1、 对心肌缺血再灌注心律失常起保护作用药物的药理设计试验演示目录v 背景知识v 试验原理v 试验方法v 试验材料v 试验步骤v 数据统计v 试验结果预测v 讨论 背景知识v 缺血性心脏病和急性心肌梗死已成为当今威胁人类健康的两大主要杀手，而心肌缺血损伤和心肌缺血再灌注损伤是导致这两大病的主要病因。v 缺血性心脏病是由于血液供应中断一定时间后（一般 30min)就会出现心肌细胞酸中毒，细胞器超微结构改变和功能障碍，导致不可逆性损伤甚至死亡，也称为缺血损伤。背景知识v 急性心肌梗死是由于血液供应中断一定时间后（一般 30min)，为恢复心肌功能及时提供血液，由于在闭塞的冠动脉再通，缺血区血运重建后的
2、一段时间内，可发生血压聚降，导致新功能不全，出现心律失常、猝死等病情恶化现象，也称为缺血再灌注损伤。试验原理v 氧自由基 (ORG)是心肌细胞呼吸产能过成中的副产物，包括超氧过离子，羟自由基和过氧化氢等。 OFR可引起脂质的过氧化，降低细胞膜流动性，增加它的通透性，损伤离子泵，引起细胞能量和离子稳态异常，最终导致肌细胞损伤甚至死亡。试验原理v 正常情况下，有机体存在的超氧化物歧化酶（ SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（ GSH-Px)等内源性抗氧化防御系统可将 OFR 及时清除掉，维持正常的功能。在缺氧情况下， OFR明显下降而生成的潜能增强，当在恢复供氧时， OFR剧增超过了抗防御系统的清除能力
3、，导致肌细胞损伤甚至死亡。试验方法v 采用在大鼠开胸结扎冠状动脉前降肢30min后，松扎再灌注 60造成的心脏缺血再灌注模型，以心电图监测心律失常情况，主要指标以心律出现失常的时间，持续时间及室性心动过速（ VT）、心室颤动（VF）的发生率， ST段在不同再灌注时间的变化。并测定心肌组织 SOD、 GSH-PX、及 MDA、 Ca2+的含量变化。试验材料v 试验动物： Wister大鼠 60只，雄雌各半220240g.v 试验仪器及用具：心电图机、内切式组织匀浆器、原子吸光光度计、恒流泵、手术台及手术的相关器具、橡皮管和线。v 药品与试剂：试药复方五加刺注射液（CASI）、乌拉坦、生理盐水、前
4、列腺素 E1、 MDA、 SOD及 GSH-PX测定试剂盒、钙标准溶液。试验步骤v LD50的测定，取 LD50的 1/3为试样的最大量。v 动物分组：将选好的 60只大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性前列腺素 E1m ug/kg组和 CASI A、 B、 Cmg/kg组（ A=1/2B=1/2C），其中每组10只。v 心肌缺血再灌注模型的制备：给各组大鼠胸腔注射乌拉坦 1g/kg进行麻醉，监测肢体 导联 心 电图 ，分离 气 管 并插 管， 开 胸后应 立即 进 行人工呼吸机正 压 呼吸（ 频 率 54次 /min流量每 100g体重 2ml).试验步骤v 假手 术 组 冠 状 动 脉前降肢下穿 线 不 结 扎外，其余各 组 均 结 扎冠 状 动 脉前降肢。 结 扎 30min后，松解 结 扎 线进 行再灌注， 时间为 60min.在松解的同时 ，各 组 均以恒流 泵经 股 静 脉 匀 速 输 入 药 物或生理 盐 水。
