1、免疫组织化学染色方法（S-P 法）免疫细胞化学（immunocytochemistry）是根据免疫学原理，利用抗体同特定抗原专一结合，对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子；抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的 球蛋白。如果将抗体结合上标记物，再与组织中的抗原发生反应，即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于组织中的部位。常用的标记物有荧光素和酶。荧光素标记的称为免疫荧光法（immunofluorescent technique），常用的萤光素有异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate）、罗丹明（rhodamine）等。酶标记的称为酶标免疫法
2、（enzyme-labeled antibody method），常用的酶有辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase），酶与底物发生反应后形成不透明的沉积物，从而显示出抗原存在的部位。抗体与抗原的结合方法可分为直接法和间接法两种，直接法是将带有标记的抗体与抗原反应，显示出抗原存在的部位。而间接法则是在抗体抗原初级反应的基础上，再用带标记的次级抗体同初级抗体反应，从而使初级反应得到放大，显示增强。【实验步骤】1、石蜡切片 4-5m；2、切片脱蜡至水；3、3%甲醇双氧水阻断室温 10 分钟；4、 0.01M(PH 7.2)磷酸盐缓冲液（PBS）洗 5 分钟3 次；抗原修复，加入
3、0.01M（PH 6.0）柠檬酸缓冲液置微波炉中 10 档 3 分 30 秒，之后可进行 2 档 1分至 1 分 30 秒微波维持。5、自然冷却后 PBS 洗，加二抗同种动物非免疫血清封闭，室温 10 分钟；6、免洗，倾出血清，分别滴加配制好的一抗 4过夜；7、PBS 洗 5 分钟 3 次；8、滴加生物素标记的第二抗体，室温孵育 10 分钟；9、PBS 洗 5 分钟 3 次；10、滴加链亲和素-过氧化物酶，室温 10 分钟；11、PBS 洗 5 分钟 3 次；12、新鲜配制的 DAB 溶液显色 3-10 分钟；13、自来水洗，苏木素浅染细胞核，分化。自来水冲洗返兰，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。需要相关抗体试剂的可以访问 Fantibody 全球抗体搜索引擎：http:/ 全球抗体搜索引擎是一个供公共检索的抗体数据库，其抗体信息数据来源于全球范围的研究机构与商业公司。该引擎由商品化抗体数据库与抗体应用评价数据库两部分组成，以帮助研究者更高效的寻找并评估该抗体的性能。全球抗体搜索引擎是继基因与蛋白数据库之后更为复杂的应用型检索平台，由探生科技建立并维护。需要相关的实验室仪器设备、生物试剂、医疗器械、制药设备、医药原料、体外诊断试剂及耗材与技术服务信息的，可以访问探生网进行咨询：http:/
