1、1医学细胞与分子生物学习题库标准答案一、名词解释：1高度重复基因：在真核生物细胞基因组中重复出现可达 106 次以上的 DNA 序列，称为高度重复序列基因或高度重复序列 DNA。2断裂基因：真核生物大部分基因含有内含子，基因是不连续的，故称断裂基因。3基因组：细胞或生物体的整套(单倍体)遗传物质，称为基因组。基因组的大小用全部 DNA 的碱基对总数表示。4基因：是核酸分子中遗传信息的基本单位，是指 RNA 序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列。现代分子生物学的基因概念是合成有功能的蛋白质或 RNA 所必需的全部 DNA 序列（除部分病毒 RNA） ，即一个基因不仅包括编码蛋白质或 RN
2、A 的核酸序列，还应包括为保证转录所必需的调控序列。5微卫星 DNA：6基因文库：是指含有某种生物体（或组织、细胞）全部基因的随机片段的重组DNA 克隆群体。7内含子：真核生物 DNA 分子中插入外显子之间的非编码序列。 8外显子：真核生物 DNA 分子中编码蛋白质的序列。9基因表达的调控：机体的各种细胞中含有相同的遗传信息(相同的结构基因)，但并非在所有细胞中同时表达，而必须根据机体的不同发育阶段、不同的组织细胞及不同的功能状态，选择性、程序性地表达特定数量的特定基因，这就叫基因表达的调控。 10卫星 DNA：是出现在非编码区的串联重复序列。 11基因表达：是指原核生物和真核生物基因组中特定
3、的结构基因所携带的遗传信息，经过转录、翻译等一系列过程，合成具有特定的生物学功能的各种蛋白质。表现出特定的生物学效应的全过程。 12增强子：指位于启动子上游或下游并通过启动子增强邻近基因转录效率的DNA 顺序，增强子本身不具备启动子活性。13顺式作用元件：指某些能影响基因表达但不编码蛋白质和 RNA 的 DNA 序列，按照功能分为启动子、增强子、终止子、沉默子和衰减子等。 214SD 序列：SD 序列是与细菌 16S rRNA 3， 端互补的序列。原核生物在起始密码 AUG 上游方向 4-13 个碱基之间有一段富含嘌呤的序列，其一致序列为AGGAGG，称为 SD 序列。 15分子克隆：分子克隆
4、又称为基因克隆、DNA 重组、 DNA 克隆、即应用酶学的方法，在体外将目的基因与载体 DNA 结合成一具有自我复制能力的 DNA分子（复制子、重组体） ，继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增，提取获得大量同一 DNA 分子拷贝或其表达产物的过程。 16载体：指能够将外源性 DNA（目的 DNA）片段引入宿主细胞并能在宿主细胞中进行自我复制或最终使外源性 DNA 表达的自主 DNA。17反式作用因子：指能直接或间接地识别或结合在各顺式作用元件 8-12bp 核心序列上，参与调控靶基因转录效率的一组蛋白质，也称序列特异性 DNA 结合蛋白，这是一类细胞核内蛋白质
5、因子。18粘性末端：又称为粘端，是指双链 DNA 分子在 RE 作用下，形成具有互补碱基的单链突出末端。 19Cos 位点： 20Cos 质粒：粘粒（柯斯质粒）是人工构建的、具有质粒和 噬菌体 DNA 载体双重性质的的杂种质粒。21限制性内切酶：亦称为限制性内切核酸酶，简称限制酶或内切酶，是一类能识别和切割双链 DNA 分子中特定核苷酸序列且能产生具有二重对称特异序列（回文序列）结构的 DNA 水解酶，也是原核生物所特有的酶。22cDNA 文库：以细胞的全部 mRNA 逆转录合成的 cDNA 组成的重组克隆群体称为 cDNA 文库 23质粒：质粒是存在于大多数细菌和某些真核生物细胞染色体外的具
6、有自主复制的小型环状双链 DNA 分子。任何染色体外自体复制的遗传单位，都称为质粒。24转化率：25质粒拷贝数：是指每条细菌染色体所平均具有的质粒 DNA 分子的数目。 26Klenow 片断：又名 DNA 聚合酶大片段，是由大肠杆菌 DNA 聚合酶全酶经枯草杆菌蛋白酶处理后产生出来的大片段分子。27体外重组：亦称为体外连接。即将目的 DNA 与载体 DNA 在体外相连，形成3重组体的过程，其产物常常称为重组子。重组体是由两种不同来源的 DNA 组合而成，所以又称为异源嵌合 DNA。28转化：29感受态细胞： 30衔接物： 31溶原生长： 32探针：是指带有放射性同位素、生物素或其他活性物质标
