1、艾滋病检测技术及诊断检测依据和行业标准样品的采集和处理n 样品种类及用途n 血液标本的采集n 抗凝剂的选择n 样品的保存n 样品的运送样品种类及用途n 全血、血清、血浆、口腔黏膜渗出液、尿液及干血斑( DBS )样品可用于 HIV抗体检测。n 全血、血清、血浆、病毒培养上清液可用于 HIV抗原检测。n 抗凝全血可用于 CD4+和 CD8+T淋巴细胞测定。n 血浆、 DBS可用于 HIV-1病毒载量、基因型和耐药检测。n 淋巴细胞富集液、外周血单核淋巴细胞( PBMC)及全血可用于 HIV核酸定性与定量、基因型检测和 HIV-1分离培养。血液标本的采集n 抗凝全血:消毒局部皮肤,用有抗凝剂的真空
2、采血管抽取适量静脉血,或用一次性注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管中,轻轻 颠倒混匀 68次,备用。n 血浆:将采集的抗凝全血 15003000r/min离心 15分钟,上层即为血浆,吸出置于合适的容器中,备用。n 血清:根据需要,用不含抗凝剂的真空采血管抽取510ml静脉血,或一次性注射器抽取静脉血,转移至无抗凝剂的试管中,室温下自然放置 12小时,待血液凝固、血块收缩后再用 15003000r/min离心 15分钟,吸出血清,置于合适的容器中,备用。抗凝剂选择n CD4+和 CD8+T淋巴细胞检测: EDTA、 肝素 、枸橼酸钠n 病毒分离、核酸检测: EDTA、枸橼酸钠样品的保存n
3、 抗体检测:血清或血浆样品, 短期 ( 1周)内进行检测的可存放于 28 , 一周以上 应存放于 -20 以下。n 核酸检测: 48h内分离血浆, 4天内 检测可存放于 4 ,3个月内 存放于 -20 以下, 3个月以上 -70 以下保存。n CD4+T淋巴细胞检测:室温保存,时间不超过 24h。如果用 CD45设门,样品保存不超过 72h。样品的保存n 筛查阳性样品应及时进行补充试验,筛查阴性样品,可根据具体需要决定保存时间,建议至少保存 1个月 。特殊用途或专项项目的样品根据具体要求确定保存时间。补充试验阳性样品按照国家生物样品管理的有关规定执行。样品的运送n 标本筛查阳性( 复检需用三代
4、试剂 ),送检单位必须联系受检者,在 仔细核实 受检者身份等信息后重新采集 1份全血。将筛查阳性的血清与重新采集的全血共 2份 样品一同送至本中心。要求送检血清量不得少于 0.5ml,送检单位对重新采集的全血不得做任何处理。标本的标识须用正楷字标明受检者姓名、性别和采集时间(年 /月 /日)。n 筛查阳性的血清应装于 1.5ml冻存管内,如果没有也可装于真空采血管内,禁止使用除此之外的其他容器。样品的运送n 包装要求:应采用 WHO提出的三级包装系统第一层容器 :装样品,要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内,试管上应有明显的标记,标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料,以免碰碎。随样品应附有送检单, 送检单应与样品分开放置 。第二层容器 :要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器,可以装若干个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内,容器的材料要易于消毒处理。第三层容器 :放在一个运输用外层包装内,应易于消毒。在第三层容器外面要贴标签(数量,收、发件人)。