1、第一节 概述 工程 :通过构想、设计,按照人们的意愿制作、改造某一事物,以达到预想的目的。 生物工程:按照工程学原理,对生物体或生物大分子进行改造或利用,用于生产、研究、检定和创造新物种的综合性科学技术。 遗传(基因)工程蛋白质工程酶工程细胞工程微生物工程胚胎工程组织工程 分子水平细胞水平组织水平* 1胚胎工程( Embryonic engineering) 又称胚胎技术 ,是指用工程学的原理对动物的胚胎进行某种技术操作或改造,使之获得人们所需要动物的一系列生物技术的总称。一、胚胎操作基本技术1.超数排卵和卵母细胞、精子、受精卵的采集2.体外受精3.胚胎性别控制4.胚胎分割5.胚胎培养6.胚胎
2、移植7.胚胎冷冻保存二、体细胞克隆技术 三、干细胞技术四、外源基因导入技术* 2胚胎工程的应用1.畜牧业: 通过建立超数排卵、受精卵 /卵母细胞的采集、体外受精、胚胎切割、胚胎性别控制、体细胞克隆以及胚胎移植技术,加快良种家畜的繁殖和家畜品种的改良。* 32.生物制药: 通过转基因技术将具有药用价值的生物活性蛋白的基因整合到宿主的染色体上,使其在乳汁、血液、尿液等体液中表达。通过收集、纯化这些体液中的生物活性蛋白,用于预防和治疗某些人类的疾病。* 4已在乳腺表达的生物活性蛋白并进入临床 2期或 3期试验:抗凝血酶一 抗胰蛋白酶蛋白 C乳铁蛋白乳糖酶3.医学: 通过建立卵母细胞的采集、体外受精、
3、显微受精以及胚胎移植技术,用于不孕症的治疗; 通过对胚胎培养和检测,剔除具有遗传性疾病的胚胎,达到优生优育的目的。4.生命科学研究: 阐明哺乳动物早期胚胎发生、发育机制等基础理论。5.拯救濒危野生动物: 通过野生动物生殖细胞和组织的冷冻保存、体细胞克隆和胚胎移植技术,扩大野生动物的种群。* 5第二节 胚胎操作基本技术* 6* 7胚胎操作的整个过程局限在胚胎的早期发育一、精子、卵母细胞、受精卵的采集和超数排卵1.精子的采集 啮齿类小动物精子的采集大都从 体成熟雄性动物 的附睾获取。将动物处死后,分离 附睾尾部 ,用眼科剪子在顶端剪一小口,用手指轻柔挤出浓稠的液滴,置培养液中培养。 大动物的精子采
4、集可采用假阴道或电刺激法促进雄性射精,收集精液。* 8解剖取附睾尾部 精子的获取和培养2.卵母细胞和受精卵的采集 从体内成熟并排到输卵管中去,需通过处死动物或外科手术获取卵母细胞;如果在交配后,则可获取受精卵或早期胚胎。 取自屠宰淘汰的或刚死亡的雌性动物的卵巢,从卵巢中分离卵母细胞经培养而得。* 9小鼠解剖取输卵管从输卵管壶腹部取卵母细胞 /受精卵的方法3.超数排卵( Superovolation)技术: 通过注射激素刺激卵巢大量排卵。经超数排卵处理,动物卵巢大量的卵泡同时成熟并排出,排卵数可增加几倍至十几倍,一次可获得大量的卵细胞、受精卵或早期胚胎 。 所 用激素有促卵泡激素( FSH)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)和孕马血清促性腺激素( PMSG)、孕酮和前列腺素( PG)等,以前三种常用 。* 10