年）宋慈著洗冤集录,现代亲子鉴定,血型检测（Blood test ）,ABO血型、HLA分型,DNA检验,RFLPs,VNTRs,STRs,SNPs,mtDNA分析,一、概念,亲子鉴定，就是根据人类遗传学的理论和实践，应用医学、生物学和遗传学的理
3、论和技术，判断有争议的父母与子女之间是否有亲缘关系。,亲权鉴定（kinship identification）： 应用生物学的理论和技术，判断有争议的父母与子女之间, 同胞兄（姐）弟（妹）之间，祖孙等隔代个体之间，或者叔侄、姨甥等旁系个体之间是否具有亲缘关系。,常见的涉及亲子鉴定的情况,民事： 私生子；丈夫怀疑；怀疑医院调错婴儿; 儿童 、亲属失散；财产继承；灾难、意外事故、恐怖袭击遇难者身源认定刑事： 强奸致孕 ；拐骗儿童、妇女；犯罪嫌疑人确认 行政： 违 纪 超 生涉外： 涉 外 婚 姻 移 民,判断有争议的父母与子女之间是否存在亲缘关系的鉴定称为亲子鉴定（parentage diagno
4、sis；paternity test）。 大多数的亲子鉴定是判断有争议的父亲（或称为可疑父亲；被控父亲）与子女间的亲缘关系，故又可称为父权鉴定（paternity test）。 此外，亲权鉴定还包括同胞关系、祖孙关系、叔侄关系等同胞、隔代或旁系个体间血缘关系的鉴定。,二、亲权鉴定的原理,复杂遗传特征（Complicated genetic characteristics）：身高、长相等； 单纯遗传特征（ Simple genetic characteristics ）：血型、DNA 多态性。,亲权鉴定理论依据非遗传特征,妊娠期限：28015天生育能力和性交能力,单纯遗传特征： 孟德尔遗传标记，
5、 出生时已完全表现并且终生不变 复杂遗传特征： 毛发颜色、皮肤颜色、 耳毛、 脸型、 短指和多指畸形,亲权鉴定理论依据遗传特征,遗传标记,红细胞血型ABO，Ph, MN, Kell , Duffy，,白细胞血型HLA-A，-B，-C，-D，-DP，-DQ，-DR。,蛋白型Hp，Gc,Bf,Tf,a-TA,C2,C4,同工酶型PGM，EsD，GIOI，ACP，AK，ADA,线粒体DNA,核DNA,haptoglobin ，Hp（结合珠蛋白分型）,蛋白质多态性（Protein polymorphism）,EsD分型,同工酶的多态性（Isozyme polymorphism ）,DNA分析（DNA
6、analysis）,DNA指纹（DNA fingerprints ）,PCR-VNTR,PCR-STR,mtDNA测序（MtDNA sequencing ）,根据孟德尔分离律和自由组合定律，在配子细胞形成时，成对的等位基因彼此分离，分别进入各自的配子细胞。精、卵细胞受精形成子代，孩子的两个基因组一个来自母亲，一个来自父亲；相应的，同对的等位基因也是一个来自母亲，一个来自父亲。,亲子鉴定的基本原理,Fertilization,Fathers Sperm,Mothers Egg,Childs Cell,A4A5,A2A2,A1A3,A2A3,A3A3,A1A2,A型,A型,A型,M1,AF1,不能
7、排除,M2,AF2,A型,O型,B型,排除,ABO血型的遗传,孩子的一对等位基因必定一个来自父亲，一个来自母亲； 孩子不可能带有双亲均没有的等位基因； 除了在双亲都带有相同基因（如A）的情况下，孩子不可能带有两个相同基因（AA）； 某个基因在双亲中的一方或双方为纯合子时（AA），必定要在孩子中表现出来（A）。 常染色体上的遗传标记，遵循孟德尔遗传规律,亲权鉴定原理,亲子鉴定原理,在确认孩子的某个等位基因必定来自其生父，而假设父亲不带有这个基因时，可以排除他是孩子的生父；在确认孩子的某些等位基因必定来自生父，而假设父亲也带有这些基因时，则不能排除他是孩子的生父。这时，可以计算他是孩子生父的可能性
8、有多大。,用于亲权鉴定的遗传标记的特点单基因遗传，常染色体上符合孟德尔遗传规律；在个体发育早期（婴儿期、胎儿期或更早）即能被检出，遗传标记的分型终生不变；具有遗传多态性，遗传背景清楚；遗传稳定，基因突变率及重组率相对较低；检测方法标准化；体细胞稳定性。,亲子鉴定应用的DNA遗传标记,（1）常染色体遗传标记，按孟德尔遗传规律传递；（2）Y-染色体遗传标记，按父系遗传方式传递；（3）mtDNA遗传标记，按母系遗传方式传递；（4）X-染色体遗传标记。,孟德尔（Mendel ）方式遗传,双亲均无的等位基因，孩子不会有；孩子必定得到双亲各方一对等位基因中的一个；除非双亲都有相同的等位基因，否则孩子不可能
