1、影响血液凝固的因素 【 实验目的 】观察各种因素对血液凝固的影响。 【 实验原理 】本实验采用预先去除 Ca2+制备抗凝的动物血液,在实验中复 Ca2+,观察哪些因素可以影响血液凝固的过程,从而加深对血液凝固基本过程的理解。【 实验对象 】家兔【 实验器材与药品 】 小试管、计时器、水浴箱、刻度吸管、棉花、冰块、液体石蜡、肝素 8U(置小试管内)、抗凝全血、0.18 mol/L CaCl2溶液、 0.9% NaCl注射液、 2%草酸钾溶液、 25%枸橼酸钠溶液。【 实验步骤和观察项目 】1、麻醉 : 1.5%戊巴比妥钠耳缘静脉注射麻醉,剂量 2ml/kg体重。2、固定、备皮3、颈总动脉插管4、
2、取血 :打开动脉夹,经颈动脉插管一次性采血(多次放血可能会出现血液凝固于插管内而不能再放血 ),按照每100ml血液加入 25%的枸橼酸钠 4ml进行体外抗凝。( 1)观察纤维蛋白原在凝血过程中的作用 取 2支小试管分别加入 抗凝血 35 mL,再加入 0. 18 mol/L CaCl2 35滴 ,轻摇试管混匀。将第一管 静置作为对照 ,第二管用 竹签搅动 12 min后取出竹签,用水 轻轻漂洗 ,观察竹签上是否存在纤维蛋白丝,另外观察各管内的血液是否发生凝固并比较各管之间有无差异。( 2) 血液凝固的加速或延缓 取试管 6支并作好标记,按下表准备各实验条件,复钙后各管应立即混匀并开始计时,记
3、录各管血液凝固时间并分析其原因。 表 影响血液凝固的因素 实验 条件 凝血 时间影响因素 血液 Ca2+少量棉花内表面涂 润 滑油37 水浴冰浴草酸 钾 12ml肝素 8 U抗凝血 1 mL抗凝血 1 mL抗凝血 1 mL抗凝血 1 mL抗凝血 1 mL抗凝血 1 mL0. 18 mol/L CaCl2 12滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴0. 18 mol/L CaCl2 12滴5.实验观察每隔 30s将各试管轻轻倾斜一次,观察其中的血液是否已凝固,发现其中的血液已呈凝胶状而不再流动时记录其时间 ,最后计算出各试管血液凝固所需的时间 (在本实验条件下,如超过 30分钟血液仍未凝则视为 “不凝 ”)。分析讨论1、比较第 1管(放棉花管)与第 2管(石蜡油润滑管)内血液凝固的速度,并分析产生区别的原因。2、比较第 3管( 37 管)与第 4管(冰浴管)内血液凝固的速度,并分析产生区别的原因。3、分析第 5管与第 6管内血凝方面发生变化的原因。