白血淋巴瘤免疫分型.ppt

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资源描述

1、白血病 /淋巴瘤免疫分型1流式细胞术的基本概念= 流式细胞术( Flow Cytometry, 简称 FCM) 是一种可以快速、准确、客观,并且同时检测单个微粒(通常是细胞)的多项特性的技术,同时可以对特定群体加以分选= 研究对象为生物颗粒,如各种细胞、微生物及人工合成微球等= 研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征,并加以定量2散射光信号和荧光信号= 前向角散射光( FSC, Forward Scatter)入射激光的前向散射光信号细胞相对大小及其表面积= 侧向角散射光 ( SSC, Side Scatter)入射激光 90角的 散射光信号细胞粒度及细胞内相对复杂性= 荧光素与特异抗体结合,

2、荧光抗体与细胞抗原结合越多,产生的荧光信号越强。3CD45/SS示意图4实验对照的设计 空白对照: ALL 阴性对照: 常用同型抗体对照单色分析:设同型抗体对照多色分析:同型对照,单阳性对照 (用于仪器校正) 阳性对照: 检测阴性时5空白对照和阴性对照的比较:6CD3CD8 需要用多少的标志来确证感兴趣的细胞群 ? 它们在细胞上的分布是不是很近 ? 它们是否在不同的细胞上表达不同 ? 他们表达强还是弱 ?抗原表达CD3CD4CD3CD87抗原分布 表面 ,胞浆 ,核内 是共同检测还是分别检测 ?表面表面 胞浆胞浆 核内核内CD3, CD4, CD8, tetramer cytokines DNACD3,4,8, tetramer+CytokinesCD3,4,8, tetramer+DNACytokines+DNACD3,4,8, tetramer+Cytokines+DNA 8设门08-033079设门全部 细 胞 门 内 细 胞08-0330710

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