1、一氧化碳中毒动物模型复制和形态学技术实验,形态学中心实验室,贾雪梅,1.掌握形态学实验技术基本方法和技能 2.熟悉一氧化碳中毒模型复制的基本程序3.熟悉实验论文撰写的方法与步骤4.了解图像分析和激光共聚焦显微镜技术应用,目的和要求,实验内容,通过一氧化碳中毒实验,了解复制动物模型基本过程;通过尼氏体染色,观察一氧化碳中毒对动物大脑皮质神经元结构的影响;通过免疫组化染色,观察一氧化碳对神经元内神经营养因子活性的影响;通过图像分析,对免疫组化染色结果进行定量分析。,技术路线,实验组 对照组 取材 石蜡包埋 切片 Nisslbody染色 免疫组织化学染色 共聚焦显微镜 图像分析技术,一氧化碳中毒模型
2、复制,未处理,一氧化碳中毒实验,目的和要求,1熟悉一氧化碳中毒实验方法及 操作技巧。2掌握一氧化碳吸入所致大脑皮层 结构的形态学变化。,原 理,一氧化碳中毒,红细胞内血红蛋白与一氧化碳结合,而与氧结合能力降低,进而导致组织缺氧。 脑组织缺氧可导致脑体积增大,脑沟变浅,脑回增宽,切面见点状出血;小灶状坏死;神经元变性、坏死;小胶质细胞增生、肿胀、吞噬脂质而呈泡沫状等一系列病理变化。,材 料,1动物:小鼠或大鼠; 2器材:手术刀、手术剪、解剖镊、 试管、广口瓶、制做切片的系列 仪器和设备;3试剂:一氧化碳;,操作步骤,1将动物分为2组, 把小鼠放入广口瓶内;,2实验组动物: 给予一氧化碳吸入,待小鼠出现明显呼吸困难、烦躁、晕厥时开瓶塞,使小鼠苏醒; 对照组动物: 不吸入一氧化碳;,3第二天重复上述操作, 连续四天, 致小鼠急性中毒死亡;,4. 切开小鼠皮肤, 用钳子打开颅骨, 暴露脑组织;,5分离脑膜后,进行大体观察: * 脑体积变化, * 脑沟变化, * 脑回变化, * 有无出血、坏死灶;,6取出脑组织, 置于固定液24H;,