1、Chapter 2Interrupted Genes断裂基因断裂基因2.1 Introduction . 简介简介 真核生物基因组包含的真核生物基因组包含的 断裂基因断裂基因 由间隔的由间隔的 外外显子显子 (exon表现在最终的表现在最终的 RNA产物中的序列产物中的序列 )和和 内含子内含子 (intron 从初始转录物中去除的序列从初始转录物中去除的序列 )组成组成 . 外显子序列在基因和外显子序列在基因和 RNA中的顺序是一致的中的顺序是一致的 ,但由于内含子的存在但由于内含子的存在 ,断裂基因的长度大于它断裂基因的长度大于它的最终的最终 RNA产物的长度产物的长度 .断裂基因表达成前
2、断裂基因表达成前体体 RNA, 内含子剪内含子剪切除去后切除去后 , 外显子外显子剪接连接在一起剪接连接在一起 , 而而 mRNA只含有外只含有外显子的序列显子的序列 .2.2 An interrupted gene consists of exons and introns. 断裂基因由外显子与内含子组成断裂基因由外显子与内含子组成 . 内含子只在内含子只在 RNA的顺式剪接加工过程中被的顺式剪接加工过程中被去除去除 . 只有外显子中的突变才会影响蛋白质的序只有外显子中的突变才会影响蛋白质的序列列 , 但内含子中的突变会影响但内含子中的突变会影响 RNA的剪接从的剪接从而抑制蛋白质的产生而抑
3、制蛋白质的产生 .外显子在外显子在 mRNA中的顺序与其在中的顺序与其在 DNA中的相同中的相同 , 但但是基因长度与是基因长度与 mRNA长度或蛋白质长度之间并不长度或蛋白质长度之间并不相关相关 . 基因中基因中 AB之间的距离短之间的距离短 ; 但在但在 mRNA(和蛋白和蛋白质质 )中中 AB之间的距离比之间的距离比 BC之间的距离长之间的距离长 .2.3 Restriction endonucleases are a key tool in mapping DNA. 限制性内切酶是限制性内切酶是 DNA作图中的作图中的关键工具关键工具 . 限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶 (Restr
4、iction endonucleases) 可以用来将可以用来将 DNA剪切成特定的剪切成特定的片段片段 . 用不同限制性内切核酸酶作用用不同限制性内切核酸酶作用 , 可产生一系列可产生一系列DNA片段片段 , 通过叠加方法则可用于通过叠加方法则可用于 DNA作图作图 .限制酶作用产生的限制酶作用产生的DNA 切割片段按切割片段按照它们的大小而分照它们的大小而分开开 .限制图谱表示的是限制图谱表示的是 DNA上以限定长度而上以限定长度而分开的所有位点的线性次序分开的所有位点的线性次序 . 该图确定了该图确定了酶酶 A和酶和酶 B的酶切位点的酶切位点 , 它们由单酶切和它们由单酶切和双酶切消化所
5、产生的不同片段来确定双酶切消化所产生的不同片段来确定 .2.4 Organization of interrupted genes may be conserved. 断裂基因的组成结构可能是保守的断裂基因的组成结构可能是保守的 通过限制图谱或电子显微镜技术比较基因与通过限制图谱或电子显微镜技术比较基因与它们的它们的 RNA产物产物 , 如此内含子由于额外序列的如此内含子由于额外序列的存在而能被检测出来存在而能被检测出来 , 但最终的定义是通过比但最终的定义是通过比较序列而得出的较序列而得出的 . 比较不同生物的同源基因比较不同生物的同源基因 , 我们发现内含子的我们发现内含子的位置通常是保守的位置通常是保守的 , 但是相应的内含子的长度但是相应的内含子的长度变化可以很大变化可以很大 . 内含子通常不编码蛋白质内含子通常不编码蛋白质 .比较珠蛋白的比较珠蛋白的 cDNA和基因组和基因组 DNA的限制图的限制图谱谱 , 我们发现基因有两个内含子而我们发现基因有两个内含子而 cDNA中则中则没有没有 . 在在 cDNA和基因组和基因组 DNA中中 , 外显子限制外显子限制图谱的排列是一致的图谱的排列是一致的 .
