1、白血病 /淋巴瘤免疫分型苏州大学附属第一医院 江苏省血液研究所卫生部 血栓与止血重点实验室朱明清2010年 8 月 杭州1流式细胞术的基本概念= 流式细胞术（ Flow Cytometry, 简称 FCM） 是一种可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒（通常是细胞）的多项特性的技术，同时可以对特定群体加以分选= 研究对象为生物颗粒，如各种细胞、微生物及人工合成微球等= 研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定量2散射光信号和荧光信号= 前向角散射光（ FSC, Forward Scatter）入射激光的前向散射光信号细胞相对大小及其表面积= 侧向角散射光 （ SSC, Side S
2、catter）入射激光 90角的 散射光信号细胞粒度及细胞内相对复杂性= 荧光素与特异抗体结合，荧光抗体与细胞抗原结合越多，产生的荧光信号越强。3CD45/SS示意图4实验对照的设计 空白对照： ALL 阴性对照： 常用同型抗体对照单色分析：设同型抗体对照多色分析：同型对照，单阳性对照 （用于仪器校正） 阳性对照： 检测阴性时5空白对照和阴性对照的比较：6CD3CD8 需要用多少的标志来确证感兴趣的细胞群 ? 它们在细胞上的分布是不是很近 ? 它们是否在不同的细胞上表达不同 ? 他们表达强还是弱 ?抗原表达CD3CD4CD3CD87抗原分布 表面 ,胞浆 ,核内 是共同检测还是分别检测 ?表面表面 胞浆胞浆 核内核内CD3, CD4, CD8, tetramer cytokines DNACD3,4,8, tetramer+CytokinesCD3,4,8, tetramer+DNACytokines+DNACD3,4,8, tetramer+Cytokines+DNA 8设门08-033079设门全部 细 胞 门 内 细 胞08-0330710
