1、第一节 概述人们经过了长期不懈的努力，渴望揭开生命之谜，虽有进展，但谜仍然是谜。然而，随着 2001年 6月人类基因组草图公布，生命科学也随着进入到一个新的纪元 后基因组时代，即由结构基因组转向功能基因组的研究，大规模、系统地研究基因功能及其在生理和病理过程中的作用。因此，遗传工程动物模型是必不可少的研究工具。一 、 定 义运用各种技术手段有目的地干预动物的遗传组成，导致动物新的性状的出现，并使其能有效地遗传下去，形成新的可供生命科学研究和其他目的所用的动物模型，这类动物可被称为遗传工程动物模型。二 、 技术手段 显微注射转基因技术 基因定位突变技术 化学或放射诱变技术显微注射法胚胎干细胞法(
2、embryonic stem cells， ES细胞 )逆转录病毒感染法精子载体法细胞核移植ENU诱变三 、基本方法第二节 转基因动物uGordon等人首次成功地将含有 HSV和SV40DNA片段的重组质粒 DNA以显微注射法导入小鼠受精卵的雄原核内，得到了带有这种外源 DNA顺序 TGM。u1982年 Palmiter等运用此法得到的所谓 “超级巨鼠 ”,曾引起整个生物学界的轰动。u到目前为止，人类已获得转基因鱼、鼠、羊、猪、兔、牛等等大小动物。u从转基因动物所获得的资料几乎涉及医学遗传、肿瘤学、免疫学等的基因研究，还涉及生物药物的研究，基因治疗的开发研究等。一 、概 念通过实验手段将外源遗
3、传物质导入到动物生殖 细 胞中，并能稳定遗传，由此获得的动物称为转基因动物。遗传改变： 外源 DNA的插入使基因组中任何一个基因的结构发生改变； 外源 DNA的插入使染色体发生重排； 导入可以持久存在的遗传实体。 二 、 基本原理目的基因：显微注射 受精卵或胚胎细胞 整合 植入输卵管 外源基因：顺式作用元件 结构基因 报告基因(report gene) 融合基因显微注射法胚胎干细胞法(embryonic stem cells， ES细胞 )逆转录病毒感染法精子载体法细胞核移植三 、基本方法以单细胞受精卵为靶细胞，利用显微注射技术将构建好的载体 DNA直接注射入受精卵的原核，再将接受注射的受精卵移入假孕母体输卵管继续发育获得转基因动物个体。目前应用较广泛，最早最经典的方法。（一）雄原核显微注射法