7、记的某种特定的DNA 或 RNA 片段，用于核酸杂交技术以检测待测样品中的靶序列。33核酸杂交：来源不同的两条单链核酸分子通过碱基互补可形成异源双螺旋，称为核酸分子杂交。34阳性克隆：是指目的 DNA 转化入宿主细胞的克隆。35阴性克隆36PCR：PCR 是一种体外扩增特异 DNA 片段的技术,其原理类似于 DNA 的体内扩增。它包括高温变性、低温退火、中温延伸三个基本步骤。37固相杂交：结合于某种固相上的待测样品，与溶解在杂交液中的探针进行杂交，称为固相杂交。38液相杂交： 39预杂交：为减少探针与广泛存在的非互补核酸的非特异性结合，在杂交前可用封闭物将这些非特异性位点封闭。这一在杂交前的处
8、理过程，称为预杂交。40印迹杂交：41杂交严格度42解链温度 43增色效应：DNA 变性后，DNA 溶液的紫外吸收作用增强的效应，可以作为DNA 变性的指标。44C 值：每种真核生物的单倍体基因组中的全部 DNA 量称为 C 值。45假阳性克隆 46C 值悖理：C 值与生物进化复杂性不相对应的现象，称为 C 值悖理。47基因簇： 48转基因：49. 基因家族：真核细胞的基因组中有许多来源相同、结构相似、功能相关的基4因常常按功能成套组合，这样的一套基因称为基因家族或多基因家族。50.转座子： 51假基因：在多基因家族中，某些成员并不产生有功能的基因产物，但其结构和 DNA 序列与有功能的基因具
9、有相似性，假基因常用符号 来表示。 52衰减子： 又称为沉默子，指在真核基因内能抑制基因转录的 DNA 序列，与反式作用因子相互结合而起作用。不受距离和方向的限制，并可对异源基因的表达起作用。53. 端粒：是真核生物染色体末端的一种特殊结构，由端粒 DNA 和端粒蛋白质构成。54. 端粒酶：端粒酶是一种由 RNA 和蛋白质组成的酶，属于核糖蛋白酶，是端粒复制所必须的一种特殊的 DNA 聚合酶，具有逆转录酶活性，能以 hTR 为模板，向染色体末端添加 TTAGGG 序列。55.逆转录：以 RNA 为模板合成 DNA 的过程，这与通常转录过程中遗传信息从DNA 到 RNA 的方向相反，故称为逆转录
10、作用。56.DNA 的突变：DNA 分子中的核苷酸序列发生突然而稳定的改变，从而导致DNA 的复制以及后来的转录和翻译产物随之发生变化，表现出异常的遗传特性，称为 DNA 的突变。57.DNA 的损伤：某些物理化学因子，如紫外线、电离辐射和化学诱变剂等，都有引起生物突变和致死的作用，其机理是作用于 DNA，造成 DNA 结构和功能的破坏，称为 DNA 的损伤。58.光修复（光复合）：光复合酶能特异地和嘧啶二聚体结合，在可见光下催化光化合反应，使环丁烷环回复到两个独立的嘧啶，这一过程叫光复合作用。59.重组修复：当 DNA 分子的损伤面积较大，还来不及修复就进行复制时，损伤部位因没有模板指引，复
11、制出来的子链就会出现缺口，这时可利用重组过程进行修复，称为重组修复或复制后的修复。 60.SOS 修复：是一种旁路系统，为 DNA 的损伤所诱导。其修复的结果是导致突变，是倾向差错的修复。61.切除修复：是细胞内的主要修复方式。一般 DNA 的两条链只有一条受损伤，可将损伤部分切除，根据互补链的序列对其进行修复。 62.反义 RNA：又称 mRNA 干扰性互补 RNA。 指能与特定 mRNA 互补结合的RNA 片段，反义 RNA 由反义基因转录而来。563.超基因家族：是指一组由多基因家族及单基因组成的更大的基因家族。 64.RNA 干扰( RNAi)：将与 mRNA 编码区某段序列相对应的正