9、是该等位基因的纯合子；某个基因双亲之一或双方是纯合子时，则孩子必定会表现出来。,父系遗传（Paternal genetic）,Y-染色体非重组区遗传标记，按父系遗传方式传递，遗传规律为：男性子代的Y-DNA分型必定与父亲的相同；同一父系的所有男性同胞的Y-DNA分型一致。,母系遗传（Maternal genetic）,mtDNA按母系遗传方式传递，遗传规律为：子代（男或女）的mtDNA分型与母亲的分型一致；同一母系的所有同胞的线粒体DNA分型一致。,否定父权 （Deny the patriarchal）,父权否定的两种情况：孩子带有母亲或AF均不具有的一个基因；孩子没有AF必定要传递给后代的一
10、个基因。,A4A5,A2A2,A1A3,A2A3,A3A3,A1A2,当孩子具有某种G.M，而母亲没有，这个G.M必定来自父亲，如果AF没有这种G.M，他应被否定为生父,当AF查出一对G.M，其中之一必定传递给孩子，如果孩子没有这对G.M中的一个，则AF不是这个孩子的生父,用实验方法检查有无某种遗传标记（G.M）,直接排除（Rule out directly）,A1A4,A2A2,A1A3,A2A3,A3A3,A1A2,孩子是某种G.M的纯合子，但这种G.M AF不具有，AF可被否定为生父,孩子缺乏某种G.M，而AF却是这种G.M的纯合子，此时AF可被否定为生父,基于实验结果为阴性，推断为纯合
11、子,间接排除（Indirect rule out）,A4A5,A2A2,A1A3,A2A3,A3A3,A1A2,错误否定父权的风险,（一）突变率 （Mutation rate ）1、突变率：每代细胞发生突变的百分率。亲子鉴定选用遗传标记突变率应低于0.2%。 2、 突变率影响因素（1）基因结构（碱基结构与重复次数）结构均一，重复次数多，突变率高；（2）性别 父方突变高于母方突变；（3）无效基因 基因突变发生在引物结合区，影响靶基因扩增。,Mutation Observed in Family Trio,Normal Transmission of Alleles (No Mutation),P
12、aternal Mutation,Mutation rates of 15 STR loci observed in 13123 meiosis,无关个体亲缘关系16 个位点不排除检测结果,（二）遗传变异 （Genetic variation ）,1、 沉默基因 原因：调节基因缺如或被抑制，结构基因缺如或功能不良，等位基因替换2、 弱抗原3、 基因互换4、 CIS-AB效应5、 生理性变异6、 病理性变异,父权肯定,父权排除,F1 F2 S M,Which one is Father ?,F1 F2 S M,F1 F2 S M,双胞胎检测,M S2 S1,D1,D2,亲子鉴定可靠性的保证,（1
13、）标准化实验方法所用基因座已有文献报道（名称、染色体定位、基因结构、遗传方式、种属特异性等相关特征以及检测灵敏性、稳定性等已有研究报道）；有可供使用的群体遗传数据，包括有关人群的等位基因频率或单倍型频率； 标准化实验方法,（2）排除父权和认定父权的标准,1）排除父权的标准 经标准化实验检测遗传标记，假定为父亲的男子不能提供给孩子必需的等位基因，在不存在突变的前提下，可以排除假定父亲的父权，即可以断定他不是小孩的生物学父亲。 为了避免潜在突变影响，排除父权至少应根据二个以上遗传标记。任何情况下都不能仅根据一个遗传标记排除父权。2）认定父权的标准 经标准化实验检测遗传标记，假定为父亲的男子不能被排
14、除父权。计算概率后如同时满足认定指标，可以认定假定父亲的父权，即可以断定他是小孩的生物学父亲。,四、亲权鉴定的程序,1、鉴定的委托与受理： 书面的鉴定委托书、相关材料2、样本采集3、样本编号与登记4、实验室检测5、结果分析6、出具鉴定报告,血液精液口腔粘膜细胞（口腔拭子）胎儿羊水尿液毛发牙齿骨骼组织脐血石蜡包埋组织切片,亲权鉴定的样本,被鉴定人在三个月至半年之内未接受过输血接受骨髓或脐血移植的病人，不宜采集血液询问被鉴定人中是否有双胞胎慎用肿瘤组织,样本采集中的注意事项,案情介绍：委托单位、委托日期、鉴定要求、送 检检材、鉴定地点、鉴定日期检验过程：检材处理方法及检验方法结果分析：阐述理由和因
