1、TB-PP体内诊断试剂结核菌素试验结核菌素试验 （也称为 芒图试验 、 PPD试验 ）是一种诊断结核的工具。它是世界上两个主要结核菌素皮肤试验之一。一、原理简介 结核菌素试验，是基于 型变态反应原理的一种皮肤试验，是迟发型细胞 超敏反应 ，用来检测机体有无感染过 结核杆菌 。 凡感染过结核杆菌的机体，会产生相应的致敏 淋巴细胞 ，具有对结核杆菌的识别能力。当再次遇到少量的 结核杆菌 或 结核菌素 时，致敏T淋巴细胞 受相同抗原再次刺激会引起变态反应性炎症，释放出多种可溶性 淋巴因子 ，导致血管通透性增加， 巨噬细胞 在局部集聚，导致浸润。约在 48 72小时内，局部出现红肿硬节的阳性反应。若受
2、试者未感染过 结核杆菌 ，则注射局部无变态反应 发生。二、历史 1890年 罗伯特 科赫 首先公布发现结核菌素。该年 4月 4日 柯赫 在第 10届世界医学会上表示，发现一种可以预防豚鼠 结核病 ，并有治疗作用的物质。 1891年柯赫明确这种物质是结核菌的培养滤液，并命名为结核菌素（ OT）。 1908年芒图 (C.Mantoux)发现结核菌素试验方法，也称为芒图试验、 PPD试验。 1928年 美国 塞伯尔（ P.B.Seibert）从结核菌培养液中制成了一种纯蛋白衍生物结核菌素 (PPD)。 1939年，原苏联的 MA 林尼科娃创建了一种修改版的 PPD， PPD-L。在 1954年，原苏
3、联开始批量生产 PPD-L。 1941年 美国 研制成功一种标准纯蛋白衍生物结核菌素 (PPD-S)。 1958年丹麦研制成了更纯、更浓的纯蛋白衍生物结核菌素 (PPD-RT23)，为 WHO推荐制剂。（ 50年代中期， UNICEF（联合国国际儿童基金会）委托丹麦血清研究所生产一大批 PPD-RT23,共有 650.5g，其中 500g约 330亿人份供各国使用至今。）三、常用种类结核菌素 是 结核杆菌 的菌体成分，有两种： 1、 旧结核菌素 （ old tuberculin， OT）是罗伯特 柯赫（ R.Koch）首先发明的。是从生长过 结核分枝杆菌 的甘油肉汤培养基中提炼出来的结核菌代谢
4、产物，经过灭菌、浓缩形成原液，使用时再稀释成一定倍数（通常是 2000倍），使每 0.1ml含 1U。 主要成分有：（ 1） 结核分枝杆菌 蛋白；（ 2）菌体自溶成分；（ 3）菌体代谢产物；（ 4）培养基成分。三、常用种类 2、 结核菌素 纯蛋白衍生物（ purified protein derivative， PPD）则是由塞伯尔（ Seibert）首先制备。PPD菌素是一种由结核菌培养滤液制成、只含结核菌蛋白、不含结核菌体的生物制品。 结核菌素纯蛋白衍生物（ PPD）更为精纯，为纯结素，不产生非特异性反应。其制作过程：菌株 培养 灭菌、滤过 浓缩 盐析、脱盐 干燥、保存 分装。 PPD-R
5、T23是由丹麦制造供应世界许多国家使用，已经取代OT。我国从人型结核菌制成 PPD（ PPD-C； BT-PPD），又从卡介苗制成 BCG-PPD。四、试验目的 （ 1）为接种卡介苗提供依据，如结核菌素试验阳性时，表明体内已感染过结核菌，无需再接种卡介苗。阴性者是卡介苗的接种对象。 （ 2）为测定 免疫效果 提供依据：一般在接种卡介苗 3个月以后，应做结核菌素试验，了解机体对卡介苗是否产生免疫力。假如结核菌素阳性，表示卡介苗接种成功，反之需重新再进行卡介苗接种。 （ 3）用于诊断与鉴别诊断：结核菌素试验对青少年、儿童及老年人的结核病的诊断和鉴别有重要作用，是普遍运用的辅助检查手段，是测定是否感
6、染结核菌的一种传统方法。四、试验目的 （ 4）结核菌素试验还可作为婴幼儿结核病诊断的参考，测定 肿瘤 患者的非特异性 细胞免疫 功能及在未接触过 卡介苗 的人群中调查结核病的流行情况。 结核菌素试验广泛应用于：结核菌感染的流行病学调查、结核病流行情况监测、寻找高发人群（主要是儿童、少年）、选择化学预防对象、考核卡介苗接种质量、了解机体细胞免疫功能等方面。 卡介苗： “ 出生第一针 ” 。接种的主要对象是新生婴幼儿，接种后可预防发生儿童结核病，特别是能防止那些严重类型的结核病，如结核性脑膜炎。如果出生时没能及时接种，在 1岁以内一定要补种。五、试验程序 结核菌素试验方法很多，常用的是芒图（ Mantoux）氏法，即将 PPD用无菌 生理盐水 稀释成不同浓度，取 0.1毫升注射于左 前臂 掌侧前 1/3中央皮内（注意：左手）， 72（ 48h 96h）小时检查反应情况，应注意局部有无硬节，不可单独以红晕为标准。五、试验程序 我国规定以 72小时为观察反应时间， 48-96小时内皆可测量反应，常用的记录方法是将测得的硬结用平均直径（横径 毫米 数 +纵径毫米数） 2 表示，如有水泡、硬结、坏死和淋巴结炎时，应作记录。五、试验程序 阴性反应： 无硬结或硬结平均直径 5mm， 15mm。