12、义 RNA 和反义RNA 组成的双链 RNA (dsRNA)导入细胞，使 mRNA 发生特异性的降解，导致其相应的基因沉默(表达受抑制)。这种转录后基因沉默被称为 RNAi.65. 魔斑：鸟苷四磷酸和鸟苷五磷酸在层析谱上可检出斑点，这些斑点称为魔斑 66. 锌指：指含有一段保守氨基酸顺序的蛋白质与该蛋白的辅基锌螫合而形成的环状结构，分为锌指、锌扭（twist）和锌簇（cluster）结构。 67. 亮氨酸拉链：有些肽链 C 末端有一段 30 个氨基酸序列以 -螺旋构型出现的结构单元，每间隔 6 个氨基酸出现一个亮氨酸残基，能形成两性 -螺旋, 带电荷的亲水性氨基酸位于一侧，具有疏水性的亮氨酸残
13、基位于另一侧。两个具有这种结构的因子接触后可借助侧链疏水性交错对插，象拉拉链一样将两个反式作用因子连在一起，形成具有稳定卷曲螺旋结构的二聚体。 68.DNA 的变性：在某些理化因素作用下，核酸双链分子碱基对的氢键断裂，疏水作用被破坏，双股螺旋或发夹结构打开，有规则的空间结构被破坏，形成单链分子，称为核酸变性。即 DNA 分子由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构的现象。69. 减色效应： 70. 穿梭质粒载体：指一类由人工构建的具有两种不同复制起点和选择记号，因而可在两种不同的宿主细胞中成活和复制的质粒载体。71. 退火：降低温度，使单链靶序列与寡核苷酸引物退火。热变性 DNA 一般经缓慢冷却
14、后即可复性，此过程称之为“ 退火” 72. .DNA 的复性：指变性 DNA 在适当条件下，二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象，它是变性的一种逆转过程。73. Cot：表示复性速度与 DNA 顺序复杂性的关系。Cot l/2：在标准条件下（一般为 0.18mol/L 阳离子浓度，400 核苷酸的片段长度）测得的复性率达 50% 时的 Cot 值。74. 原位杂交：将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交，称为原位杂交。75. 基因诊断：以 DNA 或 RNA 为诊断材料，通过检查基因的存在、缺陷或表达异常，对人体状态和疾病作出诊断的方法和过程.76. DNA 多态性：在同种生物
15、不同个体的基因组中，常存在一些不影响基因功能6的 DNA 顺序变异，称为 DNA 多态性77. 溶菌生长： 78. 酵母人工染色体载体： 79. 定向克隆法：80. 融合蛋白： 81. 非融合蛋白： 82. 基因工程：又称为基因克隆、DNA 重组、 DNA 克隆、分子克隆, 即应用酶学的方法，在体外将目的基因与载体 DNA 结合成一具有自我复制能力的 DNA分子（复制子、重组体） ，继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增，提取获得大量同一 DNA 分子拷贝或其表达产物的过程。83克隆: 指含有单一的 DNA 重组体的无性繁殖系，或指将 DNA 重组体引入宿主细胞
16、建立无性繁殖系的过程84、固相杂交：结合于某种固相上的待测样品，与溶解在杂交液中的探针进行杂交，称为固相杂交。二、填空题1. 真核生物基因组 DNA 序列可分为（高度重复序列） 、 （中度重复顺序）和（低度重复序列或单拷贝序列） 。2.真核生物基因组高度重复序列包括（反向重复序列） 、 （卫星 DNA） 、 （ 卫星DNA）三种。3. 真核生物基因组高度重复序列的功能是（参与复制水平的调节） 、 （参与基因表达的调控） 、 （参与转位作用） （与进化有关） （与个体特征有关） （与减数分裂时染色体配对有关） 。4. Alu 家族的功能是（参与 hnRNA 的加工与成熟） 、 （与遗传重组及染色
17、体不稳定性有关） 、 （有形成 Z-DNA 的能力）和（具有转录调节作用） 。5. 原核生物转录水平调控的方式有（负转录调控）和（正转录调控）两种方式；前者又可分为（负控诱导）和（负控阻遏作用） ；后者可分为（正控诱导）和（正控阻遏作用） 。6. 真核生物基因表达调控包括（DNA 水平（既基因组水平）调控） 、 （转录水平调控） 、 （转录后水平调控） 、 （翻译水平调控）和（翻译后水平调控）五个层次。7. 真核生物基因组 DNA 水平的调控包括（染色质的丢失） 、 （基因扩增） 、 （基因7重排） 、 （基因的甲基化修饰）和（染色质结构对基因表达的调控）五种方式。8. 反式作用因子是一类（
