常用工具酶简介 第一节DNA连接酶 (DNA ligase) 1 DNA Ligase1.1 概念1.2 分类根据连接反应时所需能量辅助因子的不同： 依赖 ATP的 DNA ligase 依赖 NAD+的 DNA ligase按照来源分：T4噬菌体 DNA ligase 大肠杆菌 DNA ligase热稳定 DNA ligase2 DNA ligase简介2.1 T4 DNA ligase连接类型：DNA-DNA DNA-RNARNA-RNA dsDNA的黏性末端和平末端2.2 大肠杆菌 DNA ligasedsDNA的黏性末端和平末端3 DNA ligase 催化连接反应的特点3.1 需要 3-OH 和 5-P3.2 需要 ATP或 NAD+和 Mg2+为辅助因子和激活因子3.3 被连接的是 dsDNA3.4 只能封闭缺口4 影响 DNA ligase 连接反应的因素4.1 温度黏性末端 4-15平末端 10-204.2 连接酶浓度平末端 1-2个单位黏性末端 0.1个单位 4.3 ATP浓度4.4 DNA片段末端第二节 DNA 聚合酶和反转录酶