15、果关系，解答鉴定事由及 有关问题鉴定结论：根据结果及科学分析的结论结 尾：司法鉴定人的技术职务、并签名 司法鉴定人签名处加盖司法鉴定章 司法鉴定专门机构名后文书的制作时间,鉴定报告,五、父权的否定与肯定:,非父排除概率 （probability of exclusion，PE）累积非父排除概率 （cumulative probability of exclusion， CPE）父权指数 （paternity index， PI）父权相对机会 （relative chance of paternity，RCP）,非父排除概率,非父排除概率指的是通过检测某一个遗传标记系统，能将不是生父的假设父亲排
16、除的机会. 它是衡量一个遗传标记排除非父能力的一个客观标准，表示在所有非父被控为生父的男子中，用该标记否定父权有多大的可能性。,累积非父排除率1、概念 检测多个遗传标记系统，能将不是生父的假设父亲排除的机会。2、前提：遗传标记系统相互独立。3、计算 根据概率乘法定律，独立事件同时发生的概率等于独立事件的概率乘积。,排除概率计算,排除概率(PE,EP)确切地说应该是非父排除概率，指不是孩子生父的男子能被遗传标记排除的概率。目前常用的DNA遗传标记,如STR一个基因座有多个等位基因,并且均为显性。设Pi代表群体中第i个等位基因频率,Pj代表群体中第j个等位基因频率, 并且等位基因i不等于等位基因j
17、，则排除概率为：,PE 式中n为某一基因座的等位基因数目，Pi、Pj分别为第i个、第j个等位基因的表型频率。,上述公式是对于一个基因座而言的。亲权鉴定不止使用一个基因座，有必要知道使用的全部遗传标记对于不是孩子生父的男子，否定父权有多大的可能性，即累计排除概率(cumulative probability of exclusion，CPE)。计算累计排除概率的前提条件是一个遗传标记系统独立于另一个系统。累计排除概率计算公式为：,CPE1（1PE1）（1PE2）（1PE3）（1PEi）1,式中PEi为第i个遗传标记的PE值， n为遗传标记系统排除概率的数目。可根据各实验室应用不同试剂盒的基因座，
18、按其给出的PE值，代入公式求出累计排除概率即亲子鉴定的系统效能。,肯定父权 （Certainly the patriarchal ）,（一）亲权指数(PI)计算 1、概念 假设父提供生父基因成为孩子生父的可能性（假设为X）和随机男人提供生父基因成为孩子生父的可能性（假设为Y）的比值叫作亲权指数（paternity index,PI），PIX/Y。 换言之，PI代表AF具备生父基因成为孩子生父的可能性是随机男子具备生父基因成为孩子生父的可能性的多少倍。,2、计算步骤,（1） 测定母亲、孩子与AF的表型；（2） 确定生父应该给孩子的必需基因；（3） 计算母亲给孩子必需基因概率（f）；（4） 计算随
19、机男子给孩子必需基因概率（g）；（5） 计算AF给孩子必需基因概率（c）；（6） AF给孩子必需基因成为孩子生父概率X= c*f；（7） 随机男子给孩子必需基因成为孩子生父概率Y= g*f；（8） PIX/Y=（c*f）/（g*f）,亲缘关系鉴定个案中符合遗传规律的父权指数（PI）计算,父权指数的计算举例如下：检测遗传标记结果AF表型为P，孩子的表型为P，母亲的表型为PQ。以p为P基因频率，q为Q基因频率，则：,PI的计算举例如下：例1.检测遗传标记结果AF表型为P，孩子的表型为P，母亲的表型为PQ。以p为P基因频率，q为Q基因频率，则：XAF提供P基因概率母亲提供P基因概率10.50.5Y随
20、机男子提供P基因概率母亲提供P基因概率p0.50.5pPI0.5/ 0.5p1/p,亲缘关系鉴定个案中不符合遗传规律的遗传标记时的父权指数(PI)计算,如果母亲的表型为PP, 孩子的表型为PQ, 被检测男子表型为QR, 其中Q 比Q 小或大一个或2个重复单位(s=1 或 2)。为该基因座平均突变率。q为等位基因Q的频率。如果突变为1步(s=1), 则: PI=X/Y = /(4q) 如果突变为2步(s=2), 则: PI=X/Y = /(40q) 以此类推,具体计算实例:(以D13S317为例，平均突变率为0.002),表中P7, P8, P9为相应等位基因7，8，9的频率,1、实验使用的遗传