18、）因子。根据作用方式可分为（通用转录因子） 、（组织特异性转录因子）和（诱导性反式作用因子）三类 。9.引起 DNA 变性的因素有（热变性） 、 （酸碱变性）和（化学试剂变性）三类 。10. 变性 DNA 的性质（溶液粘度降低） 、 （溶液旋光性发生改变）和（增色效应或高色效应） 。11.影响 DNA 复性的因素有（温度和时间） 、 （DNA 浓度）和（DNA 序列的复杂度）三类 。12. 影响杂交的因素有（核酸分子的浓度长度和复杂性） 、 （温度） 、 （离子强度） 、（杂交液中的甲酰胺浓度）和（杂交条件的严谨性） 。13. 原位杂交的特点是（ ） 、 （ ）和（ ） 。14. 端粒的作用是
19、（稳定染色体结构） 、 （防止染色体末端融合） 、 （保护染色体结构 基因）和（避免遗传信息在复制过程中丢失） 。15. 逆转录酶是多功能酶，具有（RNA 指导的 DNA 聚合酶活性） 、 （RNA 酶 H 活性） 、 （DNA 指导的 DNA 聚合酶活性）三种功能，但无（35外切酶活性）作用。16. DNA 的损伤突变类型有（ 碱基对的置换） 、 （颠换） 、 （移码突变） 、 （二聚体的形成）和（重排 ） 。17. 引起 DNA 损伤、突变的因素是（DNA 复制的错误） 、 （DNA 的修复合成） 、（包括脱氨基和碱基丢失） 、 （环境因素） 。18. DNA 的损伤修复方式有（光修复）
20、、 （切除修复） 、 （重组修复）和（SOS 修复） 。19. 基因诊断的基本方法有（点突变的诊断） 、 （多态性连锁分析） 、 （基因表达异常的诊断）和（外源 DNA 检测） 。20.细菌基因组由一条（ ）组成；真核生物基因组由（ ）和（ ）形成（ ） 。21原核生物基因表达调控的方式有（转录水平的调控）和（翻译水平的调控） ；其中（转录水平的调控）是主要的方式。22.操纵子由（结构基因） 、 （启动子）和（操纵基因）组成；受（ ）产物的调控。23顺式作用元件按功能可划分为（启动子沉） 、 （增强子） 、 （终止子）和（默子8或衰减子） 。24分子克隆技术的操作包括（ ） 、 （ ） 、 （
21、 ）和（ ）等四个基本过程。 25限制性内切酶分为（型） 、 （型） 、 （型）三种，其中只有（型）在基因工程操作中被应用。26. 限制性内切酶识别（具有迥文结构的 DNA 序列（呈二重旋转对称）序列； DNA 分子在该酶切割下可产生（粘性末端） 、 （平头末端）或（钝性末端）末端。27分子克隆中常用的工具酶有（限制性核酸内切酶） 、 （DNA 连接酶） 、 （DNA聚合酶） 、 （反转录酶）和（多聚核苷酸激酶） （末端转移酶） （碱性磷酸酶） 。28分子克隆中常用的载体有（质粒） 、 （噬菌体） 、 （粘粒） （病毒）和（人工染色体） 。29.目的基因制备的常用方法有（ ） 、 （ ） 、
22、（ ） 。30.体外重组常用方法有（ ） 、 （ ） 、 （ ）和（ ） 。31. 重组体导入原核生物细胞中的常用方法有（ ）和（ ） ；重组体导入真核生物细胞中的常用方法有（ ） 、 （ ）和（ ） 。 32.重组体的筛选方法有（ ） 、 （ ） 、 （ ） 、 （ ） 。33. cDNA 文库的构建步骤是（ ） 、 （ ） （ ） 、 （ ） 。34常用的核酸探针包括（寡核苷酸探针） 、 （双链探针）和（单链探针） 。35放射性同位素标记常用的标记方法有（ ） 、 （ ） 、 （ ） 。36分子克隆中常用的非放射性同位素标记物有（ ） 、 （ ） 、 （ ）等；常用的标记方法有（ ） 、
23、（ ） 。37核酸杂交技术可分为（液相杂交）和（固相杂交）两种类型；后者又可分为（ 膜上印迹杂交）和（细胞原位杂交） 。38印迹杂交中常用的印迹方法有（Southern 印迹杂交） 、 （Northern 印迹杂交） 、9（斑点印迹杂交） 、 （Western 杂交印迹法） ；39PCR 技术的基本过程是（高温变形） 、 （低温退火） 、 （中温延伸） 。40影响 PCR 的因素有（引物） 、 （模板） 、 （Taq DNA 聚合酶） 、 （dNTP ） 、（Mg2+） 、 （ ） 、 （ ） 、 （ ） 。41. PCR 反应的特点是（特异性强） 、 （灵敏度高） 、 （简便快速） 、 （对
24、标本的纯度要求低） 。42. TaqDNA 聚合酶是一种（耐热的 DNA）聚合酶，具有（5-3DNA 聚合酶）和（5-3 外切酶）活性，有或无（3-5 外切酶）活性（又称校对活性） 。43. 一个完整的体外 DNA 重组技术主要包括（获取目的基因） 、 （将目的基因进行必要的改造） 、 （选择和修饰克隆载体） 、 （将目的基因与载体连接获得含有目的基因的重组载体） （重组载体导入相应细胞（称为宿主细胞） ） 、 （ 筛选出含重组 DNA 的细胞等）六个步骤。44.基因工程技术的目的是（获得足够的DNA片段以分析基因的结构） 、 （将获得的 基因用于发展农业、林业、畜牧业和医学） ；基因工程技术
25、的意义是（改造生命）、 （创造新生命） 。45. 限制性核酸内切酶的作用特点是（识别位点的 DNA 序列呈二重旋转对称（即具有迥文结构） （切割 DNA 均产生含 5-磷酸和 3-羟基的末端） 、 （错位切割产生具有 5-或 3-突出的粘性末端；而沿对称轴切割双链 DNA 产生平头末端，也称钝性末端） 、 （少数不同的限制酶可识别和切割相同的位点，这些酶称为同切酶） 。46. pBR322 质粒载体的优点是（分子量较小易于纯化和防止纯化过程中链的断裂）和（具有两种抗生素抗性基因可作为转化子的筛选标志） （是具有较高的拷贝数，为重组体 DNA 的制备提供了极大的方便） 。47. pUC 质粒载体
26、的优点是（有更小的分子量和更高的拷贝数） 、 （可用组织化学方法检测重组体，筛选简单，节省时间）和（具有多克隆位点 MCS 区段） 。48. 噬菌体基因组的特点是（可做为外源 DNA 片段的插入区域，它分三个区域：左侧区、中间区（非必需区） 、右侧区）和（噬菌体的成熟需要经过包装，即需要将重组 DNA 包装进入 噬菌体的头部和尾部蛋白中） 。49. 构建型病毒载体的特点是（有广泛的哺乳动物细胞宿主） 、 （有较大的基因容量） 、 （自身含有完整的转录调控元件） 、 （通过感染方法进入宿主细胞，并有效地整合在宿主染色体 DNA 中） 。1050. 构建 cDNA 文库的主要步骤是（ ） 、 （
27、） 、 （ ） 、 （ ） （ ） 、 （ ） 。三问答题1分子克隆中常用的工具酶有哪些？各有何用途？限制性核酸内切酶 切割 DNADNA 连接酶 生成 3- 5磷酸二酯键DNA 聚合酶 探针标记、补平 3末端反转录酶 cDNA 合成多聚核苷酸激酶 5磷酸化、探针标记末端转移酶 3末端多聚尾碱性磷酸酶 切除末端磷酸基2何谓载体？分子克隆中常用的载体有哪些？理想的载体应具备哪些条件？载体指能够将外源性 DNA（目的 DNA）片段引入宿主细胞并能在宿主细胞中进行自我复制或最终使外源性 DNA 表达的自主 DNA。常用的载体有：质粒、噬菌体、噬菌粒、粘粒、病毒和人工染色体等类型。 理想载体应该具备的
28、条件：1、在 宿 主 细 胞 中 具 有 自 我 复 制 能 力 ， 或 能 够 整 合 到 宿 主 染 色 体 上 与 基 因 组 一 同 表 达 ；2、拷贝数多；3、应具有筛选标志；4、必须有多克隆位点(MCS)，即 RE 切割位点，多个限制酶的单一切点；5、分子量不宜过大，以利于体外操作；6、最好配备有调控元件，如启动子、增强子等；7、载体 DNA 与宿主 DNA 容易分开，便于提纯。3何谓 PCR？试述 PCR 基本技术原理和影响因素。PCR 的概念： PCR 是一种体外扩增特异 DNA 片段的技术,其原理类似于DNA 的体内扩增。它包括：高温变性（90-97 ）低温退火（45-55）中温延伸（72左右） 。变性：待扩增的 DNA 模板加热变性成单链；退火：降低温度，使单链靶序列与寡核苷酸引物退火；延伸：在适当条件下，利用 DNA 聚合酶使引物延伸，产生新的双链。这三个基本步骤的重复循环，导致特异的靶序列的指数扩增。