21、标记累计排除概率应等于或大于0.9999。累计排除概率按公式计算。2、为了避免潜在突变影响，任何情况下都不能仅根据一个遗传标记不符合遗传规律就排除父权。,3、检测的遗传标记均需计算父权指数，包括符合和不符合遗传规律的遗传标记。任何情况下都不能为了获得较高的父权指数，将检测到的不符合遗传规律的遗传标记删除。,4、在满足1、2 、3和4前提下，被检测男子的累计父权指数小于0.0001时，可以排除被检测男子的父权。鉴定意见可表述为：被检测男子不是孩子的生物学父亲, 从遗传学角度已经得到科学合理的确信。,5、在满足1、2 、3和4前提下，被检测男子的累计父权指数大于10000时，支持被检测男子是孩子生
22、物学父亲的假设。鉴定意见可表述为：被检测男子是孩子的生物学父亲, 从遗传学角度已经得到科学合理的确信。6、在不能满足上述指标时，应当通过增加检测的遗传标记来达到要求。,在鉴定父子关系时，增加检测的遗传标记如果为Y染色体遗传标记，其基因频率不能采用概率累乘。所用的全部Y染色体基因座必须作为一个整体用其单倍型频率带入计算。同时，Y染色体遗传标记必须与常染色体遗传标记一起使用。,在鉴定母亲与子女关系时，增加检测的遗传标记如果为线粒体DNA（mtDNA）遗传标记，其基因频率不能采用概率累乘。所用的全部mtDNA基因座必须作为一个整体用其单倍型频率带入计算。同时，mtDNA遗传标记必须与常染色体遗传标记
23、一起使用。,如果在鉴定书里使用其他数学或者词语的表达式时，应定义并解释清楚，使委托人或法庭了解其意义。如要将父权指数值转换为传统使用的父权相对机会, 必须同时给出转换时所采用的前概率。例如某案父权指数为10000时，可以表述为本案父权指数为10000，在假定父权前概率为0.5时，父权相对机会为0.9999。,在5和6中的鉴定意见是以不考虑双胞胎或者近亲情况为前提的。近亲情况应该采用另外的公式，并需全面、系统结合其他因素做综合分析。如果结果是非决定性的，例如累计父权指数小于10000而大于0.0001，不能采用5和6的表述。应对问题的性质给予解释，说明尚需要何种附加实验。,排除父权和确信父权的标
24、准,1. 实验使用的遗传标记累计排除概率应等于或大于0.9999。2. 为了避免潜在突变影响，任何情况下都不能仅根据一个遗传标记不符合遗传规律就排除父权。3. 检测的遗传标记均需计算父权指数，包括符合和不符合遗传规律的遗传标记。任何情况下都不能为了获得较高的父权指数，将检测到的不符合遗传规律的遗传标记删除。,D7S820、D13S317、D2S1338排除,CSF1PO、TPOX、TH01、D16S539、D2S1338、D8S1179、D1S518、vWA、HLA-DRB1排除,由于突变或其他因素的存在，国际上对亲权鉴定的排除提出一些建议，主要是： 、只有一个遗传标记不符合遗传规律，不能轻易
25、作出排除结论，必须加测其他系统。 、2个STR基因座或同一染色体上的两个遗传标记不符合遗传规律，需慎重对待，宜加测遗传标记后再具体分析。 、有3个及以上独立遗传关系（非连锁）的遗传标记不符合遗传规律，则可作出排除亲子关系的结论。,表型频率（Phenotypic frequency ）计算公式（表型频率=基因型频率）,在Hardy-Weinberg平衡前提下：纯合子P的表型频率为p2，杂合子PQ的表型频率为 2pq。其中p、q 分别为等位基因P、Q的等位基因频率。,个体识别（Individual identification）的证据强度（似然率，likelihood ratio, LR）,LR= LR=其中P(X)代表表型组合X的组合概率。P(X) = P1P2P3PiPi为第i个基因座的表型频率。,爸妈谁要我 ？,六、亲权鉴定的伦理道德（Ethical and moral ）问题,司法公正性、社会稳定性、职业道德,课堂总结,亲权鉴定的原理 父权的肯定与否定； 遗传标记突变及解决策略。,重点,难点,谢谢!,
